本文關(guān)鍵詞：黑素瘤細(xì)胞與間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞通過外泌體相互作用的研究　出處：《南京醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：黑素瘤是惡性程度較高的腫瘤之一,對普通的化療和放療均不敏感。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn),黑素瘤的生長和轉(zhuǎn)移也依賴于微環(huán)境的激活。2011年,Wickline實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn),黑素瘤通過分泌的外泌體(exosome)改造前哨淋巴結(jié),從而促進(jìn)癌細(xì)胞向該淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。外泌體在此細(xì)胞間交流中扮演信息媒介的作用。然而,目前對于黑素瘤來源的外泌體如何與正常細(xì)胞相互作用,以及正常細(xì)胞受到哪些影響的報(bào)道還很少,相關(guān)的認(rèn)識也很不充分。為研究惡性黑素瘤與周圍微環(huán)境之間的相互作用,揭示其可能的分子機(jī)制,指導(dǎo)治療黑素瘤的新藥研發(fā),進(jìn)行此項(xiàng)研究。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:一、從小鼠黑素瘤B16細(xì)胞的培養(yǎng)液上清中提取并鑒定外泌體(B16-外外泌體)利用超速離心法從細(xì)胞上清中分離外泌體,透射電鏡對其外形進(jìn)行鑒定,nanosight進(jìn)行粒徑分析,western blot對其表面標(biāo)記CD81、Alix進(jìn)行定量分析,通過上述結(jié)果,證明成功從B16上清中提取出外泌體。二、觀察B16-外泌體對間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSC)增殖遷移的影響及可能的分子機(jī)制首先,使用共聚焦熒光顯微鏡體外觀察B16-外泌體可以成功被間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞攝取。其次,CCK-8實(shí)驗(yàn)證實(shí),攝取B16-外泌體的間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞增殖率明顯增高,transwell小室實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),后者遷移率亦明顯增高。最后,免疫熒光檢測及western blot發(fā)現(xiàn),攝取B16-外泌體的MSC中的α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達(dá)量明顯上升,這種趨勢可部分被TGF-β受體的阻斷劑SB431542所阻斷。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R739.5

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本文編號：1318819