本文關鍵詞：MLF1IP在Luminal型乳腺癌中的表達及其對他莫昔芬敏感性的影響　出處：《南方醫(yī)科大學》2017年博士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： 乳腺癌 MLF1IP RNA干擾 他莫昔芬

【摘要】：目的:內(nèi)分泌治療是Luminal型乳腺癌的重要治療方法,但原發(fā)或繼發(fā)性內(nèi)分泌治療耐藥問題已成為乳腺癌臨床治療的一大難題。有研究顯示人髓細胞白血病因子1相互作用蛋白基因(The myelodysplasia/myeloid leukemia factor 1-interacting protein,MLF1IP)與多種惡性腫瘤相關,但關于MLF1IP基因與Luminal型乳腺癌關系尚未見報道。因此,本課題擬探討MLF1IP在Luminal型乳腺癌中的表達情況及其與他莫昔芬敏感性的關系,為乳腺癌內(nèi)分泌治療敏感人群的篩選提供新的指標,以及為逆轉他莫昔芬耐藥提供新的思路。方法:1.采用實時熒光定量PCR檢測Luminal型乳腺癌組織及配對癌旁組織中MLF1IP mRNA相對表達水平。并通過癌癥基因組圖譜(The Cancer Genome Atlas,TCGA)公共數(shù)據(jù)集研究MLF1IP基因在Luminal型乳腺癌中的表達情況及其對生存預后的影響。同時,采用免疫組化染色對Luminal型乳腺癌組織中的MLF1IP蛋白表達進行定位和半定量檢測,進一步驗證實驗結果。2.構建MLF1IP基因沉默慢病毒載體,利用其感染MLF1IP高表達乳腺癌細胞株建立相關細胞模型,并采用實時熒光定量PCR和Western Blot驗證其MLF1IP沉默效果。采用CCK-8檢測細胞增殖能力,采用流式細胞周期分析檢測細胞周期構成,采用流式細胞凋亡分析檢測細胞凋亡水平。采用Western Blot檢測多種細胞周期相關蛋白的表達,觀察MLF1IP對細胞周期不同階段相關蛋白表達的影響。3.實時熒光定量PCR檢測他莫昔芬對MLF1IP誘導作用。CCK-8檢測MLF1IP基因沉默對乳腺癌細胞他莫昔芬藥物敏感性的影響。并在有或無他莫昔芬處理條件下,采用流式細胞凋亡分析檢測凋亡在MLF1IP介導乳腺癌細胞他莫昔芬耐藥中的作用。另外,采用Western Blot檢測多種細胞凋亡、P13K/AKT信號通路相關蛋白的表達水平變化,進一步分析相關作用機制。結果:1.實時熒光定量PCR及TCGA數(shù)據(jù)庫檢索結果均顯示MLF1IP mRNA在Luminal型乳腺癌組織中的表達明顯高于癌旁組織。且MLF1IP高表達與Luminal型乳腺癌患者PR狀態(tài)、淋巴結轉移及不良預后等密切相關。免疫組化結果顯示MLF1IP蛋白主要定位于細胞漿,癌組織中陽性細胞比例明顯高于癌旁對照,并與腫瘤大小、淋巴結轉移、PR狀態(tài)顯著相關。2.MLF1IP基因沉默可顯著降低MCF-7細胞增殖能力,促使其細胞周期停滯于G1期,并可促進MCF-7細胞死亡,但其對凋亡的作用有待于進一步研究。此外,Western Blot實驗結果表明MCF7-shRNA細胞的Cyclin D1蛋白表達水平顯著低于MCF7-NC細胞,而Cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6蛋白表達水平在兩組細胞間均無顯著差異。3.他莫昔芬可誘導MCF-7細胞MLF1IP表達。MLF1IP基因沉默可顯著增加MCF-7細胞他莫昔芬敏感性。在他莫昔芬刺激條件下,MLF1IP基因沉默可顯著抑制MCF-7細胞增殖并促進其凋亡,兩組間差異大于無他莫昔芬刺激條件下增殖、凋亡水平的差異。Western Blot分析顯示,在他莫昔芬刺激條件下,MLF1IP基因沉默可顯著上調(diào)Bax、Caspase3、Caspase7、Caspase9蛋白表達水平,并下調(diào)Bcl-2蛋白表達水平。另外,對P13K/AKT信號通路的Western Blot檢測結果顯示MCF7-shRNA細胞的PTEN蛋白表達水平明顯高于MCF7-NC細胞,同時p-AKT蛋白表達水平明顯低于MCF7-NC細胞。提示MLF1IP可促進AKT磷酸化,激活PI3K/AKT信號通路,而這種作用可能是通過抑制PTEN表達所致。結論:1.MLF1IP表達與Luminal型乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關,MLF1IP是Luminal型乳腺癌患者預后的潛在預測指標。2.MLF1IP通過上調(diào)CyclinD1影響細胞周期,促進MCF-7細胞增殖。MLF1IP基因沉默可顯著降低MCF-7細胞增殖能力,并可促進MCF-7細胞死亡,但其對凋亡的作用有待于進一步研究。3.MLF1IP相關的凋亡抵抗在MLF1IP介導乳腺癌細胞TAM特異性耐藥中扮演重要角色。MLF1IP可作為Luminal型乳腺癌他莫昔芬敏感性的預測因子,并且MLF1IP可能通過影響PI3K-PTEN/AKT信號通路活性,從而促進乳腺癌細胞他莫昔芬耐藥。
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R737.9

