本文選題：肝功能　切入點：釓塞酸二鈉　出處：《廣西醫(yī)科大學》2017年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：第一部分動物實驗第一節(jié)Gd-EOB-DTPA增強MRI T1 mapping評價兔肝纖維化模型肝功能的實驗研究目的:研究Gd-EOB-DTPA增強MRI T1mapping評價兔肝纖維化模型肝功能的價值。方法:廣西醫(yī)科大學實驗中心提供的家兔80只,雌雄不限,體重2-3kg,年齡4-6個月。家兔飼養(yǎng)在層疊式不銹鋼絲籠中。實驗組兔腹腔注射40%的CCl4橄欖油溶液(國藥集團化學試劑有限公司),劑量0.1ml/kg,前四周每周注射一次,四周以后每周注射兩次。99%的分析乙醇(重慶川東化工有限公司)稀釋成5%酒精溶液作為唯一飲水;對照組兔腹腔注射生理鹽水,每周一次,劑量0.1ml/kg,飲用純凈水。分別于建模第6、8、10、12、14周取動物麻醉后行吲哚菁綠滯留實驗,24小時后行MRI掃描及圖像后處理。掃描結(jié)束后,經(jīng)兔耳緣靜脈注入空氣將其處死,剖腹觀察肝臟情況,并取大小約1.5mm3肝臟組織,送病理學檢查,取材部位盡量與圖像后處理時選取的感興趣區(qū)域(region of interest,ROI)一致。動物麻醉首先給予肌肉注射10mg地西泮+0.5mg阿托品,麻醉后的動物在耳緣靜脈穿刺前半小時給予戊巴比妥鈉(重慶博藝化學試劑廠)麻醉,戊巴比妥鈉粉劑溶于0.9%生理鹽水,配成3%的戊巴比妥鈉溶液,20mg/kg腹腔注射,實驗中動物如果有清醒的跡象,重復注射20mg/kg的戊巴比妥鈉。吲哚菁綠滯留實驗采用DDG 300K肝功能分析儀(日本廣電工業(yè)株式協(xié)會),取適量的注射用吲哚菁綠(丹東醫(yī)創(chuàng)藥業(yè)有限責任公司,25mg/支)溶于無菌鹽水,配成2.5mg/ml的吲哚菁綠溶液,配置好的溶液僅限當時使用,麻醉好的動物側(cè)臥,小腿剃毛后,將感光探頭夾在皮膚薄且肌肉較豐富處,21G靜脈留置針家兔耳緣穿刺置管成功后,經(jīng)靜脈管注射稀釋好的吲哚菁綠溶液,總量0.5mg/kg,3秒鐘內(nèi)注射完成,DDG數(shù)據(jù)分析軟件自動處理和分析數(shù)據(jù)并給出報告,計算吲哚菁綠15min的滯留率ICG R15。MR掃描采用Siemens Verio 3.0T MRI成像系統(tǒng),16通道相控陣線圈,耳緣靜脈注射肝膽特異性對比劑Gd-EOB-DTPA增強,濃度為0.25mol/l,總量0.025mmol/kg(0.1ml/kg),速率0.2ml/s,注射完成后以相同速率注射相同量生理鹽水沖管。分別在增強前、增強后5min、10min和20min行T1 Mapping序列掃描,重復時間(repetition time,TR)4.8ms,回波時間(echo time,TE)1.4ms,掃描野(field of view,FOV)101X140mm,掃描矩陣59X128mm,層厚2mm,并行采集因子p=2,用T1-vibe抑脂序列兩個不同反轉(zhuǎn)角(5°和15°)掃描得到T1 mapping圖像。掃描所得的圖像傳到西門子Syngo工作站測量肝臟T1弛豫時間,在T1 mapping圖像上選取面積為0.5cm2的感興趣區(qū)(region of interest,ROI),分別選取3個ROI測量,取平均值作為該肝段的T1弛豫時間值,根據(jù)測量結(jié)果計算T1弛豫時間減少率={(增強前T1弛豫時間—增強后T1弛豫時間)/增強前T1弛豫時間}X100%。病理學檢查將取材標本置入100%的甲醛(重慶博藝化學試劑廠)和生理鹽水稀釋成10%甲醛溶液中固定24h,常規(guī)蘇木素—伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色和Masson染色,觀察肝小葉細胞變化和纖維化進展情況。并參照Yang等[46]報道的肝纖維化分期標準進行分期。S0期:無成纖維細胞增生,膠原纖維含量正常,無纖維化。S1期:有少量成纖維細胞增生,膠原纖維輕度增生,匯管區(qū)纖維化擴大,局限于竇周和小葉內(nèi)纖維化。S2期:匯管區(qū)內(nèi)成纖維細胞增生,膠原纖維呈較短的條狀向小葉內(nèi)延伸,匯管區(qū)周圍纖維化,纖維間隔形成,小葉結(jié)構(gòu)保留。