本文關鍵詞：神經干細胞移植治療腦出血的抗炎作用及其機制研究　出處：《吉林大學》2017年博士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： 腦出血 神經干細胞 巨噬細胞 共培養(yǎng) 抗炎 MAPK信號通路 血腦屏障

【摘要】：背景與目的:腦出血(Intracerebral hemorahge)是腦卒中的一個亞型,占全部腦卒中的10%-15%,具有很高的發(fā)病率、致殘率及致死率,對家庭及社會造成極大的影響及沉重的經濟負擔。腦出血后炎癥反應與腦水腫、血腦屏障破壞及病情惡化息息相關。大量動物實驗研究表明神經干細胞移植是腦出血的一種較有前景的治療方法,主要是在抗炎、抗凋亡、促進血管新生等方面發(fā)揮作用。然而,其抗炎的具體機制尚不清楚。本研究旨在從體內、體外實驗中共同明確神經干細胞治療腦出血的抗炎作用并在信號傳導水平上深入研究其抗炎機制。方法:1、采用膠原酶注射法構建大鼠腦出血模型,造模2小時后通過尾靜脈注射植入神經干細胞,觀察造模第3天神經干細胞移植對腦組織炎癥反應、MAPK信號通路、腦水腫、血腦屏障及行為功能等方面的影響。2、采用溶血產物處理巨噬細胞,構建體外腦出血炎癥模型,分別運用三種主要的MAPK通路抑制劑U0126、SP600125、SB203580,探討這ERK1/2、JNK和p38通路阻斷對巨噬細胞炎癥反應的影響;通過神經干細胞與巨噬細胞共同培養(yǎng),在體外探討神經干細胞在出血性疾病中的抗炎作用及其機制。結果:1、采用立體定位向SD大鼠左側紋狀體內注射0.4U膠原酶構建腦出血模型;腦出血大鼠第3天血腫周圍發(fā)生了嚴重的炎癥反應,如小膠質細胞/巨噬細胞的激活并伴隨有COX-2、IL-1?和TNF-α的表達上調,以及ERK1/2、p38和JNK這三種MAPKs信號通路的激活。神經干細胞移植后能減少血腫周圍小膠質細胞/巨噬細胞激活,降低COX-2、IL-1?和TNF-α的表達以及上述三種信號通路的激活,并能減輕腦水腫,保護血腦屏障,促進神經功能恢復。2、溶血產物作用于巨噬細胞后,巨噬細胞胞體增大,細胞表面諸多突起,且炎癥介質IL-1?,TNF-α和COX-2的表達均上調且呈動態(tài)改變,說明該模型可成功模擬腦出血后炎癥反應;溶血產物可迅速激活巨噬細胞內ERK1/2,p38和JNK這三種主要的MAPK信號傳導通路,且它們共同參與調控巨噬細胞內炎癥反應。神經干細胞與巨噬細胞共培養(yǎng)后能顯著抑制溶血產物誘導的巨噬細胞內ERK1/2、p38和JNK信號通路的激活及炎癥介質IL-1?,TNF-α和COX-2的表達。結論:本研究證明神經干細胞移植可減輕腦出血后炎癥反應,減輕腦水腫及血腦屏障破壞,促進神經功能恢復,并從體內及體外實驗同時說明其抗炎作用可能是通過抑制巨噬細胞內ERK1/2、p38和JNK通路激活來實現的。
[Abstract]:Background & objective: intracerebral hemorrhage (ICH) is a subtype of stroke, accounting for 10-15% of all stroke, with a high incidence. The disability rate and fatality rate have a great impact on the family and society and a heavy economic burden. Inflammation and brain edema after cerebral hemorrhage. A large number of animal experiments show that neural stem cell transplantation is a promising treatment for cerebral hemorrhage, mainly in anti-inflammatory, anti-apoptosis. However, the specific mechanism of its anti-inflammatory mechanism is not clear. This study aims at in vivo. In vitro experiments together to clarify the anti-inflammatory effect of neural stem cells in the treatment of intracerebral hemorrhage and to further study its anti-inflammatory mechanism at the level of signal transduction. Methods: 1. The rat model of intracerebral hemorrhage was established by collagenase injection. Neural stem cells were implanted through caudal vein 2 hours after modeling. On the 3rd day, the inflammatory response of brain tissue to MAPK signal pathway and brain edema were observed. Effects of blood-brain barrier and behavioral function. 2. Macrophages were treated with hemolytic products to construct inflammatory model of intracerebral hemorrhage in vitro. U0126, three main inhibitors of MAPK pathway, were used respectively. SP600125 / SB203580 was used to investigate the effects of ERK1 / 2, JNK and p38 pathway blockade on macrophage inflammatory response. The anti-inflammatory effect and mechanism of neural stem cells in hemorrhagic diseases were studied in vitro by co-culture of neural stem cells and macrophages. Results: 1. The model of intracerebral hemorrhage was established by injecting 0.4U collagenase into the left striatum of SD rats by stereotactic localization. Severe inflammatory reactions occurred around hematoma in rats with intracerebral hemorrhage on day 3, such as activation of microglia / macrophages accompanied by COX-2 / IL-1? The expression of TNF- 偽 and TNF- 偽 was up-regulated, as well as ERK1/2. Activation of three MAPKs signaling pathways p38 and JNK. Neural stem cell transplantation can reduce the activation of microglia / macrophage around hematoma and decrease the expression of COX-2 / IL-1. The expression of TNF- 偽 and the activation of the above three signaling pathways can reduce brain edema, protect blood-brain barrier, promote the recovery of nerve function. The hemolytic product acts on macrophages. Macrophage cell body enlarged, cell surface many protrusions, and inflammatory mediator IL-1? The expression of TNF- 偽 and COX-2 were up-regulated and showed dynamic changes, indicating that the model could successfully simulate the inflammatory response after intracerebral hemorrhage. Hemolytic products can rapidly activate three major MAPK signal transduction pathways, ERK1 / 2, p38 and JNK, in macrophages. Neural stem cells co-cultured with macrophages could significantly inhibit ERK1/2 induced by hemolytic products. Activation of p38 and JNK signaling Pathway and Interleukin-1? Conclusion: neural stem cell transplantation can attenuate inflammatory response after cerebral hemorrhage, reduce brain edema and damage of blood-brain barrier, and promote the recovery of nerve function. Both in vivo and in vitro experiments indicated that the anti-inflammatory effect was probably achieved by inhibiting the activation of ERK1 / 2 p38 and JNK pathway in macrophages.
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R743.34

