本文關鍵詞：盆底修補合成網(wǎng)片陰道植入后的組織相容性及輔加干細胞的網(wǎng)片植入對陰道影響的實驗研究　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學院》2017年博士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：目的:評估臨床使用的四種不同類型的合成網(wǎng)片植入大鼠陰道后不同時間點的組織相容性。方法:選用四種不同類型的合成網(wǎng)片,即中質(zhì)不可吸收聚丙烯網(wǎng)片(GynemeshTMPS)、輕質(zhì)部分可吸收聚丙烯網(wǎng)片(ArtisynTMY型網(wǎng)片)、輕質(zhì)不可吸收聚丙烯網(wǎng)片(TiLOOP(?)輕質(zhì)網(wǎng)片)和超輕質(zhì)不可吸收聚丙烯網(wǎng)片(TiLOOP(?)超輕質(zhì)網(wǎng)片)。將網(wǎng)片裁剪為合適大小(0.6×0.8 cm),植入去勢雌性大鼠的陰道后壁粘膜下層,于術后1周、4周和12周取材。標本石蠟包埋切片后進行蘇木精-伊紅(Hematoxylin-eosin,HE)染色和免疫組織化學染色,觀察各組網(wǎng)片周圍膠原生成情況和局部炎性反應、新生血管生成及纖維包裹情況,并進行半定量組織學評分,比較不同類型網(wǎng)片在體內(nèi)的組織相容性。利用實時熒光定量聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR),檢測不同時間點陰道局部組織特定細胞外基質(zhì)結構蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMP)、生長因子、炎性因子等的表達差異。結果:(1)四種合成網(wǎng)片植入后均引起局部的炎癥反應,炎癥反應評分隨時間延長而降低,四組中各自1周和12周的炎癥反應評分差異均有統(tǒng)計學意義(p0.05);纖維包裹情況也呈減輕趨勢,中質(zhì)不可吸收網(wǎng)片和輕質(zhì)部分可吸收補片組1周與4周、1周與12周的纖維包裹評分差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);(2)12周時,輕質(zhì)和超輕質(zhì)的不可吸收網(wǎng)片引起的炎癥反應較中質(zhì)和輕質(zhì)部分可吸收網(wǎng)片輕(p0.05);輕質(zhì)部分可吸收補片組的纖維包裹較輕質(zhì)不可吸收網(wǎng)片重(2.80±0.45 vs.1.86±0.69,p = 0.025);(3)各時間點四組間新生血管生成情況無明顯差異(p0.05);(4)合成網(wǎng)片植入會引起局部降解結構蛋白的蛋白酶和炎癥相關因子表達的改變,MMP-1、MMP-2、MMP-9 和白介素(Interleukine,IL)-1β、IL-4、IL-10 等在某些時間點基因表達增加,且在部分可吸收補片組更明顯;12周時部分可吸收補片組的MMP-2、MMP-9和IL-1β表達明顯高于其余三組(p0.05)。結論:(1)合成網(wǎng)片在局部引起的異物反應隨植入時間延長呈逐漸減輕趨勢;(2)部分可吸收補片在陰道局部引起的組織反應較重,聚丙烯網(wǎng)片添加可吸收成分并未達到網(wǎng)片優(yōu)化效果;(3)輕質(zhì)、超輕質(zhì)聚丙烯網(wǎng)片引起的炎癥反應和纖維包裹較輕,是有前景的盆底重建植入網(wǎng)片;(4)合成網(wǎng)片植入會增加局部組織細胞外基質(zhì)結構蛋白降解酶MMPs和炎性相關因子等表達。目的:評估輔加人臍帶來源間充質(zhì)干細胞(human umbilical cord-derived stem cells,HUMSCs)對聚丙烯合成網(wǎng)片植入大鼠陰道后組織相容性和局部反應的影響,探索HUMSCs與聚丙烯網(wǎng)片結合形成的組織工程學補片在盆底修補應用的價值和可行性。方法:首先從人臍帶組織中獲得臍帶間充質(zhì)干細胞(HUMSCs),對細胞表型及多向分化能力進行鑒定。然后將HUMSCs與聚丙烯網(wǎng)片結合,構建以HUMSCs為種子細胞,聚丙烯網(wǎng)片為支架材料的組織工程學補片。將輔加HUMSCs的補片和單純聚丙烯網(wǎng)片分別植入去勢雌性大鼠陰道后壁粘膜下,于術后1周、4周、12周對陰道網(wǎng)片復合物進行取材,蘇木精-伊紅(Hematoxylin-eosin,HE)染色進行半定量的組織學評分,比較兩組在炎癥反應、新生血管生成、纖維包裹情況的差異。