本文關(guān)鍵詞： 子宮內(nèi)膜癌 LC3 清熱解毒方 自噬　出處：《北京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:通過回顧性研究分析子宮內(nèi)膜增生和子宮內(nèi)膜癌病例的中醫(yī)辨證分型,探討子宮內(nèi)膜增生及子宮內(nèi)膜癌的中醫(yī)證型證素分布規(guī)律。通過測定子宮內(nèi)膜病變病理組織中LC3的表達(dá)含量變化,探討"自噬"在子宮內(nèi)膜病變中的表達(dá)規(guī)律。通過實驗研究清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)醇提及水提物對人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC-1A細(xì)胞及Ishikawa細(xì)胞增殖和凋亡和自噬的影響。方法:1.回顧性分析120例子宮內(nèi)膜增生及子宮內(nèi)膜癌病例的中醫(yī)診斷資料,分析總結(jié)子宮內(nèi)膜增生及子宮內(nèi)膜癌的中醫(yī)證型、證素分布規(guī)律。2.用免疫組化的方法測定子宮內(nèi)膜增生和子宮內(nèi)膜癌病理組織中LC3的表達(dá)含量變化,探討"自噬"在子宮內(nèi)膜病變中的表達(dá)規(guī)律。3.根據(jù)LC3檢測結(jié)果,探討自噬與中醫(yī)證型和中醫(yī)證素的相關(guān)性。4.MTS法測定清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)正丁醇提物及水提物對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC-1A及Ishikawa體外增殖抑制的影響。5.流式細(xì)胞儀檢測清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)正丁醇提物及水提物對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC-1A及Ishikawa細(xì)胞凋亡及周期的影響。6.Transwell檢測清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)正丁醇提物及水提物對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株HEC-1A及Ishikawa細(xì)胞侵襲能力的影響。7.Western-blot檢測清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)正丁醇提物及水提物對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3表達(dá)的影響。8.Real Time PCR檢測清熱解毒方正丁醇提物及水提物干預(yù)后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞各組中LC3B基因表達(dá)量的變化。9.PhosflowTM檢測清熱解毒方正丁醇提物及水提物干預(yù)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞自噬相關(guān)通路MTOR、AKT的表達(dá)。10.免疫熒光染色觀察清熱解毒方正丁醇提物及水提物對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞自噬蛋白LC3的影響11.投射電鏡觀察清熱解毒方正丁醇提物及水提物對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞自噬的影響。結(jié)果:1.120例子宮內(nèi)膜增生及子宮內(nèi)膜癌病例的最常見的中醫(yī)證型有氣虛血瘀、腎虛血瘀和腎陰虛,子宮內(nèi)膜癌最常見的病性證素是血瘀、氣虛、熱(火)、陰虛、濕、濕熱。2.LC3在中醫(yī)診斷中的分布由高到低依次為經(jīng)斷復(fù)來、月經(jīng)過多、經(jīng)間期出血、ve瘕、崩漏和經(jīng)期延長。3.子宮內(nèi)膜癌組的LC3測定值高于子宮內(nèi)膜增生組,具有統(tǒng)計學(xué)意義。4.不同中醫(yī)證型LC3測定值不同,腎虛中測定值為最高。5.清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)正丁醇提物在不同濃度、不同時間里對2種內(nèi)膜癌細(xì)胞系的增殖有顯著抑制作用。其中,作用24小時、48小時,HEC-1A細(xì)胞1.25mg、0.625mg、0.3125mg組間細(xì)胞抑制率有顯著性差異(P0.01);Ishikawa 細(xì)胞 5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL、0.3125mg/mL、0.15625mg/mL組間細(xì)胞抑制率有顯著性差異(P0.01);作用24小時,HEC-1A 細(xì)胞、Ishikawa 細(xì)胞 10mg、5mg、0.625mg、0.078125mg 組間細(xì)胞抑制率有顯著性差異,(P0.01)。清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)正丁醇提物作用于HEC-1A細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞,與正常組比較,給藥組細(xì)胞凋亡率顯著增高,差異顯著。清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)正丁醇提物及水提物,能顯著阻滯HEC-1A及Ishikawa細(xì)胞周期,降低細(xì)胞侵襲力。6.清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)正丁醇提物及水提物,能夠抑制HEC-1A及Ishikawa細(xì)胞發(fā)生自噬,并通過AKT-MTOR通路抑制HEC-1A及Ishikawa細(xì)胞自噬從而達(dá)到抗腫瘤作用。結(jié)論:1.子宮內(nèi)膜增生及子宮內(nèi)膜癌病例的最常見的中醫(yī)證型有氣虛血瘀、腎虛血瘀和腎陰虛,子宮內(nèi)膜癌最常見的病性證素是血瘀、氣虛、熱(火)、陰虛、濕、濕熱。2.自噬與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展具有相關(guān)性。3.清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)正丁醇提物及水提物能夠抑制HEC-1A及Ishikawa細(xì)胞發(fā)生自噬,并通過AKT-MTOR通路抑制HEC-1A及Ishikawa細(xì)胞自噬從而達(dá)到抗腫瘤作用。4.以中醫(yī)辨證論治理論為基礎(chǔ),有效結(jié)合辨病論治和辨證論治,清熱解毒方(黃連15g、白花蛇舌草15g、半枝蓮15g、生黃芪20g等)對子宮內(nèi)膜癌各個證型及病程的治療均有指導(dǎo)意義。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of water extract on the proliferation and apoptosis of endometrial carcinoma cells ( HEC - 1A ) , and the effect of water extract on the proliferation and apoptosis of endometrial carcinoma cells ( HEC - 1A ) . There was a significant difference in the cell inhibition rate between the two groups ( P 0.01 ) . The inhibition rate of the cells was significantly higher than that in normal group ( P 0.01 ) . Conclusion : 1 . The most common TCM syndromes in endometrial hyperplasia and endometrial carcinoma are blood stasis , qi deficiency , heat ( fire ) , yin deficiency , dampness and damp heat .

【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R271.9

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本文編號：1490229