本文關(guān)鍵詞：Tfh細(xì)胞調(diào)控B細(xì)胞分化及其對(duì)移植排斥反應(yīng)作用的機(jī)制研究

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【摘要】：在我們?nèi)祟愘囈陨娴耐猸h(huán)境中,存在著大量對(duì)人類有害的微生物,如病毒、細(xì)菌、真菌、寄生蟲及原生動(dòng)物等,而當(dāng)上述微生物入侵人體,這些外源生物性刺激將會(huì)引起機(jī)體免疫性應(yīng)答。而機(jī)體的免疫系統(tǒng)能夠識(shí)別外來(lái)入侵的關(guān)鍵是它可以識(shí)別這些微生物上的特異性標(biāo)志——抗原。而器官移植,一項(xiàng)發(fā)展不過(guò)百年卻又作為當(dāng)今治療臟器終末期疾病的主要方法之一,也會(huì)將移植物上的外來(lái)性抗原帶入受者體內(nèi),而受者的免疫系統(tǒng)通過(guò)對(duì)這些外來(lái)性抗原的識(shí)別,會(huì)產(chǎn)生特異性的免疫應(yīng)答,即移植排斥反應(yīng)。經(jīng)過(guò)數(shù)十年的研究,移植排斥反應(yīng)被分為了兩大種類,即細(xì)胞性排斥反應(yīng)及體液性排斥反應(yīng)。細(xì)胞性排斥反應(yīng)常見于在急性排斥反應(yīng)中,是機(jī)體在在移植物外來(lái)抗原的刺激下,T淋巴細(xì)胞識(shí)別抗原而大量激活、合并IL-2等促炎性細(xì)胞因子的生成增加,激活的T細(xì)胞大量增殖,引起了以T細(xì)胞為主的對(duì)移植物的排斥反應(yīng)。當(dāng)供體器官經(jīng)移植手術(shù)植入受者體內(nèi),由于供體和受者之間的組織相容性抗原(MHC)的不同,受體外周循環(huán)中的T淋巴細(xì)胞識(shí)別移植物的抗原而獲得第一信號(hào)激活,隨后進(jìn)入附近的外周免疫器官(脾臟或淋巴結(jié))中,一部分轉(zhuǎn)化形成淋巴母細(xì)胞,并迅速增殖分化為具有活性可識(shí)別抗原的致敏性T淋巴細(xì)胞。其中CD8+細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞可以通過(guò)識(shí)別抗原引起細(xì)胞溶解直接對(duì)移植物造成損傷,而CD4+T輔助細(xì)胞則可以合成釋放多種細(xì)胞因子(IL-2、IL-6、IFN-γ)等,通過(guò)具有直接殺傷作用的亞群直接或通過(guò)輔助CD8+T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等間接作用于移植物造成損傷。而體液性排斥反應(yīng)則是由B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)(或DC識(shí)別抗原啟動(dòng)),首先B細(xì)胞經(jīng)BCR(B cell receptor,BCR)特異性識(shí)別移植物表面抗原,激活第一信號(hào);激活B細(xì)胞的第二信號(hào)即協(xié)同刺激信號(hào)則是由T輔助細(xì)胞與B細(xì)胞相互作用所提供的。激活的的B細(xì)胞隨后進(jìn)入生發(fā)中心,在T輔助細(xì)胞的協(xié)助下經(jīng)過(guò)一系列分化過(guò)程形成漿細(xì)胞或記憶性B細(xì)胞,并通過(guò)漿細(xì)胞產(chǎn)生大量高親和力抗體對(duì)移植物產(chǎn)生殺傷作用。傳統(tǒng)免疫學(xué)的經(jīng)典理論認(rèn)為,針對(duì)TD抗原的抗體免疫應(yīng)答是需要CD4+T細(xì)胞的輔助。CD4+T細(xì)胞在B細(xì)胞活化及體液免疫中發(fā)揮了十分重要的作用,傳統(tǒng)理論認(rèn)為,Th2細(xì)胞通過(guò)CD40/CD40L、CD28/B7與B細(xì)胞相互作用,并通過(guò)分泌IL-4、IL-2等來(lái)發(fā)揮輔助B細(xì)胞活化的作用。但B細(xì)胞活化后在外周免疫器官的生發(fā)中心中須經(jīng)過(guò)體細(xì)胞突變、親和力成熟、受體編輯和類型轉(zhuǎn)換等過(guò)程,這些過(guò)程是否需要T細(xì)胞的輔助以及如何輔助或調(diào)控的機(jī)制尚沒有研究透徹。通過(guò)近年的研究,濾泡輔助性T細(xì)胞(Follicular helper T cells,Tfh)亞群作為在生發(fā)中心內(nèi)真正輔助B細(xì)胞分化的功能已得到了驗(yàn)證,而Tfh自身的分化過(guò)程也有了一定了解,但Tfh細(xì)胞輔助B細(xì)胞的機(jī)制并未完全揭示。目前研究顯示,IL-21敲除小鼠出現(xiàn)Tfh細(xì)胞分化障礙,并影響了進(jìn)一步的GC形成及抗體生成,因此,IL-21是Tfh細(xì)胞分化過(guò)程中的必須因子之一。針對(duì)Tfh分化過(guò)程中的此特點(diǎn),我們希望通過(guò)以Tfh為靶點(diǎn),通過(guò)阻斷IL-21通路抑制體液性排斥反應(yīng),從而保護(hù)達(dá)到移植物的作用。一、Tfh細(xì)胞調(diào)控B細(xì)胞分化的機(jī)制在第一部分中,我們首先通過(guò)提取小鼠脾臟T細(xì)胞并應(yīng)用IL-21對(duì)其進(jìn)行刺激,通過(guò)蛋白印跡檢測(cè),IL-21可以明顯活化T細(xì)胞內(nèi)的STAT3通路,證明IL-21在小鼠脾臟內(nèi)是通過(guò)活化T細(xì)胞內(nèi)STAT3通路提供給T細(xì)胞向Tfh細(xì)胞分化的信號(hào)。