本文選題：豬 + 二尖瓣病變��； 參考：《昆明醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：[目的]建立豬的二尖瓣狹窄(Mitral Stenosis,MS)、二尖瓣關(guān)閉不全(Mitral Regurgitation,MR)、主動(dòng)脈瓣狹窄(Aortic Stenosis,AS)及主動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全(AorticRegurgitation,AR)模型,為進(jìn)一步研究瓣區(qū)血流動(dòng)力學(xué)異常與瓣膜進(jìn)行性損害的關(guān)系提供基礎(chǔ)。[方法]1、采取隨機(jī)分組方案,將滇南小耳豬隨機(jī)分為二尖瓣狹窄組(MS組)、二尖瓣關(guān)閉不全組(MR組)、主動(dòng)脈瓣狹窄組(AS組)、主動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全(AR組)及對(duì)照組。采用全麻人工機(jī)械通氣,經(jīng)胸骨正中切口開胸,在體外循環(huán)(Cardiopulmonary bypass,CPB)直視下創(chuàng)建MS、MR及AS動(dòng)物模型;采用靜脈麻醉非人工機(jī)械通氣,穿刺頸動(dòng)脈,經(jīng)介入的方式創(chuàng)建AR模型。2、同時(shí)于手術(shù)前、術(shù)后即刻、術(shù)后4周對(duì)實(shí)驗(yàn)豬進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢查,通過測(cè)量二尖瓣、主動(dòng)脈瓣瓣口面積(MVA、AVA),二尖瓣、主動(dòng)脈瓣峰值流速(MVmax、AVmax),二尖瓣、主動(dòng)脈瓣平均跨瓣壓差(MPGmean、APGmean),評(píng)價(jià)MS組及AS組瓣膜狹窄程度;通過測(cè)量二尖瓣反流束面積/左心房面積比值(RFMV)、二尖瓣反流量(MVRV)評(píng)價(jià)MR組MV反流程度;通過測(cè)量主動(dòng)脈瓣反流束寬度/左室流出道內(nèi)徑比值(RFAV)、主動(dòng)脈瓣反流量(AVRV)評(píng)價(jià)AR組AV反流程度。[結(jié)果]1、MS組、MR組、AS組及AR組模型制作順利,其中MR組、AS組及AR組在術(shù)中建模過程中各死亡1例,MS組術(shù)后觀察過程中死亡1例。2、MS組的MVA在術(shù)后較術(shù)前明顯縮小且有顯著性差異(p0.01),術(shù)后4周與術(shù)后即刻比較狹窄程度有增大趨勢(shì),但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);MVmax、MPGmean在術(shù)后較術(shù)前明顯增大且有顯著性差異(p0.01),術(shù)后4周與術(shù)后即刻比較有增大趨勢(shì),但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。3、MR組的RFMV、MVRV在術(shù)后較術(shù)前明顯增大且有顯著性差異(p0.01),術(shù)后4周與術(shù)后即刻比較反流程度有增大趨勢(shì),但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。4、AS組的AVA在術(shù)后較術(shù)前明顯縮小且有顯著性差異(p0.01),術(shù)后4周與術(shù)后即刻比較狹窄程度有增大趨勢(shì),但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);AVmax、APGmean在術(shù)后較術(shù)前明顯增大且有顯著性差異(p0.01),術(shù)后4周與術(shù)后即刻比較有增大趨勢(shì),但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。5、AR組的RFAV、AVRV在術(shù)后較術(shù)前明顯增大且有顯著性差異(p0.01),術(shù)后4周與術(shù)后即刻比較反流程度有增大趨勢(shì),但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。[結(jié)論]本研究在全麻人工機(jī)械通氣的條件下,采用胸骨正中切口開胸經(jīng)CPB直視下成功建立MS、MR及AS動(dòng)物模型;在靜脈麻醉非人工機(jī)械通氣情況下,穿刺頸動(dòng)脈,經(jīng)介入的方式創(chuàng)建AR組模型。