發(fā)布時間：2018-04-01 01:27

  本文選題：肥胖　切入點：胃粘膜上皮內(nèi)瘤變　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學院》2017年博士論文

【摘要】：第一部分研究背景萎縮性胃炎,腸上皮化生和胃粘膜上皮內(nèi)瘤變被證實是胃癌的癌前疾病,并且其進展為胃癌的幾率逐次升高,被認為是胃癌發(fā)生的“級聯(lián)反應(yīng)”。在這些病變中,胃粘膜上皮內(nèi)瘤變(尤其是高級別瘤變)被認為是進展為胃癌的最后一步。但是,關(guān)于胃粘膜上皮內(nèi)瘤變尤其是高級別瘤變的危險因素目前人沒有被充分闡述。肥胖已經(jīng)被證實是多種惡性腫瘤發(fā)生的危險因素,包括胃癌、乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、結(jié)直腸癌、食管癌、肝癌、胰腺癌、膽囊癌及腎癌。高膽固醇血癥已經(jīng)被證實是多種疾病尤其是心血管疾病的危險因素。除此之外,一些研究也證實了較低的血清膽固醇水平可能增加癌癥病人的死亡率。同時,高血清膽固醇水平也被證實與胃癌的發(fā)生相關(guān),特別是腸型胃癌。但是,肥胖和血清膽固醇水平與胃粘膜上皮內(nèi)瘤變之間風險關(guān)系目前還沒有被詳細的研究。研究目的研究肥胖、血清總膽固醇水平與胃粘膜上皮內(nèi)瘤變之間的風險關(guān)系研究方法回顧性分析北京協(xié)和醫(yī)院2000年1月-2015年12月胃粘膜上皮內(nèi)瘤變的患者及同期健康對照人群,采集相關(guān)人群體重指數(shù)(body mass index,BMI)和血清總膽固醇水平,計算相關(guān)風險因素的OR值和相應(yīng)的95%可信區(qū)間(95%confidence intervals,CI)。研究結(jié)果(1)在校正了年齡、吸煙史、酗酒史、胃癌或食管癌家族史以及血清總膽固醇水平之后,肥胖(BMI ranging from27.5 to 29.9)被證實是胃粘膜上皮內(nèi)瘤變的危險因素(adjusted OR=1.87 for men with 95%CI of 1.24-2.81;adjusted OR=2.72 for women with 95%CI of 1.44-5.16)。但是對于超重(BMI ranging from 23.0 to 27.4)和重度肥胖(BMI=30.0 or more)而言,在矯正年齡、吸煙史、酗酒史、胃癌或食管癌家族史以及血清總膽固醇水平之后,沒有發(fā)現(xiàn)其是胃粘膜上皮內(nèi)瘤變的危險因素。(2)高血清總膽固醇血癥(4.55mmol/L)可以增加女性胃粘膜上皮內(nèi)瘤變的發(fā)病風險(adjusted OR=1.83,95%CI=1.25-2.69)。但與男性胃粘膜上皮內(nèi)瘤變的發(fā)病無關(guān)。研究結(jié)論(1)27.5≤BMI30是男性胃粘膜上皮內(nèi)瘤變的獨立危險因素。(2)27.5≤BMI30是女性胃粘膜上皮內(nèi)瘤變的獨立危險因素。(3)血清總膽固醇水平4.45mmol/L是女性胃粘膜上皮內(nèi)瘤變的獨立危險因素。第二部分研究背景NUCKS1(nuclear,casein kinase and cyclin-dependent kinase substrate 1)是一種分子量為27kDa的蛋白質(zhì),與HMG家族成員相似。編碼NUCKS蛋白的基因定位于人染色體1q32。NUCKS廣泛表達在人體的多種組織中,參與人體的營養(yǎng)代謝。研究顯示,在人體脂肪組織中,NUCKS1的表達與體重指數(shù)(Body mass index,BMI)呈負相關(guān),提示NUCKS1可能與細胞的代謝相關(guān)。BeiyingQiu等研究顯示在敲除NUCKS基因后,小鼠更容易出現(xiàn)體重增加和胰島素抵抗,進而可導致肥胖和糖尿病。同時,研究顯示NUCKS1在包括乳腺癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌等多種惡性腫瘤中高表達,提示NUCKS1在惡性腫瘤中可能行使癌基因的作用。NUCKS1具體的作用機制目前還沒有被完全解釋清楚,Beiying Qiu等的研究結(jié)果顯示,NUCKS通過PI3K/AKT信號通路調(diào)節(jié)細胞的能量代謝。而PIK3/Akt/mTOR信號通路還被報道參與多種惡性腫瘤的有氧糖酵解和腫瘤增殖。綜上所述,提示NUCKS1可能通過調(diào)控調(diào)控PIK3/Akt/mTOR信號通路的激活,并以此調(diào)節(jié)腫瘤增殖。