本文關(guān)鍵詞：細(xì)胞自噬對內(nèi)皮祖細(xì)胞功能影響的機制研究　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：研究背景及目的目前研究認(rèn)為,血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷和功能異常是動脈粥樣硬化發(fā)生的始動環(huán)節(jié),受損內(nèi)皮細(xì)胞的修復(fù)對于動脈粥樣硬化病變的發(fā)生和發(fā)展至關(guān)重要。內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)作為血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,是受損內(nèi)皮修復(fù)的主要參與者。EPCs主要存儲于骨髓、脾臟等器官,在生理或病理因素刺激下,EPCs從骨髓、脾臟等動員,遷移到外周血并歸巢至損傷血管附近,參與受損內(nèi)皮的修復(fù)。然而,傳統(tǒng)方式以EPCs移植為基礎(chǔ)的細(xì)胞治療,由于受循環(huán)中多種心血管危險因素的影響,移植后的EPCs生物學(xué)功能受到損害,增殖能力降低,生存能力減弱,局限了細(xì)胞治療向臨床的轉(zhuǎn)化。因此,尋求提高應(yīng)激條件下EPCs的生存能力,促進EPCs增殖,改善受損內(nèi)皮的修復(fù),對有效防治動脈粥樣硬化性心血管疾病具有重要意義。自噬(autophagy)是真核細(xì)胞特有的降解長壽命蛋白和受損細(xì)胞器的主要途徑,也是細(xì)胞適應(yīng)不利環(huán)境,維持穩(wěn)態(tài),促進生存的重要方式。細(xì)胞自噬受多種因素的影響,目前研究認(rèn)為細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)的失衡是影響自噬水平的重要因素;然而由于胞內(nèi)外鈣信號的復(fù)雜變化,鈣離子對細(xì)胞自噬調(diào)控的信號通路及自噬水平的變化趨勢尚存爭議。EPCs作為非興奮細(xì)胞,鈣庫操縱性鈣內(nèi)流(store operated calcium entry,SOCE)是其主要鈣內(nèi)流的方式,由鈣庫操縱性鈣通道(store operated calcium channels,SOCC)復(fù)合體介導(dǎo)。本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn),EPCs上不僅普遍表達(dá)SOCC復(fù)合體組成蛋白STIM1、TRPC1和ORAI1,并且與EPCs的眾多生物學(xué)功能密切相關(guān)。因此,這提示我們SOCC復(fù)合體介導(dǎo)的鈣內(nèi)流可能參與了EPCs自噬水平的調(diào)控,而通過對EPCs自噬水平的調(diào)節(jié)將有助于增強EPCs在應(yīng)激條件下的生存能力,提高移植后循環(huán)中EPCs的生存效率,進一步改善受損內(nèi)皮的修復(fù)�；谝陨显�,本研究利用動脈粥樣硬化模型小鼠及體外模擬動脈粥樣硬化危險因素-氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL),探討SOCE介導(dǎo)的細(xì)胞自噬在EPCs生物學(xué)功能中的作用及機制,尋求提高細(xì)胞自噬的臨床藥物,為提高EPCs移植效率提供理論基礎(chǔ)和依據(jù)。方法1.動脈粥樣硬化模型小鼠EPCs增殖、遷移能力及和自噬水平的變化1.1動脈粥樣硬化模型小鼠建立及EPCs的培養(yǎng)、鑒定Apo E-/-小鼠飼以高脂飲食(21%脂肪、0.15%膽固醇),分別于12周和16周收獲動脈粥樣硬化模型小鼠,取小鼠主動脈進行油紅O染色驗證動脈粥樣硬化模型。野生型小鼠采用Apo E-/-同源的C57BL/6小鼠作為對照。通過密度梯度離心方法分離獲得小鼠骨髓源性EPCs,培養(yǎng)在人纖連蛋白鋪板后的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。1.2流式細(xì)胞儀及熒光多標(biāo)方法鑒定EPCs。