本文選題：豬 + 二尖瓣病變��； 參考：《昆明醫(yī)科大學》2017年博士論文

【摘要】：[目的]建立豬的二尖瓣狹窄(Mitral Stenosis,MS)、二尖瓣關閉不全(Mitral Regurgitation,MR)、主動脈瓣狹窄(Aortic Stenosis,AS)及主動脈瓣關閉不全(AorticRegurgitation,AR)模型,為進一步研究瓣區(qū)血流動力學異常與瓣膜進行性損害的關系提供基礎。[方法]1、采取隨機分組方案,將滇南小耳豬隨機分為二尖瓣狹窄組(MS組)、二尖瓣關閉不全組(MR組)、主動脈瓣狹窄組(AS組)、主動脈瓣關閉不全(AR組)及對照組。采用全麻人工機械通氣,經(jīng)胸骨正中切口開胸,在體外循環(huán)(Cardiopulmonary bypass,CPB)直視下創(chuàng)建MS、MR及AS動物模型;采用靜脈麻醉非人工機械通氣,穿刺頸動脈,經(jīng)介入的方式創(chuàng)建AR模型。2、同時于手術前、術后即刻、術后4周對實驗豬進行超聲心動圖檢查,通過測量二尖瓣、主動脈瓣瓣口面積(MVA、AVA),二尖瓣、主動脈瓣峰值流速(MVmax、AVmax),二尖瓣、主動脈瓣平均跨瓣壓差(MPGmean、APGmean),評價MS組及AS組瓣膜狹窄程度;通過測量二尖瓣反流束面積/左心房面積比值(RFMV)、二尖瓣反流量(MVRV)評價MR組MV反流程度;通過測量主動脈瓣反流束寬度/左室流出道內徑比值(RFAV)、主動脈瓣反流量(AVRV)評價AR組AV反流程度。[結果]1、MS組、MR組、AS組及AR組模型制作順利,其中MR組、AS組及AR組在術中建模過程中各死亡1例,MS組術后觀察過程中死亡1例。2、MS組的MVA在術后較術前明顯縮小且有顯著性差異(p0.01),術后4周與術后即刻比較狹窄程度有增大趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);MVmax、MPGmean在術后較術前明顯增大且有顯著性差異(p0.01),術后4周與術后即刻比較有增大趨勢,但差異均無統(tǒng)計學意義(p0.05)。3、MR組的RFMV、MVRV在術后較術前明顯增大且有顯著性差異(p0.01),術后4周與術后即刻比較反流程度有增大趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。4、AS組的AVA在術后較術前明顯縮小且有顯著性差異(p0.01),術后4周與術后即刻比較狹窄程度有增大趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);AVmax、APGmean在術后較術前明顯增大且有顯著性差異(p0.01),術后4周與術后即刻比較有增大趨勢,但差異均無統(tǒng)計學意義(p0.05)。5、AR組的RFAV、AVRV在術后較術前明顯增大且有顯著性差異(p0.01),術后4周與術后即刻比較反流程度有增大趨勢,但差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。[結論]本研究在全麻人工機械通氣的條件下,采用胸骨正中切口開胸經(jīng)CPB直視下成功建立MS、MR及AS動物模型;在靜脈麻醉非人工機械通氣情況下,穿刺頸動脈,經(jīng)介入的方式創(chuàng)建AR組模型。4種模型均能真實客觀地模擬人體在MS、MR、AS及AR四種病理環(huán)境下的血流動力學狀況。4種模型創(chuàng)建的方法科學可靠、可行性強、穩(wěn)定性和重復性好,對于我們進一步研究MS、MR、AS及AR的瓣區(qū)血流動力學異常與瓣膜進行性損害的關系及治療效果有著重要的意義。[目的]明確二尖瓣、主動脈瓣狹窄及關閉不全瓣區(qū)湍流剪應力(Turbulent Shear Stress,TSS)及流場均勻性與瓣膜損害的關系。為進一步研究TSS致心瓣膜內皮細胞損傷的分子生物學機理提供基礎。[方法]1、將已建立成功的動物模型:MS組(n=4)、MR組(n=4)、AS組(n=4)、AR組(n=4)及對照組(n=5)進行1年的隨訪動態(tài)觀察。分別于建模前、術后即刻、術后4個月、術后8個月、術后12個月對各組動物進行超聲心動圖檢查,分別檢測常規(guī)多普勒超聲指標(LVEF、LVEDD、LVESD、LAV、MVA、AVA、MPGmean、APGmean、QMV、QAV、RFMV、RFAV、MVRV、AVRV、EROM、EROA);流場均勻性指標(MVmax、AVmax、△MVmax、△AVmax);應用超聲心動圖結合計算機圖像分析,通過計算流體力學,分析湍流剪應力(TSS)。經(jīng)統(tǒng)計學分析,比較各組與對照組之間的差異。