本文關鍵詞：維甲酸對堿燒傷引起的角膜新血管生成的作用及機制研究　出處：《延邊大學》2015年博士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：研究背景：在正常生理條件下角膜是一種透明組織,但是在感染,異常免疫反應,化學燒傷或熱燒傷等引起的炎癥反應條件下會導致角膜病理性新生血管(CNV)生長。CNV是指血管從角膜緣向透明區(qū)長入的病理現(xiàn)象,如不及時治療可危及視力,甚至致盲。在傷口愈合的過程中,CNV的程度是由促血管生成因子和抑制因子之間的平衡所決定的。因為CNV的發(fā)病機制非常復雜,所以目前對其治療方法也不盡人意。如激素,激光,手術(shù)等治療方法都被證實為變異性高,且在臨床上受到很大程度的限制。因此,能否找到成本低,且副作用小的治療方法,對治療CNV具有很大的臨床價值。維甲酸(RA)是一種能夠調(diào)節(jié)細胞生長,分化及細胞外基質(zhì)形成的維生素A衍生物。目前RA主要應用于牛皮癬和痤瘡等疾病的治療。研究表明,RA可以通過破壞整合素抑制RPE細胞增殖,并在體內(nèi)抑制炎癥反應和組織損傷,改善自身免疫性疾病動物模型的炎癥,且具有較少的細胞毒性作用。眾所周知,堿燒傷引起的角膜CNV可引起嚴重的炎癥反應,甚至發(fā)生角膜溶解。因此人們經(jīng)常會把堿燒傷動物作成新生血管模型。由于維甲酸具有抗炎癥反應作用,本文將探討維甲酸對堿燒傷誘導的實驗性角膜新生血管的影響,并用人真皮微血管內(nèi)皮細胞(HDMEC)來進一步探討其在體外的作用機制。研究目的:觀察RA在堿燒傷引起的角膜新生血管形成的影響。檢測RA對堿燒傷角膜中VEGF和TSP-1的表達的影響,以及用人真皮微血管內(nèi)皮細胞(HDMEC)來進一步探討其在體外的作用機制。對臨床治療角膜新生血管提供新的治療方案提供理論依據(jù)。材料和方法：本實驗利用SD大鼠角膜做成堿燒傷模型。共120只大鼠隨機分為4組(n=30)。第1組：對照組,無堿燒傷；第2組：PBS治療堿燒傷；第3組：用維甲酸治療堿燒傷；第4組：用維甲酸和抑制TSP-1活性多肽(TBP)聯(lián)合治療堿燒傷。四組大鼠都按同樣的實驗方法進行。即堿燒傷后第2,5,10天在立體顯微鏡下隨機測量CNV面積。利用免疫印跡法測定角膜血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和血小板反應蛋白-1(TSP-1)蛋白水平。在體外測定維甲酸對HDMEC細胞增殖,遷移和分化作用。采用ELISA法測定培養(yǎng)液中細胞分泌的TSP-1的水平。利用基因定量法測定HDMEC的TSP-1基因表達水平,并通過免疫印跡法證實其蛋白水平。結(jié)果：角膜堿燒傷可引起TSP-1的表達水平下降,VEGF表達增加。Western印跡法測定發(fā)現(xiàn)在RA治療組角膜TSP-1蛋白水平比PBS治療組高(P0.05),而VEGF蛋白水平降低,并且RA治療組TSP-1和VEGF表達水平隨時間的遞增而遞減。RA治療組相對于對照組在堿燒傷10天后表現(xiàn)為新血管生成減少。然而,同時利用血小板反應蛋白-1活性阻斷多肽和RA治療組比RA治療組發(fā)生更多新血管生成。RA增加TSP-1的表達,但對細胞分泌TSP-1無作用。此外,RA抑制增殖的細胞和誘導細胞凋亡的細胞,且抑制細胞管的形成,但TBP會減弱RA的療效。RA對細胞遷移沒有影響。結(jié)論：RA可減少堿燒傷引起的角膜新生血管形成。RA通過生產(chǎn)大量TSP-1和減少VEGF表達來保護化學性角膜損傷。RA可通過增加TSP-1表達水平途徑降低細胞的增殖和分化,誘導細胞凋亡,從而減少新血管生成。
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R779.1

【參考文獻】

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1 劉春民,徐錦堂,趙松濱;角膜堿燒傷后機體巨噬細胞和淋巴細胞的功能變化[J];美中國際眼科雜志;2002年04期

2 Ayhan Dursun;Mustafa Kemal Arici;Feyza Dursun;Ayse Vural Ozec;Mustafa Ilker Toker;Haydar Erdogan;Aysen Topalkara;;Comparison of the effects of bevacizumab and ranibizumab injection on corneal angiogenesis in an alkali burn induced model[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2012年04期

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本文編號：1310912