本文選題：內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎　切入點(diǎn)：內(nèi)毒素耐受　出處：《首都醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：目的:通過脂多糖預(yù)處理研究內(nèi)毒素耐受對于大鼠內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎的作用,并觀察包括白細(xì)胞介素1受體相關(guān)激酶M在內(nèi)的相關(guān)分子的表達(dá)改變方法:90只雄性Wistar大鼠被隨機(jī)分配到三個實(shí)驗(yàn)組:正常對照組(NC)、內(nèi)毒素耐受組(ET)和內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎組(EIU),每組30只。通過皮下注射脂多糖(200μg)誘導(dǎo)Wistar大鼠內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎(EIU、ET)。在誘導(dǎo)模型前連續(xù)五天,給予大鼠腹腔注射小劑量脂多糖(0.1 mg/kg)(ET)或其溶劑(EIU、NC)。內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎24小時后,使用裂隙燈檢查大鼠眼部炎癥后處死大鼠并取眼球。通過組織病理學(xué)檢查判斷大鼠眼內(nèi)炎癥反應(yīng)強(qiáng)度。通過實(shí)時定量逆轉(zhuǎn)錄PCR和Western blot研究NF-k B的激活情況以及IRAK-1、IRAK-4和IRAKM的表達(dá)。結(jié)果:脂多糖的重復(fù)預(yù)處理顯著抑制了眼內(nèi)炎癥(P0.001)及NF-κb p65在細(xì)胞核內(nèi)蛋白表達(dá)的表達(dá)(P0.01)。內(nèi)毒素耐受組中IRAK-1和IRAK-4的m RNA及蛋白表達(dá)較內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎組(EIU)明顯受到抑制(P0.01),而IRAKM的m RNA及蛋白表達(dá)則有所上升(P0.01)。結(jié)論:內(nèi)毒素耐受對于內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎有保護(hù)作用,IRAK-M通過Toll樣受體信號通路的上調(diào)可能是內(nèi)毒素耐受發(fā)生的原因。目的:使用包含m RNA及長鏈非編碼RNA(lnc RNA)的高通量基因芯片,研究紅芪多糖預(yù)處理內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎大鼠后的差異表達(dá)m RNA及長鏈非編碼RNA。通過基因功能富集分析(Gene Ontology,GO),信號通路分析(Pathway analysis)和共表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)等篩選出具有研究價值的基因。方法:使用紅芪多糖(400mg/kg)或生理鹽水于脂多糖注射前24小時及1小時前腹腔注射各預(yù)處理5只Wistar大鼠后,使用脂多糖(200μg)誘導(dǎo)大鼠葡萄膜炎。觀察大鼠眼內(nèi)炎癥臨床表現(xiàn)后提取大鼠虹膜睫狀體組織RNA并使用基因表達(dá)譜芯片技術(shù)檢測差異表達(dá)的m RNA及l(fā)nc RNA基因。運(yùn)用基因功能富集分析(Gene Ontology,GO)、信號通路分析和共表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)對篩選出的差異基因之間的調(diào)控作用進(jìn)行深入分析并篩選出靶基因。結(jié)果:經(jīng)紅芪多糖預(yù)處理的大鼠在脂多糖刺激后眼部炎癥收到顯著抑制(P0.05)。以FC(abs)1.5和P值0.05為標(biāo)準(zhǔn)篩選出254個差異表達(dá)的m RNA基因及68個lnc RNA基因。GO分析顯示差異基因顯著功能主要集中在脂多糖反應(yīng)、細(xì)菌來源分子反應(yīng)、趨化因子活動、趨化因子受體結(jié)合、淋巴細(xì)胞遷徙、淋巴細(xì)胞遷徙正調(diào)控、細(xì)胞因子活動、淋巴細(xì)胞趨藥性和白細(xì)胞遷徙等。而差異基因的顯著信號通路則包括細(xì)胞因子-細(xì)胞因子相互作用、Toll樣受體信號通路、炎癥調(diào)控趨化因子及細(xì)胞因子信號通路、腫瘤壞死因子(TNF)信號通路和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。通過共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析篩選出表達(dá)于網(wǎng)絡(luò)核心位置的16個m RNA和7個lnc RNA基因。結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)紅芪多糖通過多條與炎癥及免疫相關(guān)的信號傳導(dǎo)通路發(fā)揮對內(nèi)毒素誘導(dǎo)葡萄膜炎的抗炎作用。通過一系列篩選過程獲得了多個備選的抗炎靶基因,其中通過上調(diào)富亮氨酸重復(fù)蛋白-1和下調(diào)基因集落刺激因子1以及通過lnc RNA調(diào)控NF-κB發(fā)揮抗炎作用有較大的可能和研究價值。
[Abstract]:Objective: through the study of lipopolysaccharide pretreatment in endotoxin tolerant rats for endotoxin induced uveitis function, and to observe the expression of related molecules including interleukin 1 receptor associated kinase M, the change of methods: 90 male Wistar rats were randomly assigned to three experimental groups: normal control group (NC), endotoxin tolerance group (ET) and endotoxin induced uveitis (EIU group), 30 rats in each group. By subcutaneous injection of LPS (200 g) of Wistar rats induced by endotoxin induced uveitis (EIU, ET). In the former model was induced for five consecutive days, the rats were given small dose of intraperitoneal injection of LPS (0.1 mg/kg) (ET) or its solvent (EIU, NC). 