進(jìn)一步研究我們希望通過(guò)IL-21R-Fc阻斷IL-21對(duì)T細(xì)胞的刺激作用,因此我們先用IL-21R-Fc對(duì)T細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理,再進(jìn)一步使用IL-21對(duì)其進(jìn)行刺激,結(jié)果表明,在IL-21R-Fc濃度為10ng/ml時(shí)可完全阻斷IL-21對(duì)T細(xì)胞內(nèi)STAT3的激活。進(jìn)一步研究我們通過(guò)小鼠體液性免疫(SRBC免疫)模型,研究使用IL-21R-Fc阻斷IL-21信號(hào)通路后,對(duì)Tfh細(xì)胞分化的影響。在對(duì)不同處理的小鼠使用SRBC免疫后7天,首先對(duì)外周血中成熟B細(xì)胞的比例進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果無(wú)明顯差異,證明IL-21-Fc并未對(duì)B細(xì)胞在骨髓中的分化產(chǎn)生影響;通過(guò)檢測(cè)小鼠脾臟中Tfh細(xì)胞分化結(jié)果顯示,IL-21R-Fc明顯抑制了SRBC免疫后的Tfh細(xì)胞分化;通過(guò)對(duì)脾臟內(nèi)生發(fā)中心的分析顯示,Tfh細(xì)胞分化收到抑制后,生發(fā)中心的形成明顯降低;對(duì)邊緣區(qū)B細(xì)胞及濾泡B細(xì)胞的分析發(fā)現(xiàn),濾泡B細(xì)胞的數(shù)量在IL-21R-Fc處理后大大減少,證明SRBC免疫后的反應(yīng)為特異性體液免疫反應(yīng),且此反應(yīng)收到了抑制;對(duì)外周血中的漿細(xì)胞及抗體量進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),IL-21R-Fc處理后漿細(xì)胞數(shù)量及抗體滴度都大大降低,直接證明了IL-21R-Fc對(duì)體液性免疫反應(yīng)的抑制作用。二、Tfh細(xì)胞調(diào)控體液性排斥反應(yīng)的作用及機(jī)制通過(guò)第一部分的實(shí)驗(yàn),證明了IL-21R-Fc對(duì)Tfh細(xì)胞分化的抑制作用,因此,第二部分的實(shí)驗(yàn)我們使用IL-21R-Fc處理受體小鼠并進(jìn)行心臟異位移植。在小鼠心臟移植后的急性排斥反應(yīng)中,我們通過(guò)受體的血清漿細(xì)胞數(shù)量及抗體滴度的增加、移植物的Ig G及C4d沉積程度增加,證明小鼠心臟移植后的急性排斥反應(yīng)有體液免疫的參加。而通過(guò)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)使用IL-21R-Fc處理后的小鼠移植物生存期延長(zhǎng);移植物的心肌排列相對(duì)較好,心肌細(xì)胞水腫壞死減輕,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯降低,血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹程度較輕,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)降低,證明其組織損傷降低;TUNEL結(jié)果IL-21R-Fc處理使心肌細(xì)胞的凋亡也有所降低;而通過(guò)體液性排斥反應(yīng)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)C4d的檢測(cè)也明確表明IL-21R-Fc處理后的移植物內(nèi)C4d的浸潤(rùn)明顯降低;通過(guò)對(duì)受體外周血的檢測(cè),其血漿內(nèi)漿細(xì)胞數(shù)量及抗體滴度也明顯降低。所有的結(jié)果都證明,IL-21R-Fc對(duì)小鼠心臟移植后的體液排斥反應(yīng)具有抑制作用。進(jìn)一步我們對(duì)移植后受體的脾臟進(jìn)行流式分析發(fā)現(xiàn),IL-21R-Fc處理后小鼠移植后脾臟內(nèi)Tfh細(xì)胞數(shù)量明顯降低,生發(fā)中心的形成也受到了抑制。這與第一部分的結(jié)果相符合,證明了IL-21R-Fc在心臟移植中也可以移植Tfh細(xì)胞的分化。綜上所述,我們首先通過(guò)IL-21刺激小鼠脾臟T細(xì)胞證明了其通過(guò)激活STAT3通路作用,而IL-21R-Fc可以阻斷這種作用;利用小鼠體液免疫模型,我們證明了IL-21R-Fc可以通過(guò)阻斷IL-21通路抑制Tfh的分化,進(jìn)一步抑制了生發(fā)中心的形成,使B細(xì)胞分化成為漿細(xì)胞和記憶性B細(xì)胞的過(guò)程受到抑制,導(dǎo)致了抗體生成減少,從而減輕體液性免疫反應(yīng);進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)我們利用小鼠異位心臟移植急性排斥模型,證明體液免疫參與其中,而IL-21R-Fc可以通過(guò)抑制Tfh的分化進(jìn)一步抑制抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng),為臨床體液性排斥反應(yīng)的治療提供了新思路。
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R392.4