1.2.1分別用PE標(biāo)記抗小鼠CD133抗體、Per CP標(biāo)記抗小鼠的CD34抗體,APC標(biāo)記抗小鼠的VEGFR-2抗體避光孵育1小時,以同型抗體為對照,孵育后的細(xì)胞用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面VEGFR-2、CD34、CD133抗原的表達(dá);1.2.2采用FITC-UEA-I、Di I-ac LDL和DAPI分別對分離后的細(xì)胞染色后,采用激光共聚焦顯微鏡觀察,顯示綠色熒光的為UEA-I陽性細(xì)胞,紅色熒光的為Di I-ac LDL陽性細(xì)胞,藍(lán)色熒光則是細(xì)胞核,三染陽性細(xì)胞為正在分化的EPCs。1.3動脈粥樣硬化模型小鼠EPCs增殖和遷移功能的變化1.3.1采用顯微鏡下計數(shù)和CCK-8檢測分析EPCs增殖能力。1.3.2利用遷移小室實驗檢測EPCs遷移能力的變化。1.4動脈粥樣硬化模型小鼠EPCs的自噬水平的變化1.4.1分離培養(yǎng)7天后的EPCs,以Western Blot分析各組自噬標(biāo)志蛋白LC3II/LC3I、p62的表達(dá)變化。1.4.2向分離培養(yǎng)7天后的EPCs轉(zhuǎn)染GFP-m RFP-LC3腺病毒標(biāo)記LC3約4小時,激光共聚焦下觀察并計數(shù)各組自噬體與自噬溶酶體的數(shù)量,評價細(xì)胞自噬水平。2.ox-LDL對大鼠EPCs增殖、遷移能力,SOCE及細(xì)胞自噬水平的影響2.1流式細(xì)胞儀及熒光多標(biāo)方法鑒定。2.1.1分別用PE標(biāo)記抗大鼠CD133抗體、Per CP標(biāo)記抗大鼠的CD34抗體,APC標(biāo)記抗大鼠的VEGFR-2抗體避光孵育1小時,以同型抗體為對照,孵育后的細(xì)胞用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面VEGFR-2、CD34、CD133抗原的表達(dá);2.1.2采用FITC-UEA-I、Di I-ac LDL和DAPI分別對分離后的細(xì)胞染色后,采用激光共聚焦顯微鏡觀察,顯示綠色熒光的為UEA-I陽性細(xì)胞,紅色熒光的為Di I-ac LDL陽性細(xì)胞,藍(lán)色熒光則是細(xì)胞核,三染陽性細(xì)胞為正在分化的EPCs。2.2.1分離獲得正常大鼠EPCs,體外培養(yǎng)7天后,我們采用不同濃度ox-LDL培養(yǎng)6、12和24小時后,通過CCK-8檢測EPCs增殖能力。2.2.2 CCK-8檢測分析EPCs增殖能力。2.2.3遷移小室實驗檢測EPCs遷移能力的變化。2.3 ox-LDL對EPCs的SOCE的影響2.3.1分離獲得正常大鼠EPCs,暴露于含有0-100μg/ml ox-LDL培養(yǎng)基中12小時,再孵育鈣離子探針Fluo3-AM,并在激光共聚焦顯微鏡下觀察熒光強度,通過公式計算胞內(nèi)鈣濃度。[Ca2+]i(n M)= Kd ×(F-Fmin)/(Fmax-F)(Kd:室溫下解離常數(shù))2.3.2分離獲得正常大鼠EPCs,孵育鈣離子探針Fluo3-AM,并在激光共聚焦顯微鏡下觀察不同濃度ox-LDL瞬時刺激EPCs后,細(xì)胞內(nèi)鈣流的變化;5分鐘后再向無鈣的細(xì)胞外液中加入2 m M鈣離子,共聚焦顯微鏡下進一步動態(tài)觀察細(xì)胞內(nèi)鈣流變化。2.3.3 Western Blot檢測ox-LDL暴露后EPCs內(nèi)SOCC組成蛋白STIM1的表達(dá)變化。2.3.4分離獲得正常大鼠EPCs,利用慢病毒沉默STIM1后,暴露于60μg/ml ox-LDL培養(yǎng)基中12小時,再孵育鈣離子探針Fluo3-AM,并在激光共聚焦顯微鏡下觀察熒光強度,通過公式計算胞內(nèi)鈣濃度。2.3.5分離獲得正常大鼠EPCs,慢病毒轉(zhuǎn)染的方式穩(wěn)定沉默SOCC復(fù)合體關(guān)鍵蛋白STIM1,2天后再孵育鈣離子探針Fluo-3-AM,在激光共聚焦顯微鏡下,觀察60μg/ml ox-LDL瞬時刺激EPCs后,細(xì)胞內(nèi)鈣流的變化;5分鐘后再向無鈣的細(xì)胞外液中加入2 m M鈣離子,共聚焦顯微鏡下進一步動態(tài)觀察細(xì)胞內(nèi)鈣流的變化。