24 hours after endotoxin induced uveitis, ocular inflammation using slit lamp examination in rats after the rats were killed and the eyeballs. By histopathological examination to determine the rat ocular inflammation intensity. By real-time quantitative reverse transcription PCR and West Ern blot of NF-k B activation and IRAK-1, expression of IRAK-4 and IRAKM. Results: repeated LPS pretreatment significantly inhibited the intraocular inflammation (P0.001) and the expression of NF- kappa B p65 in nucleus protein expression (P0.01). The expression of M RNA and IRAK-1 protein and IRAK-4 in endotoxin tolerance group was induced by endotoxin uveitis group (EIU) was significantly inhibited (P0.01), and the expression of M protein and RNA IRAKM increased (P0.01). Conclusion: the endotoxin tolerance for endotoxin induced uveitis has a protective effect, IRAK-M through Toll like receptor signaling pathway upregulation may be the cause of endotoxin tolerance occurred. Objective: using a m RNA and long the chain of non RNA (LNC RNA) encoding the high-throughput gene chip of Hedysari polysaccharide pretreatment in endotoxin induced uveitis in rats after the difference of expression of M RNA and long chain non encoding by RNA. gene function enrichment analysis (Ge NE, Ontology, GO) signal pathway analysis (Pathway analysis) and co expression regulation network of selected valuable genes. Methods: using Radix Hedysari polysaccharide (400mg/kg) or saline injection of lipopolysaccharide in 24 hours before and 1 hours after intraperitoneal injection of the pretreatment of 5 Wistar rats, using lipopolysaccharide (200 g) induced uveitis in rats. Rats were observed the clinical manifestations of ocular inflammation after extraction of rat iris ciliary body tissue RNA and M gene expression of RNA and LNC using RNA gene chip technology to detect the expression of difference spectrum. Using gene function enrichment analysis (Gene, Ontology, GO) signal pathway analysis and co expression network the in-depth analysis of the regulatory role between genes differentially screened and selected target genes. Results: after Radix Hedysari pretreatment in rats after LPS stimulation received significant inhibition of ocular inflammation (P0.05). FC (ABS) 1.5 and P A value of 0.05 M RNA standard screened 254 differentially expressed genes and 68 LNC genes RNA.GO analysis showed significant differential gene function mainly in lipopolysaccharide response from bacteria, molecular reaction, chemokine, chemokine receptor binding, cell migration, lymph cell migration regulation, cytokine activity, lymphocyte chemotaxis and migration of white blood cells. While significant differences in gene signal pathway including interaction of cytokine cytokine, Toll like receptor signaling pathway and regulation of inflammatory chemokines and cytokines signal pathway, tumor necrosis factor (TNF) signaling pathway and rheumatoid arthritis. The co expression network analysis 16 m RNA and 7 LNC RNA gene expression in the core position of network. Conclusion: This study found that Radix Hedysari polysaccharide by multiple signal transduction pathways associated with inflammation and immune to play The anti-inflammatory effect of endotoxin induced uveitis. Through a series of screening process has multiple alternative anti-inflammatory target genes, including through upregulation of -1 and downregulation of leucine rich repeat protein gene colony-stimulating factor 1 and LNC by RNA regulation of NF- K B anti-inflammatory effect can greatly and research value.

