本文選題：高血壓　切入點：丹參有效成份　出處：《河北醫(yī)科大學》2017年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：第一部分均勻設計與正交設計聯(lián)用篩選丹參有效成份抑制成纖維細胞增值的最佳配伍配比目的:丹參是我國用于治療心腦血管疾病的傳統(tǒng)中藥,包含4種主要水溶性成份:丹參素(DSS,S)、丹酚酸A(Sal-A,A)、丹酚酸B(Sal-B,B)和原兒茶醛(PAL,P),我們簡稱為(SABP)。大量的研究已經證實,每種成份都可通過不同的作用機理起到心血管保護作用。血管外膜成纖維細胞(adventitial fibroblast,AF)作為一個生物學處理中心從外向內(outside-in)調節(jié)血管的結構和功能,血管在應答應激和損傷的過程中,AF首先被快速激活,通過本身改編而顯示不同功能和結構的行為,被視為血管應答的始動因素。目前中藥有效成份配伍研究已經成為中藥創(chuàng)新研究的一種新模式。因此,我們設想運用均勻設計和正交設計聯(lián)合應用的方法,通過觀察其對AF增殖的作用,找出丹參4種主要水溶性成份的最佳配伍配比關系。方法:本實驗選用成年Sprague Dawley(SD)大鼠,培養(yǎng)其胸主動脈外膜成纖維細胞,運用MTT方法,觀察藥物對其增殖的抑制作用,應用酶標儀讀取結果并計算抑制率。篩選步驟如下:1、初步篩選注射用丹參(凍干)粉(salvia miltiorrhiza lyophilized powder,SMLP)及丹參的四種有效成份各自的有效應用劑量范圍。2、采用均勻設計和正交設計聯(lián)用的方法,進行成份劑量和配伍的篩選。3、把實驗得到的最優(yōu)組合再次排列組合進行驗證。結果:1藥物濃度初篩結果:每種藥物對AF的抑制率最顯著的有效濃度范圍是:Sal-A,Sal-B,DSS的有效濃度范圍都是(10-3 mol/L,10-4 mol/L,10-5 mol/L),PAL的有效濃度范圍是(10-2 mol/L,10-3 mol/L,10-4 mol/L),但是SMLP對血管外膜成纖維細胞無明顯的抑制作用,且各濃度之間沒有統(tǒng)計學差異;2均勻設計實驗結果:結合初篩藥物濃度實驗得到的結果,四個成份各選取有效劑量范圍內6個不同濃度,然后按照均勻設計表,即4因素6水平均勻表u6(64)安排實驗,結果顯示第3組是最有效的配伍組合,抑制作用最顯著,有統(tǒng)計學差異。即:s3(10-4mol/l),a6(10-6mol/l),b2(5×10-4mol/l),p4(5×10-4mol/l);3正交設計實驗結果:結合均勻設計實驗得到的結果,在最優(yōu)的處理中,根據各成份對應劑量相距較近的范圍內,再次選擇低、中、高3個不同劑量,對dss、sal-a、sal-b、pal四個成份的有效劑量低、中、高進行正交設計實驗研究,選擇l9(34)正交表,結果顯示第6組是抑制作用最顯著的配伍組合,具有統(tǒng)計學差異。即:s2(1.5×10-4mol/l),a3(7×10-6mol/l),b1(3×10-4mol/l),p2(5×10-4mol/l);4將丹參4種成份再次進行排列組合,進一步驗證最佳配伍配比。根據均勻設計和正交設計的結果,為各成份確定一個最適宜有效劑量,對dss、sal-a、sal-b、pal四個成份再次排列組合:s、a、b、p,sa、sb、sp、ab、ap、bp、sab、sap、sbp、abp、sabp共15個,再次考察各種配伍組合對af增殖的影響,結果顯示sabp組的抑制率最大,為最佳配伍配比組合。結論:本實驗運用均勻設計和正交設計聯(lián)合應用的實驗方法,篩選出丹參的四種主要水溶性成份(dss、sal-a、sal-b、pal),抑制血管外膜成纖維細胞增殖的最佳配伍配比關系和濃度,即s(1.5×10-4mol/l),a(7×10-6mol/l),b(3×10-4mol/l),p(5×10-4mol/l),比例為(150，

本文編號：1586762