實時熒光定量聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)比較兩組中陰道局部細胞外基質(zhì)結構蛋白、蛋白降解酶、生長因子、炎性因子的表達差異。結果:(1)采用酶消化法成功提取出HUMSCs,流式細胞儀鑒定細胞具有間充質(zhì)干細胞表型,且體外誘導培養(yǎng)證實其具有成骨成脂的多向分化能力;(2)使用基質(zhì)膜基質(zhì)Metrigel膠有效的將HUMSCs與聚丙烯合成網(wǎng)片結合,獲得輔加干細胞的組織工程學補片;(3)植入大鼠陰道后,1周、4周和12周各時間點均未發(fā)現(xiàn)網(wǎng)片暴露、感染等并發(fā)癥;(4)輔加HUMSCs的補片和單純聚丙烯網(wǎng)片在局部引起的炎癥反應和纖維包裹隨時間延長逐漸減輕,兩組中各自1周與12周的炎癥反應和纖維包裹評分具有統(tǒng)計學差異(p0.05);(5)植入1周時,輔加HUMSCs的補片引起的局部炎癥反應重于單純網(wǎng)片組(3.33±0.21 vs.2.63±0.18,p=0.026);而 4 周和 12 周時,輔加 HUMSCs 補片組的炎癥反應評分明顯低于單純聚丙烯網(wǎng)片組(p0.05);(6)各時間點輔加HUMSCs補片組和單純聚丙烯網(wǎng)片組的新生血管生成和纖維包裹評分無明顯差異;(7)12周結果顯示,與單純聚丙烯網(wǎng)片組相比,HUMSCs可以降低局部降解結構蛋白的酶MMP-1、MMP-2和炎性因子IL-1的表達水平(p0.05)。結論:(1)兩組網(wǎng)片引起的局部炎癥反應和纖維包裹隨時間延長而減輕;(2)4周和12周時,輔加HUMSCs的補片引起的陰道局部炎癥反應較單純聚丙烯網(wǎng)片輕;(3)各時間點是否輔加HUMSCs的兩組網(wǎng)片在新生血管生成和纖維包裹情況無明顯差異;(4)HUMSCs可能在局部發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用,降低局部降解結構蛋白的酶MMPs和炎癥相關因子的表達水平;(5)HUMSCs有望改善合成網(wǎng)片的組織相容性,成為減少術后網(wǎng)片暴露等并發(fā)癥的新方法。目的:評估環(huán)形帶支撐型子宮托治療女性重度盆腔臟器脫垂(pelvic organ prolapse,POP)的短期佩戴成功率、患者滿意度及相關并發(fā)癥,尋找影響子宮托成功使用的因素。方法:本研究是一項前瞻性觀察性研究。收集2015年5月至2015年12月期間因癥狀性Ⅲ/Ⅳ度POP至我院我科門診接受子宮托治療的患者。我們納入97例使用環(huán)形帶支撐型子宮托治療的患者作為研究對象,隨訪至少3個月。若患者在使用子宮托3個月后的門診隨訪仍在堅持用托,則被認為成功。采用病人總體感覺改善(Patient Global Impression of Change,PGI-C)問卷評價患者對子宮托治療的主觀滿意度,并記錄相關并發(fā)癥的發(fā)生情況。我們通過比較用托成功與不成功患者組之間相關臨床特征的差異,尋找可能與環(huán)形帶支撐型子宮托治療重度POP成功與否相關的潛在預測因素。結果:(1)最初使用環(huán)形帶支撐型子宮托治療的97例患者中,82例患者堅持使用至3個月而15例放棄用托,該子宮托的短期成功率為84.5%(82/97);(2)成功使用環(huán)形帶支撐型子宮托的82例患者中,97.6%(80/82)的患者對治療效果滿意,其中75例患者非常滿意,5例比較滿意;沒有人感覺在使用子宮托過程中脫垂癥狀加重;(3)11例患者發(fā)生陰道粘膜潰瘍,25例患者出現(xiàn)陰道分泌物增多,6例患者使用子宮托后出現(xiàn)新發(fā)壓力性尿失禁,但本研究中并未觀察到嚴重并發(fā)癥;(4)成功用托患者中前壁脫垂為重的比例顯著高于用托失敗者(90.2%vs.60%,p0.01),而脫垂程度、是否合并急迫或壓力性尿失禁、既往盆腔手術史等與結局無關。多因素分析結果顯示,陰道前壁脫垂為重是成功使用環(huán)形帶支撐型子宮托可能的預測因素(比值比=5.08,95%可信區(qū)間1.33-19.43,p = 0.02)。結論:(1)環(huán)形帶支撐型子宮托可以用于治療重度盆腔臟器脫垂,且具有較高的短期佩戴成功率和患者滿意度;(2)陰道前壁脫垂為主可能是能成功使用該類型子宮托的預測因素。
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R713

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本文編號：1311511