【學(xué)位授予單位】：首都醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R773.9

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 金智生,汝亞琴,李應(yīng)東,楚惠媛,吳立文,馬駿,晁梁;紅芪多糖對不同病程糖尿病大鼠血脂的影響[J];中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志;2004年05期

2 劉凱;鐘栩;李應(yīng)東;;紅芪多糖促進(jìn)雞胚絨毛尿囊膜血管生成的實(shí)驗(yàn)研究[J];中醫(yī)研究;2008年12期

3 胡燕;程衛(wèi)東;劉欣;王學(xué)習(xí);楊建軍;;紅芪多糖超聲法提取工藝的正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2011年08期

4 李茂言 ,何利城 ,黃正良;紅芪多糖對某些生化指標(biāo)的影響[J];甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1990年02期

5 周強(qiáng);金智生;張東鵬;李娟娥;;紅芪多糖對高脂飼養(yǎng)2型糖尿病胰島素抵抗大鼠的影響[J];中醫(yī)兒科雜志;2006年02期

6 鄭海生;金智生;劉凱;王榮;吳立文;;紅芪多糖對2型糖尿病胰島素抵抗大鼠胰島素敏感性影響的研究[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2010年07期

7 張軍平;郭利平;陳曉玉;范英昌;張志堯;;紅芪多糖對培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;1998年S1期

8 董玉梅;王小虎;;紅芪多糖抗腫瘤作用的研究進(jìn)展[J];腫瘤預(yù)防與治療;2012年03期

9 趙良功;李曉東;趙建輝;胡芳弟;封士蘭;劉建昌;;4種紅芪多糖對實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠血糖的影響[J];中藥材;2009年10期

10 惠和平;封士蘭;胡芳弟;崔方;吳玉瓊;;紅芪多糖的體外抗氧化活性研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年08期

相關(guān)會議論文 前10條

1 惠和平;封士蘭;趙良功;崔方;胡芳弟;吳玉瓊;;紅芪多糖的化學(xué)及其體外抗氧化活性的研究[A];甘肅省化學(xué)會二十六屆年會暨第八屆中學(xué)化學(xué)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)交流會論文集[C];2009年

2 牛瑞蘭;劉靜;;紅芪多糖對高糖、糖基化誘導(dǎo)下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分泌血管活性物質(zhì)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會第十六次全國學(xué)術(shù)會議論文集[C];2012年

3 劉華;閆立萍;王小軍;;紅芪多糖對肺癌A549細(xì)胞體外化療增效作用的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

4 封士蘭;馬丹;劉小花;李冰;李曉東;胡芳弟;;紅芪多糖的提取分離純化及組成分析[A];甘肅省化學(xué)會第二十五屆年會、第七屆甘肅省中學(xué)化學(xué)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)交流會論文集[C];2007年

5 封士蘭;胡芳弟;馬丹;劉小花;李冰;李曉東;;紅芪多糖的提取分離純化及組成分析[A];西北地區(qū)第五屆色譜學(xué)術(shù)報告會暨甘肅省第十屆色譜年會論文集[C];2008年

6 劉靜;靳立英;牛瑞蘭;;紅芪多糖對晚期糖基化終末產(chǎn)物誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

7 李世剛;張永琦;;紅芪多糖誘導(dǎo)人肝癌HEP-G2細(xì)胞凋亡作用機(jī)制的研究[A];中國藥學(xué)會全國多糖類藥物研究與應(yīng)用研討會論文集[C];2008年

8 周敏;戎霞君;黃紹光;萬歡英;李彪;李敏;;TOLL樣受體4在慢性阻塞性肺疾病氣道炎癥中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國呼吸病學(xué)術(shù)會議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

9 張錚;曹豐;張榮慶;王海昌;;抑制Toll樣受體4活化對缺氧復(fù)氧導(dǎo)致心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

10 祝清芬;魏欣冰;王立祥;曾季平;陳琳;張岫美;;Toll樣受體4在腦缺血-再灌注損傷中表達(dá)變化及其與血管緊張肽系統(tǒng)的關(guān)系[A];中國藥理學(xué)會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 時仲省;專家提醒：激素治療葡萄膜炎不能過量[N];中國醫(yī)藥報;2012年

