發(fā)布時(shí)間：2017-12-17 21:37

  本文關(guān)鍵詞：天然小分子DV21抗癲癇的作用和機(jī)制研究

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【摘要】：癲癇(Epilepsy)是全世界非常普遍的神經(jīng)系統(tǒng)疾病之一,也是最難治療的神經(jīng)系統(tǒng)疾病之一,其發(fā)生機(jī)制到現(xiàn)在也不是非常清楚,病理上具有突發(fā)性、反復(fù)性的特點(diǎn)。據(jù)統(tǒng)計(jì),迄今為止全世界大約有6500萬的癲癇患者,而且我國每年有將近40萬的新發(fā)病人,僅僅在美國每年就有15萬的新發(fā)病例�，F(xiàn)階段臨床上治療癲癇最普遍也是最重要的方法就是藥物治療,現(xiàn)在抗癲癇藥物的作用靶點(diǎn)主要集中在鈉離子通道、NMDA受體、苯二氮卓受體等等。雖然當(dāng)今有超過15種的抗癲癇藥物上市,但是大約有30%的患者對(duì)現(xiàn)階段的藥物治療是耐受的,其中只有大約1%的患者適合手術(shù)切除癲癇病灶的治療方法。因此,進(jìn)一步闡明癲癇的發(fā)病機(jī)制并且尋求一種新的能夠不耐藥的抗癲癇藥物是目前亟待解決的問題。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)和民族藥理學(xué)已經(jīng)成為發(fā)現(xiàn)新藥物的重要來源。在我國的西南地區(qū),從古代開始,民間就用蘿蘼科類的植物來治療癲癇,但是這類植物里面起治療作用的成分和機(jī)制都不是很清楚,因此我們就想能不能從這些藥用的植物里面找到一種治療癲癇的天然小分子呢?帶著這樣的疑問,我們從這些藥用的植物里面,分離出100多個(gè)天然小分子,并且通過斑馬魚高通量篩選的方法發(fā)現(xiàn)了其中的一個(gè)天然小分子具有顯著的抗癲癇活性,并將它命名為DV21,它的抗癲癇活性要強(qiáng)于臨床上常用的4種一線抗癲癇藥物,在1μM的時(shí)候就顯示出顯著的抗癲癇活性。為了確認(rèn)它的抗癲癇活性,我們?cè)贑57BL/6野生型小鼠上驗(yàn)證了 DV21的抗癲癇活性并且通過電生理膜片鉗的實(shí)驗(yàn)方法探尋了 DV21抗癲癇活性的作用機(jī)制:一.三種誘導(dǎo)癲癇的經(jīng)典藥物戊四唑(pentylenetetrazole,PTZ)、匹魯卡品(pilocarpine,PILO)、海人藻酸(kainic acid,KA)給予腹腔注射誘導(dǎo) C57BL/6 野生型小鼠出現(xiàn)急性癲癇癥狀。在給予誘導(dǎo)藥物之前首先給予實(shí)驗(yàn)組腹腔注射不同濃度的DV21,對(duì)照組給予溶劑注射。記錄結(jié)束后,通過腦電圖、肌電圖以及與視頻相結(jié)合的方法進(jìn)行分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)和對(duì)照組相比較,隨著DV21濃度的升高,PTZ和KA誘導(dǎo)急性癲癇模型實(shí)驗(yàn)組癲癇發(fā)作的發(fā)病率和嚴(yán)重程度逐漸降低。在PTZ實(shí)驗(yàn)組,急性癲癇模型小鼠的死亡率也隨著濃度的升高而降低。Pilocarpine組出現(xiàn)的結(jié)果和另外兩組不太相同,小劑量組抗癲癇的活性要高于大劑量組,分析可能的原因是由于藥物在不同模型上起的作用不同或者受體可能出現(xiàn)了飽和的現(xiàn)象。二.在PTZ、KA、PILO的三種急性癲癇模型上,利用導(dǎo)管微量注射到模型小鼠腦室內(nèi),直接給予DV21并監(jiān)測(cè)其抗癲癇的活性,并且與臨床常用的兩種不同作用機(jī)制的抗癲癇藥物做比較(奧卡西平和瑞替加濱),結(jié)果發(fā)現(xiàn)DV21的抗癲癇活性和臨宋常用的抗癲癇藥物奧卡西平和瑞替加濱相似,并且抗癲癇的結(jié)果更加接近于瑞替加濱,這就提示DV21的作用機(jī)制是不是類似于瑞替加濱?三.用膜片鉗的方法探尋DV21起效的作用機(jī)制,結(jié)果顯示當(dāng)給于DV21的時(shí)候,大腦皮層錐體神經(jīng)元的動(dòng)作電位發(fā)放減少,并且我們發(fā)現(xiàn)此作用并不是通過興奮性或者抑制性的神經(jīng)遞質(zhì)起作用,而是通過改變了錐體神經(jīng)元的內(nèi)在特性起作用,進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)DV21是通過增加了 M電流的幅度而降低了錐體神經(jīng)元的興奮性。綜上所述,我們發(fā)現(xiàn)一種天然小分子DV21具有抗癲癇的活性,在斑馬魚癲癇模型和急性小鼠癲癇模型上面都有顯著的抗癲癇活性,并且發(fā)現(xiàn)其作用機(jī)制是通過M通道,使M電流增加。以上結(jié)果提示DV21可能是一種潛在的新的抗癲癇藥物。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285

【參考文獻(xiàn)】

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1 蔡方成;正確評(píng)判和應(yīng)用腦電圖診斷小兒癲[J];中華兒科雜志;2000年11期

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本文編號(hào)：1301674