4種模型均能真實(shí)客觀地模擬人體在MS、MR、AS及AR四種病理環(huán)境下的血流動(dòng)力學(xué)狀況。4種模型創(chuàng)建的方法科學(xué)可靠、可行性強(qiáng)、穩(wěn)定性和重復(fù)性好,對(duì)于我們進(jìn)一步研究MS、MR、AS及AR的瓣區(qū)血流動(dòng)力學(xué)異常與瓣膜進(jìn)行性損害的關(guān)系及治療效果有著重要的意義。[目的]明確二尖瓣、主動(dòng)脈瓣狹窄及關(guān)閉不全瓣區(qū)湍流剪應(yīng)力(Turbulent Shear Stress,TSS)及流場(chǎng)均勻性與瓣膜損害的關(guān)系。為進(jìn)一步研究TSS致心瓣膜內(nèi)皮細(xì)胞損傷的分子生物學(xué)機(jī)理提供基礎(chǔ)。[方法]1、將已建立成功的動(dòng)物模型:MS組(n=4)、MR組(n=4)、AS組(n=4)、AR組(n=4)及對(duì)照組(n=5)進(jìn)行1年的隨訪動(dòng)態(tài)觀察。分別于建模前、術(shù)后即刻、術(shù)后4個(gè)月、術(shù)后8個(gè)月、術(shù)后12個(gè)月對(duì)各組動(dòng)物進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢查,分別檢測(cè)常規(guī)多普勒超聲指標(biāo)(LVEF、LVEDD、LVESD、LAV、MVA、AVA、MPGmean、APGmean、QMV、QAV、RFMV、RFAV、MVRV、AVRV、EROM、EROA);流場(chǎng)均勻性指標(biāo)(MVmax、AVmax、△MVmax、△AVmax);應(yīng)用超聲心動(dòng)圖結(jié)合計(jì)算機(jī)圖像分析,通過計(jì)算流體力學(xué),分析湍流剪應(yīng)力(TSS)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,比較各組與對(duì)照組之間的差異。2、在術(shù)后12月復(fù)查超聲心動(dòng)圖后,將所有動(dòng)物處死,取出二尖瓣、腱索及主動(dòng)脈瓣,根據(jù)TSS檢測(cè)結(jié)果,將受力最大的部分瓣膜組織經(jīng)中性福爾馬林固定后,石蠟包埋切片,HE染色,光鏡下觀察瓣膜病變及重塑情況,并在透射電鏡下觀察細(xì)胞器變化情況。分析各組與對(duì)照組瓣膜在組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)方面的差異。[結(jié)果]1、MS動(dòng)物模型組術(shù)后LVEF、LVEDD、LVESD、LAV指標(biāo)變化與MS病理生理變化相符;對(duì)照組術(shù)后MVA、MPGmean、MVmax、△MVmax指標(biāo)明顯優(yōu)于MS組(P0.05),MS組除QMV外,各項(xiàng)指標(biāo)于術(shù)后8m開始出現(xiàn)明顯變化,MVA 逐漸下降(P0.05),MPGmean、MVmax、△MVmax 逐漸增大(P0.05),二尖瓣區(qū)流場(chǎng)均勻性明顯變差;MS組與對(duì)照組術(shù)后A4C及A2C切面核心區(qū)位點(diǎn)TSS無差異(P0.05),而周圍邊界各位點(diǎn)TSS有顯著性差異(P0.01),MS組TSS均明顯高于對(duì)照組;通過相關(guān)性分析可以看出,MVA與MPGmean(-0.784)、MVmax(-0.743)、△MVmax(-0.801)呈負(fù)相關(guān),MVA隨時(shí)間推移逐漸變小,MPGmean、MVmax、△MVmax逐漸增大;MVA與核心區(qū)位點(diǎn)TSS無明顯相關(guān)關(guān)系,MVA與周圍邊界各位點(diǎn)TSS呈負(fù)相關(guān),隨MVA逐漸減小,周圍邊界各位點(diǎn)TSS逐漸增大。2、MR動(dòng)物模型組術(shù)后LVEF、LVEDD、LVESD、LAV指標(biāo)變化與MR病理生理變化相符;MR組RFMV、MVRV、EROM、△VMR術(shù)后即刻出現(xiàn),但至12m才明顯增大(P0.05);MR組A4C、A2C切面核心區(qū)位點(diǎn)TSS在術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)無變化(P0.05),而周圍邊界各位點(diǎn)TSS在術(shù)后12m明顯增高(P0.05),周圍邊界各位點(diǎn)TSS明顯高于核心區(qū)位點(diǎn)TSS(P0.05);通過相關(guān)性分析可以看出,EROM 與 RFMV(0.904)、MVRV(0.871)、△VMR(0.916)呈正相關(guān),EROM與VMR無相關(guān)關(guān)系,并且隨EROM逐漸增大,RFMV、MVRV、△VMR逐漸增大,流場(chǎng)均勻性逐漸變差;EROM與核心區(qū)位點(diǎn)TSS無明顯相關(guān)關(guān)系,EROM與周圍邊界各位點(diǎn)TSS呈正相關(guān),并隨EROM逐漸增大,周圍邊界位點(diǎn)TSS逐漸增大。