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 ;利用神經干細胞修復老鼠的腦組織[J];北京工人;2000年04期

2 楊樹源,安沂華;再述神經干細胞的研究及其應用前景[J];中華神經外科雜志;2002年05期

3 黃鎮(zhèn),金國華,徐慧君;神經干細胞研究進展[J];解剖科學進展;2002年01期

4 朱曉峰;神經干細胞研究的幾個問題[J];黑龍江醫(yī)藥科學;2002年05期

5 張敬軍,夏作理,劉焯霖;神經干細胞的研究[J];泰山醫(yī)學院學報;2002年02期

6 季慶;神經干細胞的研究近況[J];醫(yī)學綜述;2002年05期

7 田玲;;蛋白可促使神經干細胞移動[J];國外醫(yī)學情報;2002年09期

8 張敬軍,劉焯霖;神經干細胞的研究[J];中國病理生理雜志;2003年04期

9 張國福,林建華;神經干細胞的研究進展[J];福建中醫(yī)藥;2003年03期

10 劉岳文,杜永紅,王可,徐正順;神經干細胞的研究進展[J];河南科技大學學報(醫(yī)學版);2003年02期

相關會議論文 前10條

1 王華;王文輝;林蕾;;神經干細胞的研究進展及前景展望[A];第六屆西部介入放射學術會議寧夏醫(yī)學會放射學分會第四屆年會介入放射學新技術繼續(xù)教育學習班論文匯編[C];2009年

2 戴毅;韓忠朝;;神經干細胞研究進展及臨床前景展望[A];中國解剖學會第八屆組織學與胚胎學專業(yè)青年研討會論文集[C];2004年

3 孫一睿;胡錦;王爾松;奚才華;姚海軍;;單層黏附培養(yǎng)技術在哺乳動物神經干細胞體外穩(wěn)定增殖和多向分化中的應用[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經外科醫(yī)師分會第四屆全國代表大會論文匯編[C];2009年

4 劉佳梅;;腦內皮細胞與神經干細胞共培養(yǎng)促進神經干細胞的遷移[A];中國解剖學會第十一屆全國組織學與胚胎學青年學術研討會論文匯編[C];2009年

5 魏勇;應大君;張偉;董世武;;幼齡家豬腦SVZ神經干細胞的分離與鑒定[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

6 司銀楚;朱培純;程龍;吳海霞;許紅;;去皮層血管對成年大鼠腦內神經干細胞的影響[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

7 李學坤;郭安臣;左萍萍;;胎鼠海馬神經干細胞的培養(yǎng)、鑒定及亞克隆[A];中國藥理學會第十屆全國神經學術會議暨浙江省藥理學會2002年年會論文摘要集[C];2002年

