本文關(guān)鍵詞：31種融合基因在兒童急性白血病中的表達(dá)及臨床意義　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 兒童 急性淋巴細(xì)胞白血病 分子遺傳學(xué) 多重巢式RT-PCR 兒童 急性髓細(xì)胞白血病 分子遺傳學(xué) 多重巢式RT-PCR 兒童 急性淋巴細(xì)胞白血病 流式細(xì)胞術(shù) PCR 微小殘留病

【摘要】：第一部分31種融合基因在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病中的表達(dá)目的分析兒童急性淋巴細(xì)胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的分子遺傳學(xué)改變與臨床特征的關(guān)系。方法收集并分析255例初診ALL患兒臨床及實(shí)驗(yàn)室資料,所有患兒均做骨髓細(xì)胞學(xué)、免疫分型、染色體核型分析并利用多重巢式PCR檢測31種白血病基因,檢測為陽性者應(yīng)用split-out PCR驗(yàn)證。結(jié)果255例ALL中男性153例,女性102例,平均年齡63.07±2.67月。共104例檢出白血病基因(陽性率40.78%),包括ETV6/RUNX1基因42例,E2A/PBX1基因17例,BCR/ABL基因15例,MLL基因16例,SIL/TAL1基因5例,HOX11基因5例,EVI1基因3例及SET/CAN基因1例。T-ALL基因檢出率低于B-ALL;ETV6/RUNX1、BCR/ABL基因C-B-ALL多見,E2A/PBX1和MLL基因分別多見于pre-B-ALL和pro-B-ALL;ETV6/RUNX1基因多見于1-10歲組,MLL基因多發(fā)于1歲組,BCR/ABL基因多見于10歲組(P0.05)。結(jié)論采用多重巢式RT-PCR結(jié)合split-out PCR方法可方便快速檢測31種兒童常見的白血病基因,有助于兒童ALL精確分型、指導(dǎo)危險度分層和治療。T-ALL基因檢出率較低,提示T-ALL可能需要其它方法進(jìn)行分子遺傳學(xué)分型。不同年齡組B-ALL分子遺傳學(xué)改變存在差異,可能是不同年齡兒童B-ALL化療效果存在差異的原因之一。第二部分31種融合基因在兒童急性髓細(xì)胞白血病中的表達(dá)目的分析兒童急性髓細(xì)胞性白血病(acute myeloid leukemia,AML)的分子遺傳學(xué)改變與臨床特征的關(guān)系。方法收集并分析133例初診AML患兒臨床及實(shí)驗(yàn)室資料,所有患兒均做骨髓細(xì)胞學(xué)、免疫分型、染色體核型分析并利用多重巢式PCR檢測31種白血病基因,初篩試驗(yàn)為陽性者應(yīng)用split-out PCR驗(yàn)證。結(jié)果133例AML患兒中包括急性早幼粒細(xì)胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)28例,非APL的AML患兒105例(男性62例,女性43例,平均年齡73.03±4.54月)。共98例檢出白血病基因(陽性率73.68%),包括:AML/ETO基因31例,PML/Ra Rα基因28例,MLL重排基因12例,CBFβ-MYH11基因10例,HOX11基因及TLS/ERG基因1例。EVI1基因22例(其中7例合并MLL重排基因)。APL患兒中檢出罕見型PML/Ra Rα基因2例。非APL患兒中AML/ETO及EVI1基因陽性率最高,但各年齡組分子遺傳學(xué)分布無顯著性差異(p0.05)。染色體檢查6例未見分裂象,可供分析99例患兒中73例為異常核型(陽性率73.74%)。AML患兒染色體異常核型及基因檢出率均高于ALL(p0.05)。結(jié)論多重巢式RT-PCR結(jié)合split-RT-PCR方法可方便快速檢測兒童AML常見融合基因,有助于完善AML精細(xì)分型。多重巢式RT-PCR聯(lián)合基因測序有助于檢測AML融合基因罕見突變位點(diǎn),提高AML融合基因檢出率。比較ALL而言,聯(lián)合細(xì)胞遺傳學(xué)及檢測AML常見基因在指導(dǎo)兒童AML危險度分層和臨床治療中具有更大意義。第三部分ETV6/RUNX1、E2A/PBX1或MLL基因在兒童急性B淋巴細(xì)胞白血病微小殘留病監(jiān)測中的價值目的分別利用流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,FCM)及PCR技術(shù)監(jiān)測兒童急性B淋巴細(xì)胞性白血病(B cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)治療后微小殘留病(Minimal residual disease,MRD)水平,分析兩種檢測方法的靈敏度及與預(yù)后的關(guān)系。方法61例初診時B-ALL患兒分為A組(ETV6/RUNX1基因陽性)、B組(E2A/PBX1基因陽性)和C組(MLL基因陽性)并接受CCCG-ALL-2008方案化療,治療后不同時間點(diǎn)(time piont,TP)行骨髓穿刺,使用FCM及PCR技術(shù)檢查評估TP2及TP3時MRD水平并分析與預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果TP2及TP3時FCM-MRD和PCR-MRD檢測陽性率無顯著差異(P0.05)。B組PCR-MRD檢測陽性率高于FCM-MRD。隨訪至2017.02,61例患兒平均生存時間43.928±2.226月,3年EFS為80.0±5.4%。A組、B組和C組平均生存時間分別為50.325±1.129月、24.867±3.608月及31.852±7.201月,3年EFS分別為93.1±4.7%、60.0±12.6%和62.9±17.9%,A組療效好于B組和C組(P0.05)。結(jié)論按照分子遺傳學(xué)進(jìn)行危險度分組并分層治療可以有效提高兒童ALL的療效。使用FCM或PCR技術(shù)均可以有效檢測兒童B-ALL的MRD水平并指導(dǎo)其分層治療。雖然FCM或PCR技術(shù)檢測MRD效果相似,但B組和C組患兒可能更適合選擇PCR技術(shù)檢測MRD。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R733.71

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 吳桂香;劉元生;;慢性粒細(xì)胞白血病中相關(guān)融合基因的研究進(jìn)展[J];汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年03期

2 黃明,楊桂斌;長期生存的急性早幼粒細(xì)胞白血病PML/RARα融合基因的變化及意義[J];白血病.淋巴瘤;2004年01期

3 朱曉華;高怡瑾;楊毅;吳s，

本文編號：1332057