2.3.6分離獲得正常大鼠EPCs,孵育鈣離子探針Fluo3-AM,在激光共聚焦顯微鏡下,動態(tài)觀察60μg/ml ox-LDL瞬時刺激EPCs后,細(xì)胞內(nèi)鈣流的變化;5分鐘后再向無鈣的細(xì)胞外液中加入2 m M鈣離子,30秒后再加入50μM SOCE特異性抑制劑2-APB,共聚焦顯微鏡下進一步動態(tài)觀察細(xì)胞內(nèi)鈣流的變化。2.4 ox-LDL對EPCs自噬水平影響2.4.1分離獲得正常大鼠EPCs,用不同濃度ox-LDL培養(yǎng)EPCs 6、12、18和24小時后,提取蛋白后分別行Western Blot檢測自噬標(biāo)志蛋白LC3II/LC3I和p62表達(dá)水平。2.4.2 60μg/ml ox-LDL培養(yǎng)EPCs 12小時后轉(zhuǎn)染GFP-m RFP-LC3腺病毒標(biāo)記LC3約4小時,激光共聚焦下觀察并計數(shù)各組自噬體與自噬溶酶體的數(shù)量,評價細(xì)胞自噬2.2 ox-LDL對EPCs增殖、遷移能力的影響水平。3.SOCE-CAMKK2-MTOR介導(dǎo)的細(xì)胞自噬與EPCs功能的關(guān)系3.1 ox-LDL激活SOCE-CAMKK2-MTOR信號通路促進EPCs自噬的發(fā)生3.1.1分離培養(yǎng)7天后的EPCs,分別用BAPTA-AM 20μM或EGTA 10 m M預(yù)處理20分鐘后,再暴露于60μg/ml ox-LDL 12小時,Western Blots檢測細(xì)胞內(nèi)LC3II/LC3I的表達(dá)。3.1.2分離培養(yǎng)7天后的EPCs,分別用細(xì)胞內(nèi)鈣離子螯合劑BAPTA-AM和細(xì)胞外鈣離子螯合劑EGTA處理20分鐘,再暴露于60μg/ml ox-LDL 12小時,然后再轉(zhuǎn)染GFP-m RFP-LC3腺病毒標(biāo)記LC3約4小時,激光共聚焦下觀察并計數(shù)各組自噬體與自噬溶酶體的數(shù)量,評價細(xì)胞自噬水平。3.1.3分離培養(yǎng)7天后的EPCs暴露于60μg/ml ox-LDL 12小時后,提取總蛋白Western Blot分別檢測p-CAMKK2、CAMKK2、p-AMPK、AMPK、p-MTOR、MTOR、p-P70S6K和P70S6K蛋白表達(dá)情況。3.1.4利用CAMKK2特異性抑制劑STO-609預(yù)處理后的EPCs,再將EPCs暴露于60μg/ml ox-LDL 12小時后,Western Blots檢測LC3II/LC3I、p-CAMKK2、CAMKK2、p-AMPK、AMPK、p-MTOR、MTOR、p-P70S6K和P70S6K的表達(dá)。3.1.5構(gòu)建STIM1沉默慢病毒,轉(zhuǎn)染培養(yǎng)5天的EPCs,抑制STIM1表達(dá),再將EPCs暴露于含有60μg/ml ox-LDL培養(yǎng)基中12小時,Western Blot檢測LC3II/LC3I、p-CAMKK2和CAMKK2的表達(dá)。3.2細(xì)胞自噬與EPCs功能的關(guān)系3.2.1分離培養(yǎng)后的EPCs接種于E-plates培養(yǎng)板上,24小時后轉(zhuǎn)染慢病毒沉默自噬關(guān)鍵蛋白ATG7,轉(zhuǎn)染48小時后再將EPCs暴露于含有60μg/ml ox-LDL的培養(yǎng)基中,細(xì)胞實時動態(tài)分析記錄儀(Real-time cellular analyzer,RTCA)動態(tài)記錄自噬抑制后EPCs增殖能力。3.2.2分離培養(yǎng)5天后的EPCs轉(zhuǎn)染慢病毒沉默自噬關(guān)鍵蛋白ATG7,48小時后暴露于含有60μg/ml ox-LDL培養(yǎng)基中,CCK-8分析細(xì)胞增殖能力。3.2.3分離培養(yǎng)5天后的EPCs轉(zhuǎn)染慢病毒沉默自噬關(guān)鍵蛋白ATG7,48小時后暴露于含有60μg/ml ox-LDL培養(yǎng)基中,Transwell分析細(xì)胞遷移能力。