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1 趙自然;;新鮮空氣使干細(xì)胞分化[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2010年03期

2 張玉勤;;細(xì)胞分化再活化治療腫瘤[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);1991年01期

3 David　Tenenbaum,饒新華;細(xì)胞之源[J];世界科學(xué);2000年11期

4 閆貴新;干細(xì)胞研究的重大進(jìn)展[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2000年11期

5 趙志力;付小兵;;正常與異常的細(xì)胞分化[J];感染.炎癥.修復(fù);2001年03期

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9 戴新貴;姚詠明;艾宇航;;輔助性T細(xì)胞17的研究進(jìn)展[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2008年04期

10 ;細(xì)胞分化:一個(gè)兩階段的過(guò)程[J];中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志;2009年02期

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1 徐志彥;;《細(xì)胞分化》教學(xué)案例(教學(xué)內(nèi)容安排1課時(shí))[A];河北省教師教育學(xué)會(huì)第二屆中小學(xué)教師教學(xué)案例展論文集[C];2013年

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3 丁建東;;圖案化表面與干細(xì)胞分化[A];2013年全國(guó)高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會(huì)論文摘要集——大會(huì)邀請(qǐng)報(bào)告[C];2013年

4 陳思;黃欣;陳少華;楊力建;鄭海濤;李揚(yáng)秋;;BCL11B基因在T細(xì)胞分化和增殖中調(diào)節(jié)作用的研究[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)代表大會(huì)及學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2010年

5 江鍵;崔黎麗;宋誠(chéng)榮;王小平;宋茂海;;負(fù)極性駐極體誘導(dǎo)3T3細(xì)胞表面電荷和游離鈣濃度的變化[A];第四屆中國(guó)功能材料及其應(yīng)用學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2001年