8 李力;萬琪;;小鼠神經干細胞培養(yǎng)及缺血神經元對其增殖、分化的影響[A];中華醫(yī)學會第七次全國神經病學學術會議論文匯編[C];2004年

9 李力;萬琪;劉永紅;張巍;;小鼠神經干細胞培養(yǎng)及缺血神經元對其增殖、分化的影響[A];科技、工程與經濟社會協(xié)調發(fā)展——中國科協(xié)第五屆青年學術年會論文集[C];2004年

10 徐群淵;;神經干細胞的分離、純化和永生化[A];中國組織工程、干細胞與神經再生學術會議論文集[C];2004年

相關重要報紙文章 前10條

1 胡德榮;“抑制蛋白”可控制神經干細胞提前分化[N];健康報;2007年

2 孫國根　白毅;靈長類腦內神經干細胞被發(fā)現[N];中國醫(yī)藥報;2011年

3 孫國根;阻礙卒中后神經干細胞再生的“元兇”被發(fā)現[N];中國醫(yī)藥報;2013年

4 ;我國科學家成功地在體外培養(yǎng)出神經干細胞[N];中國高新技術產業(yè)導報;2001年

5 沈麗 付鈺;神奇的神經干細胞[N];科技日報;2002年

6 時仲省 高思敏 劉春陽;河南醫(yī)大成功培養(yǎng)人胚神經干細胞[N];中國醫(yī)藥報;2001年

7 梓華;神經干細胞可治惡性腦癌[N];醫(yī)藥經濟報;2002年

8 許琦敏;腦損傷修復治療又有新希望[N];文匯報;2007年

9 北京市神經外科研究所 北京天壇醫(yī)院 王忠誠邋院士;神經修復的生力軍——神經干細胞[N];健康報;2008年

10 孫國根;神經干細胞并非“全能制造者”[N];中國醫(yī)藥報;2009年

相關博士學位論文 前10條

1 張帆;Miranda磷酸化調控果蠅神經干細胞不對稱分裂的機制[D];浙江大學;2014年

2 張坤;極化巨噬細胞與脊髓來源神經干細胞聯合移植對脊髓損傷治療作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

3 褚天慈;血管生成素2對胎鼠腦皮層神經干細胞誘導分化作用及其分子機制的研究[D];天津醫(yī)科大學;2015年

4 胡園園;AF1q在神經發(fā)育中的功能及調控機制研究[D];山東大學;2015年

5 張鳳云;神經干細胞中PFK-1對神經發(fā)生的負調控作用[D];南京醫(yī)科大學;2016年

6 孫婧;神經干細胞移植治療腦出血的抗炎作用及其機制研究[D];吉林大學;2017年

7 郭立云;獼猴胚胎源性神經干細胞誘導、腦內移植及其在青光眼玻璃體內的轉歸—探索性研究[D];昆明醫(yī)科大學;2013年

8 任永娟;材料調控神經干細胞的研究[D];清華大學;2009年

9 曹翠麗;大鼠神經干細胞的體外培養(yǎng)及向神經元的誘導分化[D];河北醫(yī)科大學;2005年

10 周虎田;骨髓源神經干細胞生物學特性的研究[D];第一軍醫(yī)大學;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 李武雄;MK-801在谷氨酸-Shh信號通路中的阻斷作用[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2014年

2 馮旭;NeuroD慢病毒載體構建及在大鼠神經干細胞的過表達[D];福建醫(yī)科大學;2015年

3 閆姍姍;人臍帶間充質干細胞重編程為神經干細胞的調控機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2015年

4 魏維;松果菊苷對神經干細胞體外增殖的影響[D];福建中醫(yī)藥大學;2015年

5 周強意;轉TrkC神經干細胞聯合膠原支架對創(chuàng)傷性腦損傷大鼠模型治療作用的實驗研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2015年

6 孫爽;孕酮對Aβ_(25-35)損傷的神經干細胞增殖和分化的影響及機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

7 劉磊;神經干細胞移植治療大鼠腦梗死的實驗研究[D];鄭州大學;2015年

8 張濤;降鈣素基因相關肽促進體外培養(yǎng)的神經干細胞向神經元分化[D];蘇州大學;2015年

9 楊明;谷氨酸/NMDA1、Shh介導的成體NSC增殖分化信號通路的研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2015年

10 甘小鳳;弓形蟲抑制Wnt/β-catenin通路干擾C17.2神經干細胞的分化[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

，

本文編號：1376611