2、在術后12月復查超聲心動圖后,將所有動物處死,取出二尖瓣、腱索及主動脈瓣,根據(jù)TSS檢測結果,將受力最大的部分瓣膜組織經(jīng)中性福爾馬林固定后,石蠟包埋切片,HE染色,光鏡下觀察瓣膜病變及重塑情況,并在透射電鏡下觀察細胞器變化情況。分析各組與對照組瓣膜在組織學及超微結構方面的差異。[結果]1、MS動物模型組術后LVEF、LVEDD、LVESD、LAV指標變化與MS病理生理變化相符;對照組術后MVA、MPGmean、MVmax、△MVmax指標明顯優(yōu)于MS組(P0.05),MS組除QMV外,各項指標于術后8m開始出現(xiàn)明顯變化,MVA 逐漸下降(P0.05),MPGmean、MVmax、△MVmax 逐漸增大(P0.05),二尖瓣區(qū)流場均勻性明顯變差;MS組與對照組術后A4C及A2C切面核心區(qū)位點TSS無差異(P0.05),而周圍邊界各位點TSS有顯著性差異(P0.01),MS組TSS均明顯高于對照組;通過相關性分析可以看出,MVA與MPGmean(-0.784)、MVmax(-0.743)、△MVmax(-0.801)呈負相關,MVA隨時間推移逐漸變小,MPGmean、MVmax、△MVmax逐漸增大;MVA與核心區(qū)位點TSS無明顯相關關系,MVA與周圍邊界各位點TSS呈負相關,隨MVA逐漸減小,周圍邊界各位點TSS逐漸增大。2、MR動物模型組術后LVEF、LVEDD、LVESD、LAV指標變化與MR病理生理變化相符;MR組RFMV、MVRV、EROM、△VMR術后即刻出現(xiàn),但至12m才明顯增大(P0.05);MR組A4C、A2C切面核心區(qū)位點TSS在術后各時間點無變化(P0.05),而周圍邊界各位點TSS在術后12m明顯增高(P0.05),周圍邊界各位點TSS明顯高于核心區(qū)位點TSS(P0.05);通過相關性分析可以看出,EROM 與 RFMV(0.904)、MVRV(0.871)、△VMR(0.916)呈正相關,EROM與VMR無相關關系,并且隨EROM逐漸增大,RFMV、MVRV、△VMR逐漸增大,流場均勻性逐漸變差;EROM與核心區(qū)位點TSS無明顯相關關系,EROM與周圍邊界各位點TSS呈正相關,并隨EROM逐漸增大,周圍邊界位點TSS逐漸增大。3、AS動物模型組術后LVEF、LVEDD、LVESD、LAV指標變化與AS病理生理變化相符;對照組術后除QAV外(P0.05),其余指標AVA、APGmean、AVmax、△AVmax 均優(yōu)于 AS 組(P0.05),AS 組除 QAV外,其余指標于術后12m開始出現(xiàn)明顯變化,AVA明顯下降(P0.05),APGmean、AVmax、△AVmax明顯增大(P0.05),主動脈瓣區(qū)流場均勻性明顯變差;AS組與對照組術后A5C及PLA切面核心區(qū)位點TSS無差異(P0.05),而周圍邊界各位點TSS有顯著性差異(P0.01),AS組TSS均明顯高于對照組;通過相關性分析可以看出,AVA 與 APGmean(-0.812)、AVmax(-0.845)、△AVmax(-0.850)呈負相關,并且隨AVA逐漸減小,APGmean、AVmax、△AVmax逐漸增大;AVA與核心區(qū)位點TSS無明顯相關關系,AVA與周圍邊界各位點TSS呈負相關,并隨AVA逐漸減小,周圍邊界各位點TSS逐漸增大。4、AR動物模型組術后LVEF、LVEDD、LVESD、LAV指標變化與AR病理生理變化相符;AR組RFAV、AVRV、EROA、△VAR術后即刻出現(xiàn),但至12m才明顯增大(P0.05);AR組A5C、PLA切面核心區(qū)位點TSS在術后各時間點無變化(P0.05),而周圍邊界各位點TSS在術后12m明顯增高(P0.05),周圍邊界各位點TSS明顯高于核心區(qū)位點TSS(P0.05);通過相關性分析可以看出,EROA與 RFAV(0.913)、AVRV(0.920)、△VAR(0.842)呈正相關,EROA與VAR無相關關系,并且隨EROA逐漸增大,RFAV、AVRV、△VAR逐漸增大,流場均勻性逐漸變差;EROA與核心區(qū)位點TSS無明顯相關關系,EROA與周圍邊界各位點TSS呈正相關,并隨EROA逐漸減增大,周圍邊界各位點TSS逐漸增大。5、比較MS、MR、AS、AR組與對照組二尖瓣、腱索及主動脈瓣HE染色及透射電鏡結果,對照組二尖瓣、腱索、主動脈瓣組織及MR組腱索結構清晰,層次分明,細胞少,并且未見內皮細胞脫落及明顯膠原纖維組織增生;而MS組的二尖瓣、腱索組織、MR組二尖瓣組織和AS、AR組的主動脈瓣組織的瓣尖及瓣口邊緣部分出現(xiàn)病理改變,結構層次不清,可見膠原纖維及彈力纖維增多,并發(fā)生斷裂,以及組織的玻璃樣改變和粘液樣改變,可見毛細血管增生,部分區(qū)域可見內皮細胞脫落和細胞間質水腫。