3、AS動(dòng)物模型組術(shù)后LVEF、LVEDD、LVESD、LAV指標(biāo)變化與AS病理生理變化相符;對(duì)照組術(shù)后除QAV外(P0.05),其余指標(biāo)AVA、APGmean、AVmax、△AVmax 均優(yōu)于 AS 組(P0.05),AS 組除 QAV外,其余指標(biāo)于術(shù)后12m開始出現(xiàn)明顯變化,AVA明顯下降(P0.05),APGmean、AVmax、△AVmax明顯增大(P0.05),主動(dòng)脈瓣區(qū)流場(chǎng)均勻性明顯變差;AS組與對(duì)照組術(shù)后A5C及PLA切面核心區(qū)位點(diǎn)TSS無差異(P0.05),而周圍邊界各位點(diǎn)TSS有顯著性差異(P0.01),AS組TSS均明顯高于對(duì)照組;通過相關(guān)性分析可以看出,AVA 與 APGmean(-0.812)、AVmax(-0.845)、△AVmax(-0.850)呈負(fù)相關(guān),并且隨AVA逐漸減小,APGmean、AVmax、△AVmax逐漸增大;AVA與核心區(qū)位點(diǎn)TSS無明顯相關(guān)關(guān)系,AVA與周圍邊界各位點(diǎn)TSS呈負(fù)相關(guān),并隨AVA逐漸減小,周圍邊界各位點(diǎn)TSS逐漸增大。4、AR動(dòng)物模型組術(shù)后LVEF、LVEDD、LVESD、LAV指標(biāo)變化與AR病理生理變化相符;AR組RFAV、AVRV、EROA、△VAR術(shù)后即刻出現(xiàn),但至12m才明顯增大(P0.05);AR組A5C、PLA切面核心區(qū)位點(diǎn)TSS在術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)無變化(P0.05),而周圍邊界各位點(diǎn)TSS在術(shù)后12m明顯增高(P0.05),周圍邊界各位點(diǎn)TSS明顯高于核心區(qū)位點(diǎn)TSS(P0.05);通過相關(guān)性分析可以看出,EROA與 RFAV(0.913)、AVRV(0.920)、△VAR(0.842)呈正相關(guān),EROA與VAR無相關(guān)關(guān)系,并且隨EROA逐漸增大,RFAV、AVRV、△VAR逐漸增大,流場(chǎng)均勻性逐漸變差;EROA與核心區(qū)位點(diǎn)TSS無明顯相關(guān)關(guān)系,EROA與周圍邊界各位點(diǎn)TSS呈正相關(guān),并隨EROA逐漸減增大,周圍邊界各位點(diǎn)TSS逐漸增大。5、比較MS、MR、AS、AR組與對(duì)照組二尖瓣、腱索及主動(dòng)脈瓣HE染色及透射電鏡結(jié)果,對(duì)照組二尖瓣、腱索、主動(dòng)脈瓣組織及MR組腱索結(jié)構(gòu)清晰,層次分明,細(xì)胞少,并且未見內(nèi)皮細(xì)胞脫落及明顯膠原纖維組織增生;而MS組的二尖瓣、腱索組織、MR組二尖瓣組織和AS、AR組的主動(dòng)脈瓣組織的瓣尖及瓣口邊緣部分出現(xiàn)病理改變,結(jié)構(gòu)層次不清,可見膠原纖維及彈力纖維增多,并發(fā)生斷裂,以及組織的玻璃樣改變和粘液樣改變,可見毛細(xì)血管增生,部分區(qū)域可見內(nèi)皮細(xì)胞脫落和細(xì)胞間質(zhì)水腫。[結(jié)論]二尖瓣、主動(dòng)脈瓣狹窄及關(guān)閉不全瓣區(qū)流場(chǎng)中所產(chǎn)生的湍流剪應(yīng)力是導(dǎo)致瓣膜進(jìn)行性損害的重要因素之一。[目的]檢測(cè)二尖瓣、主動(dòng)脈瓣狹窄及關(guān)閉不全瓣區(qū)流場(chǎng)中湍流剪應(yīng)力所對(duì)應(yīng)區(qū)域瓣膜組織中CXCR7的表達(dá),研究湍流剪應(yīng)力與瓣膜CXCR7表達(dá)的相關(guān)性。[方法]采用Western Blot、Real-Time RT-PCR及IF方法檢測(cè)二尖瓣、主動(dòng)脈瓣狹窄及關(guān)閉不全瓣區(qū)流場(chǎng)中湍流剪應(yīng)力所對(duì)應(yīng)區(qū)域瓣膜組織中CXCR7的蛋白表達(dá)及mRNA水平,以及在組織細(xì)胞中的分布情況。