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 Bruno S.;Maisonneuve P.;Castellana P. ;劉麗娜;;非酒精性脂肪性肝炎的發(fā)病率和危險因素:對意大利5408例婦女在應用他莫昔芬進行預防的前瞻性研究[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(胃腸病學分冊);2005年09期

2 WisemanH,徐積恩;他莫昔芬:膜介作用新機制和治療進展[J];國外醫(yī)學.藥學分冊;1994年05期

3 郭利;慎用他莫昔芬[J];國外醫(yī)學.藥學分冊;2001年02期

4 ;新基因位點可預測他莫昔芬的療效[J];河南醫(yī)學研究;2004年04期

5 林旭豐;;中藥結合他莫昔芬治療男性乳房異常發(fā)育癥15例療效觀察[J];浙江臨床醫(yī)學;2008年03期

6 朱余兵;張倩;于翠霞;鄒建軍;盧_";肖大偉;;離線紫外照射和高效液相熒光法測定他莫昔芬及代謝物在人血漿中的濃度[J];中國藥學雜志;2009年21期

7 劉朋;王芙榮;紀立偉;李可欣;;212例他莫昔芬不良反應回顧性分析[J];中國藥物應用與監(jiān)測;2011年06期

8 張燕青;王連生;;基因多態(tài)對他莫昔芬療效影響研究進展[J];中國藥理學與毒理學雜志;2012年03期

9 溫蔭芬;;他莫昔芬用鈀催化交叉偶合一步合成法[J];國外醫(yī)藥.合成藥.生化藥.制劑分冊;1988年03期

10 孫衛(wèi)華;他莫昔芬的慢性不良反應[J];中國醫(yī)院藥學雜志;1993年03期

相關會議論文 前10條

1 張燕青;王連生;;基因多態(tài)對他莫昔芬療效影響研究進展[A];第十五屆中國神經(jīng)精神藥理學學術會議論文摘要[C];2012年

2 卞衛(wèi)和;李琳;楊靜;;辨證治療乳腺癌患者口服他莫昔芬不良反應[A];第十二次全國中醫(yī)、中西醫(yī)結合乳房病學術會議論文集[C];2011年

3 王愛華;唐惠林;馮欣;;他莫昔芬治療多囊卵巢綜合征的系統(tǒng)評價[A];2012年全國醫(yī)院藥學學術年會暨第72屆世界藥學大會衛(wèi)星會論文集[C];2012年

4 焦莉;杜怡峰;郭守剛;;他莫昔芬在大鼠大腦中動脈缺血再灌注海馬遲發(fā)性神經(jīng)元死亡和遠期記憶功能中的作用及其機制的研究[A];山東省2013年神經(jīng)內(nèi)科學學術會議暨中國神經(jīng)免疫大會2013論文匯編[C];2013年

5 郭人花;王同杉;孫靖;金時代;束永前;;他莫昔芬抑制肝癌細胞HepG2增殖和誘導凋亡的機制研究[A];第三屆中國腫瘤內(nèi)科大會教育集暨論文集[C];2009年

6 毛曉丹;孫蓬明;林芬;董濱華;宋一一;;他莫昔芬,雷洛昔芬,XCT790作用于內(nèi)膜癌細胞的流式分析[A];中華醫(yī)學會第十次全國婦產(chǎn)科學術會議婦科腫瘤會場（婦科腫瘤學組、婦科病理學組）論文匯編[C];2012年

7 高德宗;唐魯兵;李亮;余之剛;;γ-干擾素增強他莫昔芬抗乳腺癌作用的體外實驗研究[A];山東抗癌協(xié)會普外腫瘤專業(yè)委員會第三次學術會議論文匯編[C];2006年

8 杜貴強;周瓏;陳曉悅;賀銀燕;萬小平;;G蛋白偶聯(lián)受體GPR30介導了4羥基他莫昔芬誘導的子宮內(nèi)膜癌細[A];中華醫(yī)學會第十次全國婦產(chǎn)科學術會議婦科腫瘤會場（婦科腫瘤學組、婦科病理學組）論文匯編[C];2012年