2 鄭州大學(xué)第四附屬醫(yī)院眼一科教授 侯習(xí)武 整理 時仲省;治葡萄膜炎激素別超量[N];健康報;2013年

3 本報記者 魏鑫;別怕 激素葡萄膜炎能治愈[N];保健時報;2005年

4 記者 涂端玉 通訊員 陳景榮　;葡萄膜炎，，莫等閑視之[N];廣州日報;2005年

5 方彤;全程觀察治療葡萄膜炎[N];健康報;2005年

6 陳剛 侯習(xí)武 時仲省 馮光耀;悄悄致盲的葡萄膜炎[N];健康報;2005年

7 印高樂;眼葡萄膜炎治療有新法[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2002年

8 張荔子;揭秘葡萄膜炎[N];健康報;2006年

9 張鴻茜;悄悄致盲的葡萄膜炎[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

10 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科教授 楊培增　本報記者 魏平 整理;葡萄膜炎：診斷細(xì)化流程 治療激素當(dāng)先[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 余爍;白細(xì)胞介素1受體相關(guān)激酶（IRAK）家族在基于Toll樣受體4信號通路介導(dǎo)的急性前葡萄膜炎發(fā)病中所起作用及紅芪多糖干預(yù)機(jī)制的研究[D];首都醫(yī)科大學(xué);2017年

2 衛(wèi)東鋒;紅芪多糖調(diào)節(jié)免疫及抗腫瘤作用的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];蘭州大學(xué);2012年

3 孫蔚明;紅芪多糖對大鼠非酒精性脂肪肝的療效及機(jī)制研究[D];蘭州大學(xué);2014年

4 許育新;Toll樣受體4與2型糖尿病視網(wǎng)膜病變遺傳易感性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

5 王昭軍;Toll樣受體4信號通路對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和凋亡調(diào)控作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

6 吳潔;TOLL樣受體4/核轉(zhuǎn)錄因子-κB信號通路在脂多糖誘導(dǎo)奶牛乳腺炎癥反應(yīng)中的作用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

7 高宏凱;人胰腺組織Toll樣受體4的表達(dá)分布及其基因多態(tài)性與急性胰腺炎相關(guān)性的研究[D];四川大學(xué);2005年

8 李懿;脂多糖激活大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞上Toll樣受體4介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和辛伐他汀的干預(yù)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

9 李紅光;硫酸乙酰肝素-Toll樣受體內(nèi)源性配體與急性胰腺炎[D];四川大學(xué);2006年

10 楊波;梅毒葡萄膜炎臨床特征及預(yù)后相關(guān)因素分析[D];吉林大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李菲;紅芪多糖對老年癡呆細(xì)胞模型蛋白表達(dá)譜影響的研究[D];蘭州大學(xué);2015年

2 寇寧;紅芪多糖的提取方法及對D-半乳糖致衰老小鼠抗衰老作用的研究[D];蘭州大學(xué);2015年

3 邵宏奎;紅芪多糖對牙周膜細(xì)胞增殖及分泌IL-1β、IL-6的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

4 黨子龍;紅芪多糖HPS4的提取分離及HPS4中四個組分結(jié)構(gòu)特征和活性研究[D];蘭州大學(xué);2013年

5 楊杰;紅芪多糖對腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷保護(hù)作用的差異蛋白質(zhì)研究[D];蘭州大學(xué);2016年

6 劉新麗;紅芪多糖對內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠葡萄膜炎TRAF6及TRIF表達(dá)的影響[D];首都醫(yī)科大學(xué);2017年

7 馬丹;紅芪多糖的提取分離純化及組成分析[D];蘭州大學(xué);2008年

8 崔方;貞芪扶正制劑及紅芪多糖質(zhì)量控制方法研究[D];蘭州大學(xué);2010年

9 鄧文娟;紅芪多糖對高糖條件下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞功能和凋亡的影響[D];蘭州大學(xué);2011年

10 張曉敏;紅芪多糖單用或聯(lián)合厄貝沙坦對糖尿病大鼠心肌纖維化和心臟功能的影響[D];蘭州大學(xué);2012年

本文編號：1682634