3.2.4分離培養(yǎng)后的EPCs接種于E-plates培養(yǎng)板上,利用自噬特異性抑制劑3-MA處理細(xì)胞后再暴露于含有60μg/ml ox-LDL培養(yǎng)基中,RTCA動態(tài)記錄自噬抑制后EPCs增殖能力。3.2.5使用自噬特異性抑制劑3-MA預(yù)處理培養(yǎng)7天后的EPCs,再暴露于含有60μg/ml ox-LDL培養(yǎng)基中12小時,CCK-8分析細(xì)胞增殖能力。3.2.6使用自噬特異性抑制劑3-MA預(yù)處理培養(yǎng)7天后的EPCs,再暴露于含有60μg/ml ox-LDL培養(yǎng)基中12小時,Transwell分析細(xì)胞遷移能力。4.匹伐他汀通過調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬影響EPCs功能4.1 PTV對EPCs增殖、遷移能力的影響4.1.1分離培養(yǎng)7天后的EPCs,在含有0.1μM PTV的培養(yǎng)基中培養(yǎng),采用CCK-8分析細(xì)胞增殖能力的變化。4.1.2分離培養(yǎng)7天后的EPCs,在含有0.1μM PTV的培養(yǎng)基中培養(yǎng),采用遷移小室實驗分析細(xì)胞遷移能力的變化。4.2 PTV對EPCs自噬水平的影響4.2.1在含有0.1μM PTV的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后,Western Blot檢測自噬關(guān)鍵蛋白LC3II/LC3I和p62表達(dá)差異。4.2.2在含有0.1μM PTV的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后的EPCs,使用GFP-m RFP-LC3腺病毒轉(zhuǎn)染標(biāo)記后,在激光共聚焦顯微鏡下觀察自噬體與自噬溶酶體的變化。4.3 PTV通過激活自噬改善EPCs增殖、遷移能力4.3.1利用自噬特異性抑制劑3-MA預(yù)處理后,再暴露于含有0.1μM PTV的培養(yǎng)基中,CCK-8分析細(xì)胞增殖能力的變化。4.3.2利用自噬特異性抑制劑3-MA預(yù)處理后,再暴露于含有0.1μM PTV的培養(yǎng)基中,遷移小室實驗觀察EPCs遷移能力的變化。4.3.3使用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式沉默自噬關(guān)鍵蛋白ATG7,48小時后再暴露于含有0.1μM PTV的培養(yǎng)基中,CCK-8分析細(xì)胞增殖能力的變化。4.3.4使用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式沉默自噬關(guān)鍵蛋白ATG7,48小時后再暴露于含有0.1μM PTV的培養(yǎng)基中,遷移小室實驗觀察EPCs遷移能力的變化。結(jié)果1.動脈粥樣硬化模型小鼠EPCs增殖、遷移能力及自噬水平的變化1.1動脈粥樣硬化模型小鼠建立及EPCs的培養(yǎng)、鑒定成功構(gòu)建動脈粥樣硬化小鼠模型,在小鼠主動脈處可見明顯的脂質(zhì)斑塊的形成。成功分離、培養(yǎng)及鑒定EPCs,分離第1日細(xì)胞可見呈圓形的貼壁狀態(tài),第三日可見細(xì)胞呈鋪路石樣改變,第五日可見細(xì)胞呈梭形、紡錘形改變,并呈線樣排列。流式細(xì)胞儀分析后顯示大部分細(xì)胞為VEGFR2、CD133、CD34陽性細(xì)胞。熒光染色后顯示大部分細(xì)胞同時表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記物(UEA)并具有結(jié)合LDL的能力。1.2動脈粥樣硬化模型小鼠EPCs增殖和遷移功能的變化利用CCK-8分析動脈粥樣硬化模型小鼠EPCs增殖活性,可見高脂飲食12周后EPCs增殖能力顯著降低,高脂飲食16周后EPCs增殖能力進一步降低。Transwell結(jié)果提示高脂飲食12周后EPCs遷移能力降低,高脂飲食16周后進一步降低。1.3動脈粥樣硬化模型小鼠EPCs的自噬水平的變化分離培養(yǎng)動脈粥樣硬化模型小鼠EPCs 7天后,檢測胞內(nèi)自噬關(guān)鍵蛋白表達(dá),可見隨著動脈粥樣硬化進展LC3II/LC3I表達(dá)比例降低,p62表達(dá)增加,激光共聚焦顯微鏡下自噬體和自噬溶酶體的數(shù)量減少。