S3期:匯管區(qū)內(nèi)成纖維細胞大量增生,膠原纖維明顯向小葉內(nèi)延伸,形成纖維隔,纖維間隔伴小葉結(jié)構(gòu)紊亂,無肝硬化。S4期:早期肝硬化。采用統(tǒng)計學軟件SPSS 20.0進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計學分析,所有測量資料都用均數(shù)±標準差(X±S)表示。肝臟各段T1弛豫時間和T1弛豫時間減少率的差異采用單因素方差分析LSD法比較組間差異,p0.05差異有統(tǒng)計學意義。HBP肝臟T1弛豫時間和吲哚菁綠滯留率R15(自變量)的關(guān)系采用一元線性回歸分析,p0.05差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:動物成模數(shù)量:共34只動物成模并完成了全部實驗,其中對照組5只,實驗組29只,實驗組按照肝臟纖維化程度不同,S1共7只,S2共7只,S3共8只,S4共7只。實驗動物共80只,動物死亡情況分為:造模前飼養(yǎng)一周自然死亡4/80只(死亡率5%),造模中死亡29/76只(死亡率38.2%),預實驗使用了8只動物,正式實驗死亡5/39只(死亡率12.8%)。肝臟T1弛豫時間在增強后明顯減少,隨著時間延長,又逐漸有所升高(圖2)。肝臟T1弛豫時間和弛豫時間減少率改變:各組動物肝臟T1弛豫時間在增強前差異無統(tǒng)計學意義(p0.05),增強后2.5min、5min、10min、20min差異有統(tǒng)計學意義,各組兩兩比較,從2.5min開始,差異有意義的組數(shù)逐漸增多,20min時除了S1和S2組差異無統(tǒng)計學意義(p0.05),其他組之間差異均有統(tǒng)計學意義(p0.05)。增強后T1弛豫時間減少率在20min時除了S1和S2組差異無統(tǒng)計學意義(p0.05),其他組之間差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。增強后20min肝臟T1弛豫時間和吲哚菁綠滯留率ICG R15的相關(guān)性:T1弛豫時間和ICG R15兩者顯著正相關(guān),Pearson相關(guān)系數(shù)0.608(p=0.001,t=3.309)。殘差柱狀分布圖符合正態(tài)分布。增強后20min肝臟T1弛豫時間減少率和ICG R15的相關(guān)性:肝臟T1弛豫時間減少率和ICG R15兩者顯著負相關(guān),Pearson相關(guān)系數(shù)0.739(p=0.000,t=-5.592)。殘差柱狀分布圖基本符合正態(tài)分布。結(jié)論:1、不同肝纖維化組家兔肝臟的Gd-EOB-DTPA增強曲線表現(xiàn)不同。2、Gd-EOB-DTPA增強后20分鐘肝臟T1弛豫時間(和T1弛豫時間減少率)與吲哚菁綠15分鐘滯留率具有相關(guān)性。3、Gd-EOB-DTPA增強后延遲20分鐘T1 mapping能有效評價家兔肝纖維化模型的肝臟功能。第二節(jié)Gd-EOB-DTPA增強MRI延遲10分鐘和20分鐘T1mapping評價兔肝纖維化模型肝功能的價值目的:對比研究肝特異性對比劑Gd-EOB-DTPA增強T1 mapping延遲10分鐘和20分鐘T1弛豫時間評價肝臟功能的價值。方法:同“動物實驗第一節(jié)”結(jié)果:共34只動物成模并完成了全部實驗,其中對照組(S0期)共5只,實驗組29只,實驗組按照肝臟纖維化程度不同,S1期共7只,S2期共7只,S3期共8只,S4期共7只(表1)。根據(jù)病理結(jié)果將實驗組分成兩組:輕度纖維化組(S1和S2)14例和重度纖維化組(S3和S4)(15例)。實驗動物共80只,動物死亡情況分為:造模前飼養(yǎng)一周自然死亡4/80只(死亡率5%),造模中死亡29/76只(死亡率38.2%),預實驗使用了8只動物,正式實驗死亡5/39只(死亡率12.8%)。肝臟T1弛豫時間在Gd-EOB-DTPA增強后10min以及20min各組均有減少,正常組和輕度纖維化組可見明顯減少,而重度纖維化組減少不明顯。