[結論]二尖瓣、主動脈瓣狹窄及關閉不全瓣區(qū)流場中所產生的湍流剪應力是導致瓣膜進行性損害的重要因素之一。[目的]檢測二尖瓣、主動脈瓣狹窄及關閉不全瓣區(qū)流場中湍流剪應力所對應區(qū)域瓣膜組織中CXCR7的表達,研究湍流剪應力與瓣膜CXCR7表達的相關性。[方法]采用Western Blot、Real-Time RT-PCR及IF方法檢測二尖瓣、主動脈瓣狹窄及關閉不全瓣區(qū)流場中湍流剪應力所對應區(qū)域瓣膜組織中CXCR7的蛋白表達及mRNA水平,以及在組織細胞中的分布情況。經(jīng)統(tǒng)計學分析,比較各組與對照組之間的差異。[結果]1、MS組二尖瓣瓣尖及腱索部CXCR7的蛋白表達、mRNA水平及IF檢測結果高于對照組二尖瓣瓣尖及腱索部,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);2、MR組二尖瓣反流口邊緣部CXCR7的蛋白表達、mRNA水平及IF檢測結果高于對照組二尖瓣瓣口邊緣部,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);MR組腱索部CXCR7的蛋白表達、mRNA水平及IF檢測結果與對照組腱索部差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);3、AS組主動脈瓣瓣口邊緣部CXCR7的蛋白表達、mRNA水平及IF檢測結果高于對照組主動脈瓣瓣口邊緣部,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);4、AR組主動脈瓣反流口邊緣部CXCR7的蛋白表達、mRNA水平及IF檢測結果高于對照組主動脈瓣瓣口邊緣部,差異有統(tǒng)計學意義(P0:05);5、在A4C及A2C切面,MS組二尖瓣及腱索、MR組二尖瓣所受TSS與CXCR7蛋白表達結果、mRNA表達結果、IF結果均呈正相關。在A5C及PLA切面,AS組及AR組主動脈瓣所受TSS與CXCR7蛋白表達結果、mRNA表達結果、IF結果均呈正相關。[結論]二尖瓣、主動脈瓣狹窄及關閉不全瓣區(qū)流場中TSS與瓣膜CXCR7的表達成正相關,CXCR7在TSS導致心臟瓣膜持續(xù)損害的過程中起重要作用。
[Abstract]:[Objective] to establish the porcine mitral stenosis (Mitral Stenosis, MS), mitral regurgitation (Mitral Regurgitation, MR), aortic stenosis (Aortic Stenosis, AS) and aortic regurgitation (AorticRegurgitation, AR) model, provide the basis for the relationship between damage]1 method. Further research on valve hemodynamics abnormality with the valve, were randomly divided into two groups, pigs were randomly divided into mitral stenosis group (MS group), mitral regurgitation group (MR group), aortic stenosis group (AS group), aortic regurgitation (AR group) and the control group. The use of general anesthesia and mechanical ventilation. The median sternotomy incision thoracotomy under cardiopulmonary bypass (Cardiopulmonary bypass CPB) to create MS MR under direct vision, and AS animal model; artificial mechanical ventilation by non intravenous anesthesia, carotid artery puncture, interventional way to create a AR model of.2, at the same time before operation, immediately after operation, 鏈悗4鍛ㄥ瀹為獙鐚繘琛岃秴澹板績鍔ㄥ浘媯，

本文編號：1759311