2.ox-LDL對EPCs增殖、遷移能力,SOCE及細(xì)胞自噬水平的影響2.1在觀察到動脈粥樣硬化模型小鼠EPCs生物學(xué)功能和自噬水平的改變后,我們采用動脈粥樣硬化危險因素ox-LDL體外模擬動脈粥樣硬化形成微環(huán)境。通過CCK-8分析我們發(fā)現(xiàn)ox-LDL呈劑量和時間依賴性降低EPCs增殖能力。在遷移小室實驗中,ox-LDL同樣顯著降低EPCs遷移能力。2.2在檢測到ox-LDL對EPCs增殖、遷移能力的影響之后,我們檢測EPCs內(nèi)鈣濃度,發(fā)現(xiàn)ox-LDL處理后,EPCs內(nèi)鈣濃度顯著增加,ox-LDL是否通過SOCE引起胞內(nèi)鈣濃度變化的,我們進一步在激光共聚焦下觀察到ox-LDL瞬時刺激EPCs后引起了胞內(nèi)鈣庫的釋放,5分鐘后再向無鈣的細(xì)胞外液中加入2 m M鈣離子,進一步引起了胞內(nèi)鈣濃度的增加,胞內(nèi)鈣的再次增加是通過SOCE介導(dǎo),并呈現(xiàn)劑量依賴性。我們根據(jù)公式計算得到細(xì)胞內(nèi)實際鈣離子濃度,我們證實ox-LDL激活SOCE引起EPCs內(nèi)鈣水平增加。此外,STIM1作為SOCC重要組成蛋白,STIM1是否參與ox-LDL誘導(dǎo)的SOCE,我們檢測ox-LDL處理后STIM1表達(dá),發(fā)現(xiàn)60和100μg/ml ox-LDL暴露12小時后顯著增強STIM1表達(dá)。2.3根據(jù)以上結(jié)果我們確定60μg/ml為后續(xù)實驗組ox-LDL濃度,我們采用慢病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的方式沉默SOCC復(fù)合體關(guān)鍵蛋白STIM1,隨后再用60μg/ml ox-LDL瞬時刺激EPCs,在共聚焦顯微鏡下可見在STIM1沉默組ox-LDL引起胞內(nèi)鈣庫釋放的鈣振幅顯著減弱,同時在細(xì)胞外液中補充2 m M濃度的鈣離子后,STIM1沉默組的SOCE振幅依然顯著低于對照組。我們在補充外液鈣離子前30秒用SOCE特異性抑制劑50μM 2-APB預(yù)處理細(xì)胞,結(jié)果顯示2-APB組能夠顯著抑制ox-LDL引起的SOCE,進一步證實ox-LDL激活SOCE。2.4隨后我們檢測ox-LDL對EPCs自噬水平的影響,發(fā)現(xiàn)ox-LDL呈劑量-時間依賴性顯著增加EPCs內(nèi)LC3II/LC3I比例,結(jié)果顯示ox-LDL增強EPCs自噬水平。結(jié)合自噬體和溶酶體特異性阻斷劑BAFA1和CQ,我們在激光共聚焦顯微鏡下發(fā)現(xiàn)ox-LDL促進EPCs自噬流。3.SOCE-CAMKK2-MTOR介導(dǎo)的細(xì)胞自噬與EPCs功能的關(guān)系3.1細(xì)胞內(nèi)鈣離子螯合劑(BAPTA-AM)和細(xì)胞外鈣離子螯合劑(EGTA)預(yù)處理后顯著逆轉(zhuǎn)ox-LDL引起的LC3II/LC3I增加(p0.01),同時共聚焦顯微鏡下也顯示細(xì)胞內(nèi)外鈣離子螯合劑預(yù)處理后,減少了ox-LDL引起的自噬體和自噬溶酶體的增加(p0.01)。3.2隨后我們探究ox-LDL是如何激活EPCs自噬的,發(fā)現(xiàn)60μg/ml ox-LDL處理EPCs 12小時后,增加了CAMKK2(p0.01)和AMPK(p0.01)磷酸化水平,降低了MTOR(p0.01)和P70S6K(p0.01)的磷酸化水平。采用CAMKK2特異性抑制劑預(yù)處理后,在顯著降低ox-LDL引起的LC3II/LC3I(p0.01)比例的同時,逆轉(zhuǎn)了ox-LDL對AMPK(p0.01)磷酸化,增加了MTOR(p0.01)和P70S6K(p0.01)的磷酸化。此外,通過慢病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染沉默STIM1后,ox-LDL上調(diào)的LC3II/LC3I和CAMKK2磷酸化被逆轉(zhuǎn)。