6 梁冀;于會(huì)梅;傅繼東;郭昂;楊黃恬;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子釋放受體對(duì)干細(xì)胞分化的調(diào)控[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)受體、腫瘤和免疫專業(yè)委員會(huì)聯(lián)合學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

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8 項(xiàng)盈;金潔;沈丹;鄭強(qiáng);謝純剛;賈冰冰;黃國(guó)平;王金福;;復(fù)蘇的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及向多系細(xì)胞分化的誘導(dǎo)[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

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1 徐榮祥;人類生命細(xì)胞 再生物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)與研究[N];健康報(bào);2007年

2 張佳星;干細(xì)胞分化路徑存在差異性[N];中國(guó)礦業(yè)報(bào);2008年

3 史軍;剝開黏合的細(xì)胞之書[N];健康報(bào);2012年

4 常麗君;美生物學(xué)家打造出“細(xì)胞黑客”[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

5 張佳星;分化之路 殊途同歸[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

6 記者 施嘉奇　通訊員 王姿英;探索中藥對(duì)干細(xì)胞分化的作用[N];文匯報(bào);2009年

7 記者陳超;日開發(fā)細(xì)胞間隔離培養(yǎng)技術(shù)[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

8 陳超;科學(xué)家發(fā)現(xiàn)引發(fā)細(xì)胞分化的分子通道[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

9 記者 白毅;我國(guó)科學(xué)家用iPS細(xì)胞首獲克隆豬[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2013年

10 記者 錢錚;日本用人類iPS細(xì)胞首次制成血小板[N];新華每日電訊;2009年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 唐紹燦;IL-27、Th1及Th17細(xì)胞在MS中的表達(dá)及其作用機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

2 常凱凱;子宮內(nèi)膜異位灶微環(huán)境IL-10~+Th17細(xì)胞的形成及作用機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 高華嵩;細(xì)胞重編程技術(shù)和移植治療視神經(jīng)損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 李艷明;Hsa-miR-200a調(diào)控紅細(xì)胞分化的功能及分子機(jī)制研究[D];中國(guó)科學(xué)院北京基因組研究所;2015年

5 張林;C-反應(yīng)蛋白通過(guò)對(duì)T細(xì)胞分化的直接調(diào)控參與后天免疫應(yīng)答[D];蘭州大學(xué);2015年

6 蔣云秋;樹突狀細(xì)胞Notch信號(hào)在1，25-二羥維生素D3調(diào)節(jié)Th17分化中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

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8 陳博;可注射細(xì)胞微球明膠復(fù)合物聯(lián)合血小板裂解液在牙組織工程中的應(yīng)用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 章麗雅;血紅素加氧酶-1調(diào)抑Th17細(xì)胞在炎癥性腸病中的作用及機(jī)制研究[D];上海交通大學(xué);2013年

10 曹際森;miR-146a調(diào)控Treg細(xì)胞抑制小鼠心臟移植免疫排斥的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

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1 丁佳敏;芪藍(lán)制劑對(duì)人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞的抗增殖和促凋亡作用的機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

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3 周明;As_2O_3聯(lián)合γ分泌酶抑制劑影響肝癌HepG_2細(xì)胞耐藥性的研究[D];石河子大學(xué);2015年

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5 韓青青;Th22細(xì)胞及其效應(yīng)因子IL-22與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及合并間質(zhì)性肺病相關(guān)性的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 張騰飛;吉西他濱與AMD3100聯(lián)合應(yīng)用于膽管癌RBE細(xì)胞株對(duì)CXCR4/CXCL12軸的作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 王們X ;EAAL細(xì)胞聯(lián)合全反式維甲酸對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株A549體內(nèi)外作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 李超楠;兩種典型OPFRs對(duì)PC12細(xì)胞的神經(jīng)毒性及其機(jī)制探究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

9 楊明;促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子1型受體經(jīng)cAMP/PKA信號(hào)通路對(duì)U87MG細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 李廣康;RNAi沉默Rap2B基因?qū)盒赞D(zhuǎn)化BEAS-2B細(xì)胞的作用[D];鄭州大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：1301627