增強前各組肝臟T1弛豫時間差異無統(tǒng)計學意義(p0.05),增強后10min、20min T1弛豫時間(和T1弛豫時間減少率)各組差異均有統(tǒng)計學意義(p0.05)。增強后各組T1弛豫時間(以及T1弛豫時間減少率)在10min和20min這兩個時間點之間的差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。統(tǒng)計學一元線性回歸分析結(jié)果顯示:增強后10min、20min肝臟T1弛豫時間均和吲哚菁綠15min滯留實驗ICG R15顯著正相關(guān),增強后10min的Pearson相關(guān)系數(shù)為R=0.493,修正后的R2=0.214(p=0.008,t=2.887),增強后20min的Pearson相關(guān)系數(shù)為0.608,修正后的R2=0.345(p=0.001,t=3.309)。增強后10min、20min肝臟T1弛豫時間減少率和ICG R15顯著負相關(guān),增強后10min的Pearson相關(guān)系數(shù)0.636,修正后的R2=0.381(p=0.000,t=-4.200)(圖6a);增強后20min的Pearson相關(guān)系數(shù)0.739,修正后的R2=0.529(p=0.000,t=-5.592)。結(jié)論:對比Gd-EOB-DTPA增強后延遲10分鐘和20分鐘T1 mapping評價家兔肝纖維化模型的肝臟功能結(jié)果顯示,延遲10分鐘也能作為肝臟功能診斷的指標,達到定性和定量診斷的目的。第二部分臨床研究 第一節(jié)Gd-EOB-DTPA增強MRI T1mapping在肝臟各段肝功能評價中的價值研究目的:研究肝特異性對比劑Gd-EOB-DTPA增強MRI T1 mapping對肝臟各段肝功能的診斷價值。方法:本研究為前瞻性研究,連續(xù)收集2015年3月至2016年12月廣西醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院和桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院做了Gd-EOB-DTPA增強的患者,本研究經(jīng)過單位倫理委員會批準,所有患者均在增強掃描前簽署知情同意書。入組標準:(1)需要進行上腹部MRI增強掃描的成年患者;(2)MRI掃描前4周沒有接受過射頻治療、化療或者腫瘤栓塞治療;(3)MRI掃描前、后一周內(nèi)有體檢以及臨床生化檢查能進行Child-Pugh分級;(4)沒有膽道疾病導致的彌漫性肝臟病變,如原發(fā)性硬化性膽管炎,原發(fā)性膽汁性肝硬化等;(5)如果肝臟有局灶性病變,病變范圍小于一個肝段;(6)沒有MRI掃描和增強的禁忌癥(例如:肝腎功能異常、植入不兼容設(shè)備如心臟起搏器等、幽閉恐懼癥、孕婦及哺乳期女性)。共收集到符合要求的病例103例,其中男72例,女31例,年齡18~84歲(平均50.7±14.0歲)根據(jù)臨床資料行Child-Pugh分級將患者分為四組:肝功能正常組(normal liver function,NLF)38例,其他有慢性肝炎或者肝功能異常的分為Child-Pugh A(liver cirrhosis with Child-Pugh A,LCA)組33例,Child-Pugh B(liver cirrhosis with Child-Pugh B,LCB)組21例,Child-Pugh C(liver cirrhosis with Child-Pugh B,LCB)組11例。Child-Pugh分級標準(表1):Child-Pugh A:5-6分;Child-Pugh B:7-9分;Child-Pugh C:10-15分MRI掃描:檢查時運用腹帶以減少呼吸干擾。掃描范圍從膈頂至雙腎下極,包及整個肝臟。MR掃描采用Siemens Verio 3.0T MRI成像系統(tǒng),16通道相控陣線圈,肘前靜脈注射肝膽特異性對比劑Gd-EOB-DTPA增強,濃度為0.25mol/l,總量0.025mmol/kg(0.1ml/kg),速率2ml/s,注射完成后以相同速率注射20ml生理鹽水沖管。