本文關(guān)鍵詞：P物質(zhì)快速激活經(jīng)典Wnt通路調(diào)控MC3T3-E1細(xì)胞凋亡　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 神經(jīng)肽 P物質(zhì) 小鼠MC3T3-E1細(xì)胞 凋亡 經(jīng)典Wnt/β-catenin通路

【摘要】：創(chuàng)傷、感染等多種原因造成的骨折延遲愈合及骨折不愈合一直是嚴(yán)重影響患者臨床預(yù)后及生存質(zhì)量的醫(yī)學(xué)難題。一方面,骨組織工程及外固定架等技術(shù)的快速發(fā)展,極大地改善了此類患者的預(yù)后;另一方面,對骨折再生與重建過程中多種因素調(diào)控機(jī)制的深入研究,不僅全面闡釋了骨再生過程中的復(fù)雜病理生理學(xué)機(jī)制,更為臨床治療該類疾患提供了全新的思路和堅實(shí)的理論基礎(chǔ)。大量研究已證實(shí):神經(jīng)因素對骨折愈合、骨組織再生修復(fù)具有確切的生物調(diào)控作用。其中,以降鈣素基因相關(guān)肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP)和P物質(zhì)(Substance P,SP)為代表的神經(jīng)肽類物質(zhì)是神經(jīng)因素發(fā)揮調(diào)控作用的關(guān)鍵因素。本課題通過檢測P物質(zhì)對小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞去血清誘導(dǎo)凋亡的影響,以闡明P物質(zhì)在去血清誘導(dǎo)凋亡過程中的生物學(xué)效應(yīng),并進(jìn)一步探討P物質(zhì)激活經(jīng)典wnt信號通路發(fā)揮調(diào)控作用的機(jī)制。目的:(1)培養(yǎng)小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞,檢測去血清誘導(dǎo)凋亡中NK-1受體表達(dá)的變化;(2)探討去血清凋亡對小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞經(jīng)典wnt信號通路的影響;(3)探討P物質(zhì)在小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞去血清誘導(dǎo)凋亡過程中的生物學(xué)效應(yīng);(4)探討去血清誘導(dǎo)凋亡過程中,P物質(zhì)通過經(jīng)典Wnt信號通路調(diào)控小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)的作用機(jī)制。方法:小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)、小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞的化學(xué)染色鑒定、PCR檢測目的基因表達(dá)、Western Blot檢測目的蛋白表達(dá)、免疫熒光標(biāo)記相關(guān)抗體-FITC染色等。實(shí)驗(yàn)設(shè)計分組:對照組、P物質(zhì)組、P物質(zhì)+NK-1受體拮抗劑組、P物質(zhì)+Wnt通路拮抗劑DKK組。結(jié)果:(1)本實(shí)驗(yàn)所采用的小鼠MC3T3-E1細(xì)胞具有成骨特性并可以穩(wěn)定表達(dá)NK-1受體,成骨類細(xì)胞持續(xù)表達(dá)NK-1受體是神經(jīng)肽類物質(zhì)發(fā)揮調(diào)控作用的基礎(chǔ);(2)去血清處理可以誘導(dǎo)小鼠MC3T3-E1細(xì)胞發(fā)生凋亡改變。去血清處理誘導(dǎo)MC3T3-E1細(xì)胞凋亡的同時激活經(jīng)經(jīng)典Wnt信號通路。(3)P物質(zhì)抑制小鼠MC3T3-E1細(xì)胞去血清誘導(dǎo)凋亡過程中Bax/Bcl-2和凋亡蛋白3等凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá),P物質(zhì)具有明顯的抗凋亡作用;(4)P物質(zhì)可快速激活小鼠MC3T3-E1細(xì)胞去血清誘導(dǎo)凋亡過程中ββ-cantenin的表達(dá),并促進(jìn)該蛋白進(jìn)入細(xì)胞核,其速率明顯快于去血清誘導(dǎo)凋亡激活經(jīng)典Wnt信號通路的速率。結(jié)論:P物質(zhì)可在去血清誘導(dǎo)小鼠MC3T3-E1細(xì)胞凋亡激活經(jīng)典Wnt信號通路的基礎(chǔ)上,更快以及更大程度地激活經(jīng)典Wnt信號通路。本研究發(fā)現(xiàn)神經(jīng)肽P物質(zhì)可通過快速激活小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞的經(jīng)典Wnt信號通路,拮抗去血清誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞凋亡。本研究通過初步探討“P物質(zhì)—去血清—凋亡—經(jīng)典Wnt信號通路”軸線中各因素的相互作用關(guān)系,進(jìn)一步揭示P物質(zhì)在骨再生過程中的作用機(jī)制。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R683

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本文編號：1348599