9 卞衛(wèi)和;李琳;楊靜;;調(diào)理陰陽——乳腺癌他莫昔芬毒副反應的中醫(yī)治療思路[A];第十二次全國中醫(yī)、中西醫(yī)結合乳房病學術會議論文集[C];2011年

10 薛靜;田軍偉;張文;徐東;;原發(fā)性腹膜后纖維化九例臨床分析[A];中華醫(yī)學會全國風濕病學年會論文匯編[C];2003年

相關重要報紙文章 前10條

1 黃燕;英揭示他莫昔芬耐藥原因[N];中國醫(yī)藥報;2009年

2 本報特約撰稿人 徐錚奎;他莫昔芬涅i肹N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2008年

3 王寶龍；王宏杰;上海華聯(lián)制藥攻克他莫昔芬制備難題[N];中國醫(yī)藥報;2005年

4 麥迪信;他莫昔芬功不可沒！[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

5 方留民;他莫昔芬可減少乳腺良性病變[N];中國醫(yī)藥報;2004年

6 王伯秋;他莫昔芬副作用引起業(yè)內(nèi)關注[N];中國醫(yī)藥報;2004年

7 ;治療早期乳腺癌他莫昔芬和放療同時使用與序貫治療的療效均理想[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年

8 ;挑戰(zhàn)治療“金標準”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

9 ;他莫昔芬預防乳腺癌存在風險[N];大眾衛(wèi)生報;2005年

10 ;他莫昔芬預防乳腺癌有講究[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2001年

相關博士學位論文 前10條

1 王強;他莫昔芬激活ERα36增強乳腺癌轉移及其機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

2 周賢孝;基于基因表達相對秩序預測ER+乳腺癌對他莫昔芬的敏感性[D];電子科技大學;2014年

3 耿沖;姜黃素促進ER alpha陰性乳腺癌他莫昔芬敏感的機制研究[D];山東大學;2016年

4 李高朋;CCAR1 5’UTR作為miR-1254天然增強子逆轉他莫昔芬抗性[D];中國科學技術大學;2015年

5 張媛;HGF/c-Met信號通路調(diào)控乳腺癌細胞他莫昔芬耐藥的機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2016年

6 黃督平;MLF1IP在Luminal型乳腺癌中的表達及其對他莫昔芬敏感性的影響[D];南方醫(yī)科大學;2017年

7 王龍強;他莫昔芬對雌激素受體陰性乳腺癌細胞的殺傷能力的研究[D];華中科技大學;2014年

8 陳多;選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑對小鼠學習記憶功能的損傷作用及機理研究[D];沈陽藥科大學;2001年

9 孫雪波;他莫昔芬在大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的神經(jīng)保護作用及機制研究[D];蘇州大學;2013年

10 王帥;SHG-44人膠質(zhì)瘤細胞的離子通道特性及他莫昔芬抗膠質(zhì)瘤作用的機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2009年

相關碩士學位論文 前10條

1 趙明智;他莫昔芬對SK-BR-3乳腺癌細胞株荷瘤裸鼠血管生成的作用及機制研究[D];河北大學;2015年

2 楊墨琳;PAX2、AIB1在人乳腺癌細胞生長及他莫昔芬治療作用的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

3 胡夢裳;~(18)F-FDG評價PI3K信號通路抑制劑聯(lián)合他莫昔芬治療乳腺癌的早期療效[D];蘇州大學;2015年

4 駱廣濤;EZH2蛋白在他莫昔芬耐藥乳腺癌MCF-7細胞系的表達及對其細胞增殖的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

5 石統(tǒng)偉;利用基因表達的秩次關系預測他莫昔芬的治療效果[D];電子科技大學;2014年

6 袁杰;探討ITGB1在GPER介導的乳腺癌他莫昔芬耐受中的作用機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2015年

7 嚴玉釗;GPER介導他莫昔芬對人乳腺癌相關成纖維細胞的增殖、遷移及凋亡作用[D];重慶醫(yī)科大學;2015年

8 張雪峰;OATP1B1與CYP2D6*10基因多態(tài)性對他莫昔芬治療乳腺癌療效的相關性研究[D];皖南醫(yī)學院;2015年

9 王建偉;經(jīng)腹膜外術式加短期強的松和長期他莫昔芬治療特發(fā)性腹膜后纖維化[D];山東大學;2016年

10 袁建梅;他莫昔芬與芳香化酶抑制劑對乳腺癌患者靜脈血栓發(fā)生影響的Meta分析[D];重慶醫(yī)科大學;2016年

，

本文編號：1329081