分別在增強前、增強后5min、10min和20min行T1 Mapping序列掃描,重復時間(repetition time,TR)4.8ms,回波時間(echo time,TE)1.4ms,掃描野(field of view,FOV)273X380mm,掃描矩陣161X320mm,層厚3mm,并行采集因子p=2,用T1-vibe抑脂序列兩個不同反轉(zhuǎn)角(5°和15°)掃描得到T1 mapping圖像,圖像傳到西門子Syngo工作站測量肝臟T1弛豫時間,并計算T1弛豫時間減少率={(增強前T1弛豫時間-增強后T1弛豫時間)/增強前T1弛豫時間}X100%。掃描完成后所有圖像傳到西門子Syngo工作站,分別測量肝臟各段的T1弛豫時間,在T1 mapping圖像上選取面積為2.5cm2的感興趣區(qū)(region of interest,ROI),肝臟S1段選取一個ROI測量,其他肝段從肝臟邊緣到肝門區(qū)分別選取3個ROI測量,取平均值作為該肝段的T1弛豫時間值。采用統(tǒng)計學軟件SPSS 20.0進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計學分析,所有測量資料都用均數(shù)±標準差(X±S)表示。肝臟各段T1弛豫時間的差異采用單因素方差分析LSD法比較組間差異,p0.05差異有統(tǒng)計學意義;LCB組和LCC組最佳診斷值的選取以及診斷價值分析采用受試者特征曲線(receiver operatingcharacteristic,ROC)分析,95%的可信區(qū)間,p0.05差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:各組患者在Gd-EOB-DTPA增強前后各肝段T1弛豫時間曲線:NLF組和LCA組從增強后5min開始一直到增強后20min,各肝段T1弛豫時間逐漸降低,到20min時各肝段之間的T1弛豫時間差異較小。LCB組增強后各肝段的T1弛豫時間在5min到20min差異不大,增強后20min各肝段T1弛豫時間差異較NLF組和LCA組增大。LCC組增強后各肝段的T1弛豫時間在5min最低,10min和20min又逐漸升高,且各肝段之間的差異在各組中最大。各組患者在Gd-EOB-DTPA增強前后各肝段的T1弛豫時間差異,平掃時各組T1弛豫時間差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。增強后5min開始有部分肝段T1弛豫時間差異有統(tǒng)計學意義,到10min以后各段差異都有統(tǒng)計學意義(p0.05)。兩兩比較發(fā)現(xiàn),增強后10min LCC組各段和其他組差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),LCB組部分肝段差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);增強后20min,LCC組全部肝段和其他組的差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),LCB組和NLF組以及LCA組差異有統(tǒng)計學意義的肝段增多,但仍有部分肝段差異無統(tǒng)計學意義。ROC曲線分析結(jié)果顯示:T1弛豫時間對LCB組的診斷價值,其中S6段的最高(AUC=0.904),S2段最低(AUC=0.654),采用T1弛豫時間來診斷的敏感性普遍高于特異性,其中S6和S8段的敏感性都達到了100%,特異性最高的是S5段,為83.6%。T1弛豫時間減少率對LCB組的診斷價值,其中S7段最高(AUC=0.904),S2段診斷最低(AUC=0.709),采用T1弛豫時間減少率來診斷的特異性普遍高于敏感性,其中S1和S6段的敏感性都達到了100%,特異性最高的是S7段,為98.6%。T1弛豫時間對LCC組的診斷價值,所有肝段的AUC都大于0.842。T1弛豫時間減少率對LCC組的診斷價值,所有肝段的AUC都大于0.887。結(jié)論:1、肝臟各段的T1弛豫時間在Gd-DOB-DTPA增強前后均有差異。2、對于LCB患者來說,T1弛豫時間在肝臟各段的診斷價值差異較大,S6和S7段的診斷價值最高,S2段最低。T1弛豫時間減少率的診斷價值總體較T1弛豫時間要高。3、對于LCC患者,T1弛豫時間和弛豫時間減少率都有很高的診斷價值,考慮到臨床診斷的便利性,T1弛豫時間測量更適合臨床應(yīng)用。