本文關(guān)鍵詞：維甲酸對(duì)堿燒傷引起的角膜新血管生成的作用及機(jī)制研究　出處：《延邊大學(xué)》2015年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：研究背景：在正常生理?xiàng)l件下角膜是一種透明組織,但是在感染,異常免疫反應(yīng),化學(xué)燒傷或熱燒傷等引起的炎癥反應(yīng)條件下會(huì)導(dǎo)致角膜病理性新生血管(CNV)生長(zhǎng)。CNV是指血管從角膜緣向透明區(qū)長(zhǎng)入的病理現(xiàn)象,如不及時(shí)治療可危及視力,甚至致盲。在傷口愈合的過(guò)程中,CNV的程度是由促血管生成因子和抑制因子之間的平衡所決定的。因?yàn)镃NV的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜,所以目前對(duì)其治療方法也不盡人意。如激素,激光,手術(shù)等治療方法都被證實(shí)為變異性高,且在臨床上受到很大程度的限制。因此,能否找到成本低,且副作用小的治療方法,對(duì)治療CNV具有很大的臨床價(jià)值。維甲酸(RA)是一種能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng),分化及細(xì)胞外基質(zhì)形成的維生素A衍生物。目前RA主要應(yīng)用于牛皮癬和痤瘡等疾病的治療。研究表明,RA可以通過(guò)破壞整合素抑制RPE細(xì)胞增殖,并在體內(nèi)抑制炎癥反應(yīng)和組織損傷,改善自身免疫性疾病動(dòng)物模型的炎癥,且具有較少的細(xì)胞毒性作用。眾所周知,堿燒傷引起的角膜CNV可引起嚴(yán)重的炎癥反應(yīng),甚至發(fā)生角膜溶解。因此人們經(jīng)常會(huì)把堿燒傷動(dòng)物作成新生血管模型。由于維甲酸具有抗炎癥反應(yīng)作用,本文將探討維甲酸對(duì)堿燒傷誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性角膜新生血管的影響,并用人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)來(lái)進(jìn)一步探討其在體外的作用機(jī)制。研究目的:觀察RA在堿燒傷引起的角膜新生血管形成的影響。檢測(cè)RA對(duì)堿燒傷角膜中VEGF和TSP-1的表達(dá)的影響,以及用人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)來(lái)進(jìn)一步探討其在體外的作用機(jī)制。對(duì)臨床治療角膜新生血管提供新的治療方案提供理論依據(jù)。材料和方法：本實(shí)驗(yàn)利用SD大鼠角膜做成堿燒傷模型。共120只大鼠隨機(jī)分為4組(n=30)。第1組：對(duì)照組,無(wú)堿燒傷；第2組：PBS治療堿燒傷；第3組：用維甲酸治療堿燒傷；第4組：用維甲酸和抑制TSP-1活性多肽(TBP)聯(lián)合治療堿燒傷。四組大鼠都按同樣的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行。即堿燒傷后第2,5,10天在立體顯微鏡下隨機(jī)測(cè)量CNV面積。利用免疫印跡法測(cè)定角膜血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和血小板反應(yīng)蛋白-1(TSP-1)蛋白水平。在體外測(cè)定維甲酸對(duì)HDMEC細(xì)胞增殖,遷移和分化作用。采用ELISA法測(cè)定培養(yǎng)液中細(xì)胞分泌的TSP-1的水平。利用基因定量法測(cè)定HDMEC的TSP-1基因表達(dá)水平,并通過(guò)免疫印跡法證實(shí)其蛋白水平。結(jié)果：角膜堿燒傷可引起TSP-1的表達(dá)水平下降,VEGF表達(dá)增加。Western印跡法測(cè)定發(fā)現(xiàn)在RA治療組角膜TSP-1蛋白水平比PBS治療組高(P0.05),而VEGF蛋白水平降低,并且RA治療組TSP-1和VEGF表達(dá)水平隨時(shí)間的遞增而遞減。RA治療組相對(duì)于對(duì)照組在堿燒傷10天后表現(xiàn)為新血管生成減少。然而,同時(shí)利用血小板反應(yīng)蛋白-1活性阻斷多肽和RA治療組比RA治療組發(fā)生更多新血管生成。RA增加TSP-1的表達(dá),但對(duì)細(xì)胞分泌TSP-1無(wú)作用。此外,RA抑制增殖的細(xì)胞和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的細(xì)胞,且抑制細(xì)胞管的形成,但TBP會(huì)減弱RA的療效。RA對(duì)細(xì)胞遷移沒(méi)有影響。結(jié)論：RA可減少堿燒傷引起的角膜新生血管形成。RA通過(guò)生產(chǎn)大量TSP-1和減少VEGF表達(dá)來(lái)保護(hù)化學(xué)性角膜損傷。RA可通過(guò)增加TSP-1表達(dá)水平途徑降低細(xì)胞的增殖和分化,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,從而減少新血管生成。
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R779.1

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉春民,徐錦堂,趙松濱;角膜堿燒傷后機(jī)體巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的功能變化[J];美中國(guó)際眼科雜志;2002年04期

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本文編號(hào)：1310912