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,比較各組與對(duì)照組之間的差異。[結(jié)果]1、MS組二尖瓣瓣尖及腱索部CXCR7的蛋白表達(dá)、mRNA水平及IF檢測(cè)結(jié)果高于對(duì)照組二尖瓣瓣尖及腱索部,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2、MR組二尖瓣反流口邊緣部CXCR7的蛋白表達(dá)、mRNA水平及IF檢測(cè)結(jié)果高于對(duì)照組二尖瓣瓣口邊緣部,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);MR組腱索部CXCR7的蛋白表達(dá)、mRNA水平及IF檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組腱索部差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3、AS組主動(dòng)脈瓣瓣口邊緣部CXCR7的蛋白表達(dá)、mRNA水平及IF檢測(cè)結(jié)果高于對(duì)照組主動(dòng)脈瓣瓣口邊緣部,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);4、AR組主動(dòng)脈瓣反流口邊緣部CXCR7的蛋白表達(dá)、mRNA水平及IF檢測(cè)結(jié)果高于對(duì)照組主動(dòng)脈瓣瓣口邊緣部,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0:05);5、在A4C及A2C切面,MS組二尖瓣及腱索、MR組二尖瓣所受TSS與CXCR7蛋白表達(dá)結(jié)果、mRNA表達(dá)結(jié)果、IF結(jié)果均呈正相關(guān)。在A5C及PLA切面,AS組及AR組主動(dòng)脈瓣所受TSS與CXCR7蛋白表達(dá)結(jié)果、mRNA表達(dá)結(jié)果、IF結(jié)果均呈正相關(guān)。[結(jié)論]二尖瓣、主動(dòng)脈瓣狹窄及關(guān)閉不全瓣區(qū)流場(chǎng)中TSS與瓣膜CXCR7的表達(dá)成正相關(guān),CXCR7在TSS導(dǎo)致心臟瓣膜持續(xù)損害的過程中起重要作用。
[Abstract]:[Objective] to establish the porcine mitral stenosis (Mitral Stenosis, MS), mitral regurgitation (Mitral Regurgitation, MR), aortic stenosis (Aortic Stenosis, AS) and aortic regurgitation (AorticRegurgitation, AR) model, provide the basis for the relationship between damage]1 method. Further research on valve hemodynamics abnormality with the valve, were randomly divided into two groups, pigs were randomly divided into mitral stenosis group (MS group), mitral regurgitation group (MR group), aortic stenosis group (AS group), aortic regurgitation (AR group) and the control group. The use of general anesthesia and mechanical ventilation. The median sternotomy incision thoracotomy under cardiopulmonary bypass (Cardiopulmonary bypass CPB) to create MS MR under direct vision, and AS animal model; artificial mechanical ventilation by non intravenous anesthesia, carotid artery puncture, interventional way to create a AR model of.2, at the same time before operation, immediately after operation, 鏈悗4鍛ㄥ瀹為獙鐚繘琛岃秴澹板績(jī)鍔ㄥ浘媯，

本文編號(hào)：1759311