第二節(jié)對比研究Gd-EOB-DTPA增強MRI延遲10分鐘和20分鐘T1 mapping臨床評價肝功能的價值目的:對比研究Gd-EOB-DTPA增強MRI T1 mapping掃描延遲10分鐘和20分鐘肝膽期評價肝功能的價值。方法:同“臨床研究第一節(jié)”統(tǒng)計學分析:所有數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計學軟件SPSS 20.0軟件包分析。測量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差表示。各組的T1弛豫時間和T1弛豫時間減少率之間的差異采用多組數(shù)據(jù)的方差分析。不同時間點的T1弛豫時間和T1弛豫時間減少率對肝功能評價的診斷價值采用受試者特征曲線(Receiver operating characteristic,ROC)分析,曲線下面積(Area under the curve,AUC)、敏感性和特異性都根據(jù)95%可信區(qū)間計算得出,最佳診斷值(cut-off)由約登指數(shù)(Youden-Index)計算得到:敏感性+特異性-1。結(jié)果:不同肝功能各組T1弛豫時間和T1弛豫時間減少率:在Gd-EOB-DTPA增強前肝臟T1弛豫時間隨著肝功能下降略有增加,增強后10min以及20min,實驗各組T1弛豫時間均有減少,其中NLF組和LCA組可見明顯減少,而LCB組和LCC組減少不明顯。增強后10min和20min T1弛豫時間(和T1弛豫時間減少率)在各組的統(tǒng)計學差異:增強前各組肝臟T1弛豫時間差異無統(tǒng)計學意義(p0.05),增強后10min、20min T1弛豫時間和T1弛豫時間減少率在NLF組和LCA組之間的差異無統(tǒng)計學意義(p0.05),其余各組之間的差異均有統(tǒng)計學意義(p0.05)。增強后各組T1弛豫時間以及T1弛豫時間減少率在10min和20min這兩個時間點之間的差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。增強后10min和20min T1 mapping對肝功能評價的診斷效能:ROC曲線分析分別計算增強后10min和20min T1弛豫時間以及T1弛豫時間減少率評價肝臟功能的曲線下面積、最佳診斷值、敏感性和特異性。增強后10min和20min T1弛豫時間和T1弛豫時間減少率都對LCB以及LCC組肝功能評價有較高的診斷效能,但是對區(qū)別NLF組和LCA組患者的診斷效能較低。結(jié)論:1、平掃T1弛豫時間無法有效評價肝臟功能。2、Gd-EOB-DTPA增強后延遲10min的T1 mapping圖像也能有效評價臨床肝臟功能,其診斷效能和延遲20min圖像差異無統(tǒng)計學意義。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R445.2;R575.2

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4 丁婷婷;土壤各形態(tài)鋅對DTPA-Zn的貢獻量及土壤供鋅能力的影響[D];西北農(nóng)林科技大學;2016年

5 譚桂珍;EDTA、DTPA硝基咪唑類衍生物的合成及其性能研究[D];廣東工業(yè)大學;2016年

6 崔美玲;Gd-EOB-DTPA增強MRI肝膽期延遲時間的研究[D];延邊大學;2016年

7 錢姿樺;Gd-EOB-DTPA增強磁共振對胰腺癌肝轉(zhuǎn)移診斷效果的初步研究[D];浙江大學;2016年

8 顧炳;基于淋巴轉(zhuǎn)移腫瘤影像診斷用葉酸—聚乙二醇—二乙三氨五醋酸衍生物的研究[D];復旦大學;2010年

9 孫鳴鏑;AB-DTPA浸提土壤多元素的適用性分析及其測定四種土壤污染元素環(huán)境質(zhì)量標準初探[D];東北林業(yè)大學;2014年

10 胡丹飛;新型促排劑WSC-DTPA納米粒對內(nèi)污染鈾促排和防護作用的研究[D];蘇州大學;2013年

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本文編號：1604222