【摘要】：目的:采用大鼠急性脊髓損傷(Acute spinal cord injury,ASCI)模型,觀察夾脊電針對(duì)脊髓損傷后神經(jīng)細(xì)胞軸突再生及相關(guān)抑制因子NogoA、RhoA、ROCKⅡ、MLC表達(dá)及變化規(guī)律,試圖從髓鞘相關(guān)抑制因子啟動(dòng)Rho-ROCKⅡ信號(hào)通路途徑相關(guān)主要因素的研究角度進(jìn)一步揭示夾脊電針治療急性脊髓損傷作用機(jī)制。方法:采用NYU打擊器制備大鼠急性脊髓損傷模型,動(dòng)物分為正常組(Normal組,僅用于Western blot)、模型組(ASCI組)、假手術(shù)組(Sham組)、夾脊電針組(EA組)、抑制劑組(Fasudi1組)。應(yīng)用BBB評(píng)分法對(duì)大鼠急性脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)功能的評(píng)定;HE染色觀察脊髓損傷組織的病理改變;BDA示蹤觀察大鼠ASCI后神經(jīng)通路上神經(jīng)元的變化;免疫組化法檢測(cè)大鼠ASCI后脊髓組織中NogoA、RhoA、ROCKⅡ、MLC的表達(dá)及Western blot法檢測(cè)NogoA、RhoA、ROCKⅡ、MLC各時(shí)間段的蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:1.大鼠急性脊髓損傷后BBB的評(píng)分結(jié)果表明:術(shù)后14d、28d,EA組療效優(yōu)于ASCI組(P0.05)。與術(shù)后14d相比,術(shù)后28dEA組評(píng)分明顯升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.HE染色結(jié)果顯示:EA組、Fasudi1組神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、形態(tài)變化均優(yōu)于ASCI組,且術(shù)后28d效果最佳。3.BDA示蹤結(jié)果顯示:ASCI組、Sham組、EA組、Fasudi1組在腦部、T8-T9段均有大量神經(jīng)元著色,呈現(xiàn)棕黃色顆粒,數(shù)量無(wú)明顯差異(P0.05)。在T12-L1段,四組間BDA示蹤存在顯著差異:在Sham組,仍然存在大量BDA標(biāo)記的神經(jīng)元存在,差異不顯著(P0.05);在ASCI組,標(biāo)記的神經(jīng)元數(shù)量明顯減少,與Sham組相比,差異顯著(P0.05);在EA組與Fasudil組經(jīng)BDA標(biāo)記的存活再生神經(jīng)元與ASCI組相比,數(shù)量明顯增加,差異顯著(P0.05)。4.免疫組化結(jié)果顯示:與ASCI組比較,EA組和Fasudi1組中RhoA、Nogo-A、ROCKⅡ、MLC表達(dá)降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與術(shù)后14d相比,術(shù)后28dEA組中RhoA、Nogo-A、ROCKⅡ、MLC表達(dá)降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.Western blot結(jié)果顯示:與ASCI組比較,EA組和Fasudil組中RhoA、Nogo-A、ROCKⅡ、MLC表達(dá)降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與術(shù)后14d相比,術(shù)后28dEA組中RhoA、Nogo-A、ROCKⅡ、MLC表達(dá)降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.大鼠急性脊髓損傷后損傷區(qū)微環(huán)境中髓鞘相關(guān)抑制因子釋放增加,抑制了軸突再生現(xiàn)象,導(dǎo)致了脊髓繼發(fā)性損害。2.ASCI后損傷區(qū)內(nèi),髓鞘相關(guān)抑制因子被有效激活,促進(jìn)ASCI大鼠損傷區(qū)微環(huán)境中ROCKⅡ的表達(dá),抑制軸突再生,提示Rho-ROCKⅡ信號(hào)通路介導(dǎo)ASCI大鼠軸突抑制因子的釋放,從而抑制軸突再生。3.ROCKⅡ抑制劑(Fasudil)通過(guò)抑制ROCKⅡ的活性,從而阻斷ROCKⅡ激活作用底物,從而減少脊髓損傷后軸突再生障礙,促進(jìn)脊髓損傷神經(jīng)功能恢復(fù)。4.夾脊電針通過(guò)抑制RhoA、Nogo-A、ROCKⅡ、MLC抑制因子在大鼠急性脊髓損傷后微環(huán)境中的表達(dá),促進(jìn)軸突再生,減輕脊髓繼發(fā)性病理?yè)p害,促進(jìn)受損神經(jīng)功能恢復(fù)。
[Abstract]:Objective: to observe the expression and changes of nerve cell axon regeneration and related inhibitory factor NogoA,RhoA,ROCK 鈪，

本文編號(hào)：2277671