研究目的研究NUCKS1在胃癌中的功能及其具體的作用機制。研究方法(1)收集北京協(xié)和醫(yī)院胃腺癌癌石蠟標本及相應(yīng)癌旁組織標本;應(yīng)用免疫組織化學法檢測NUCKS1蛋白在組織及癌旁組織的表達;研究中分類變量的比較采用chi-square檢驗;NUCKS1在胃癌及癌旁組織的表達差異的檢測采用Mann-Whitney U檢驗。使用Kaplan-Meier法構(gòu)建生存曲線,同時組間生存差異的比較采用Log-rank檢驗。而后我們采用Cox regression進行危險因素的單因素分析和多因素分析以評估NUCKS1蛋白在胃癌患者總生存期和無病生存期中的作用。(2)采用weternblot檢驗NUCKS1在幾種常用胃癌細胞系中的表達,采用小干擾RNA(Small interferingRNA,siRNA)敲低 SGC-7901 和 NCI-N87 細胞系中 NUCKS1 的表達,或用質(zhì)粒載體在AGS細胞系中過表達NUCKS1;Transwell法檢測各組胃癌細胞的遷移、侵襲能力;CCK8法檢測相關(guān)胃癌細胞的增殖能力;流式細胞儀檢測胃癌細胞的細胞周期分布情況及凋亡情況;Western blotting法檢測與遷移、侵襲及細胞周期有關(guān)的蛋白MMP-2、MMP-9和KLF4的表達。(3)敲低或過表達NUCKS1后,采用weternblot檢驗PI3K/Akt/mTOR信號通路中關(guān)鍵分子的表達。然后,在AGS中過表達NUCKS1后敲低IGF-1R后,用之前方法檢測細胞增殖、遷移、侵襲能力及PI3K/Akt/mTOR信號通路的抑制情況。隨后,使用免疫組化檢驗人胃腺癌組織中IGF-1R與NUCKS1表達的相關(guān)性,同時使用雙熒光素酶報告基因檢測NUCKS1對IGF-1R轉(zhuǎn)錄的調(diào)控情況。研究結(jié)果(1)NUCKS1蛋白在人胃腺癌組織中的高表達率為42%,高于癌旁組織的12.2%(P0.001)。同時,NUCKS1在病理分級G3-G4級(P=0.021),或Lauren分型彌漫型(P=0.042),或有脈管浸潤(P=0.036),或TNM分期Ⅲ期期(P=0.006)的胃腺癌組織中表達明顯升高。此外,NUCKS1高表達組胃癌患者的5年總生存率(overall survival,OS)是 16.7%,顯著低于 NUCKS1 正常表達者(55.2%,P0.001),同時NUCKS1高表達患者5年無病生存率為18.6%,NUCKS1正常表達患者為53.4%,兩組差異具有統(tǒng)計學意義(P0.001)。(2)Western blot 顯示 NUCKS1 在胃癌細胞株 SGC-7901,NCI-N87 和 MGC-803 中陽性表達,在胃癌細胞株AGS和HGC-27及胃粘膜上皮永生化細胞GES-1低表達。使用siRNA敲低NUCKS1后,SGC-7901和NCI-N87細胞的增殖、遷移和侵襲能力得到削弱,細胞周期阻滯在G1/G0期,細胞凋亡率增加。使用質(zhì)粒載體過表達NUCKS1后,AGS細胞的的增殖、遷移和侵襲能力得到增強,細胞周期中G1/G0期的比例減少。同時,高表達NUCKS1后,體內(nèi)實驗證實腫瘤增殖加快。(3)使用siRNA在AGS-NUCKS1中敲低IGF-1R后,細胞的增殖、遷移和侵襲能力得到削弱,細胞周期G1/G0期比例升高,細胞凋亡率增加。過表達NUCKS1后,western blot顯示PI3K/Akt/mTOR信號通路中關(guān)鍵分子表達水平升高,繼而敲低IGF-1R后,相關(guān)分子表達水平下降。免疫組化顯示在人胃腺癌組織中IGF-1R的表達與NUCKS1的表達呈正相關(guān)(r=0.6237,P0.001)。雙熒光素酶報告基因顯示過表達NUCKS1可增強IGF-1R啟動子的活性(P=0.011)研究結(jié)論(1)NUCKS1蛋白在人胃腺癌組織中高表達,其表達水平與胃癌患者病理分級、TNM分期、Lauren分型及脈管浸潤呈正相關(guān)。同時,NUCKS1高表達作為胃癌患者的預(yù)后不良的獨立危險因子。(2)NUCKS1可作為癌基因促進胃癌細胞的增殖、遷移、侵襲及成瘤能力。(3)NUCKS1可正向調(diào)控IGF-1R的轉(zhuǎn)錄,進而激活PI3K/Akt/mTOR信號通路在胃癌細胞中行使癌基因的功能。第三部分研究背景胃癌是全球發(fā)病率第四位的惡性腫瘤,并在惡性腫瘤導致的死亡中排名第三位。胃癌的高發(fā)區(qū)為東亞,尤其在我國,胃癌嚴重威脅我國人民健康。在我國,胃癌的發(fā)病率在男性中居第二位,在女性中居第三位。目前,手術(shù)是治療胃癌最主要的手段。