以上結(jié)果證實,ox-LDL通過SOCE-CAMKK2-MTOR通路激活EPCs自噬。3.3為進一步探究自噬與EPCs功能的關(guān)系,我們發(fā)現(xiàn)沉默EPCs自噬后,RTCA和CCK-8結(jié)果顯示ox-LDL進一步抑制EPCs增殖能力(p0.01);此外,采用自噬抑制劑3-MA預(yù)處理后再暴露于ox-LDL,EPCs增殖能力也進一步抑制(p0.01)。該結(jié)果證實ox-LDL激活的自噬保護應(yīng)激環(huán)境下EPCs增殖能力。4.匹伐他汀通過調(diào)節(jié)自噬影響EPCs功能我們在尋求提高EPCs功能的藥物中發(fā)現(xiàn),匹伐他汀(Pitavastatin,PTV)顯著提高EPCs增殖和遷移能力的同時上調(diào)了自噬關(guān)鍵蛋白LC3II/LC3I的比例,降低了p62的表達(dá),激活了EPCs自噬。當(dāng)我們采用慢病毒沉默自噬后,PTV改善EPCs增殖和遷移能力被逆轉(zhuǎn);此外,自噬抑制劑3-MA預(yù)處理EPCs后,PTV改善EPCs增殖和遷移的能力同樣被逆轉(zhuǎn)。以上結(jié)果證明,PTV通過增強EPCs自噬的方式改善EPCs功能。結(jié)論1.動脈粥樣硬化模型小鼠中EPCs增殖、遷移能力減弱,自噬水平降低;2.體外ox-LDL模擬動脈粥樣硬化形成微環(huán)境,EPCs增殖、能力減弱,SOCE被激活,自噬水平增強;3.體外ox-LDL培養(yǎng)EPCs,激活SOCE-CAMKK2-MTOR信號通路上調(diào)EPCs自噬水平,自噬的激活保護應(yīng)激環(huán)境下EPCs增殖、遷移能力;4.PTV通過調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬水平,改善EPCs生物學(xué)功能。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R543.5

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1 許赤;陳文捷;楊楊;李華;易述紅;陳規(guī)劃;;老年大鼠肝臟細(xì)胞自噬及其移植后改變[A];2013中國器官移植大會論文匯編[C];2013年

2 劉杰民;紀(jì)云西;蔣歷;黃貴華;鄭超偉;郭超峰;;細(xì)胞自噬是探索中醫(yī)藥微觀機制的新思路[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會脾胃病分會第二十四次全國脾胃病學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2012年

3 李康生;代劍平;;病毒感染與細(xì)胞自噬[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點研討會論文集[C];2011年

4 楊鍵;鄧玉杰;張曉燕;呂鵬飛;徐俊;楊穎;寧光;;脂肪細(xì)胞自噬檢測方法的建立及意義探討[A];中華醫(yī)學(xué)會第十一次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

5 陳英;樸英杰;;人肝細(xì)胞自噬性凋亡的形態(tài)學(xué)觀察[A];第十二屆全國電子顯微學(xué)會議論文集[C];2002年

6 楊鍵;鄧玉杰;張曉燕;呂鵬飛;徐俊;楊穎;寧光;;脂肪細(xì)胞自噬檢測方法的建立及意義探討[A];中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會第十六次全國學(xué)術(shù)會議論文集[C];2012年

7 趙穎;楊靜;廖文娟;劉向宇;張輝;王杉;王冬來;馮京南;俞立;朱衛(wèi)國;;胞漿中Fox01引起細(xì)胞自噬進而發(fā)揮抑制腫瘤的功能[A];中華醫(yī)學(xué)會腫瘤學(xué)分會第七屆全國中青年腫瘤學(xué)術(shù)會議——中華醫(yī)學(xué)會腫瘤學(xué)分會“中華腫瘤 明日之星”大型評選活動暨中青年委員全國遴選論文匯編[C];2011年

8 陳永;鄒s舠，

本文編號：1351813