但自從1989年Wilke等首先報道了在胃癌中使用新輔助化療后,新輔助化療在胃癌的治療中越來越被接受,新輔助化療的優(yōu)點主要有:使腫瘤降期;提高根治性切除率;消滅腫瘤微轉(zhuǎn)移灶。越來越多額RCT研究也證實新輔助化療可以提高胃癌患者的總生存期。新輔助化療的另一個優(yōu)點是可以評估患者對化療的反應(yīng),從而指導醫(yī)生對患者術(shù)后化療方案的選擇。當然,新輔助化療療效的評估和預(yù)測也是目前研究的難點和焦點。因此,我們分析2007年2月至2017年3月于本院就診的進展期胃癌行新輔助化療治療患者的臨床資料,評估進展期胃癌患者行新輔助治療后的臨床病理特征及效果,探索影響新輔助化療療效的因素研究目的研究新輔助化療對進展期胃癌的作用及新輔助化療前后T分期降期對進展期胃癌患者預(yù)后的預(yù)測作用研究方法回顧性分析我院2007年2月至2017年3月180例進展期胃癌行新輔助化療的病歷資料,分析新輔助化療對T3-4期進展胃癌患者預(yù)后的影響。同時,評價新輔助化療后T分期降期對T3-4期胃癌預(yù)后的預(yù)測作用。研究結(jié)果(1)男性占70%(126/180),女性占30%(54/180)。年齡19-82歲,平均年齡59±11.86歲。R0切除者166例,占92.2%�；颊咂骄邮�2-5周期的新輔助化療。術(shù)中清掃淋巴結(jié)5-77枚,平均28枚,淋巴結(jié)陽性者占68%(100/148)。220例患者新輔助化療后評價為CR(完全緩解)者6例,PR(部分緩解)者91例,SD(疾病穩(wěn)定)者63例,PD(疾病進展)者20例�；熡行�(CR+PR)為53.9%(97/180),疾病控制率(CR+PR+PD)為88.9%(160/180)。在接受新輔助化療及根治性手術(shù)的患者中,有156人(94%)基線T分期為T3-4。在這156人中,67人經(jīng)過新輔助化療T分期降期為ypT0-2(42.9%),術(shù)后病理分期為ypT3-4的病人為89人(57.1%)。(2)對于cT3-4期進展期胃癌患者,新輔助化療組五年總生存率為50.6%,對照組五年總生存率為42.5%,兩組差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.046)。新輔助化療組五年無病生存率為55.2%,對照組五年無病生存率為40.4%,兩組差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P=0.007)(3)生存分析結(jié)果顯示降期組(病理結(jié)果示降期至ypT0-T2)五年總生存率為81.9%,未降期組(病理結(jié)果示未降期至ypT0-T2期)五年總生存率為36.3%,兩組差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P=0.003)。降期組五年無病生存率為82.3%,未降期組五年無病生存率為40.0%,兩組差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P=0.002)。研究結(jié)論(1)新輔助化療可提高cT3/T4期進展期胃癌患者的5年無病生存率和5年總生存率。(2)新輔助化療后病理T分期為ypT0-2是cT3/T4期進展期胃癌患者預(yù)后良好的獨立預(yù)測指標。
[Abstract]:High serum cholesterol levels have been shown to be a risk factor for gastric cancer . However , high serum cholesterol levels have been shown to be a risk factor for gastric cancer . However , there has been no detailed study of the risk factors associated with gastric cancer , including gastric cancer , breast cancer , endometrial carcinoma , ovarian cancer , colorectal cancer , esophageal cancer , liver cancer , pancreatic cancer , gallbladder cancer and renal cancer . anging from27.5 to 29.9)琚瘉瀹炴槸鑳冪矘鑶滀笂鐨唴鐦ゅ彉鐨勫嵄闄╁洜绱，

本文編號：1693369