本文關(guān)鍵詞：B3型胸腺瘤與胸腺癌中microRNA-454-3p及其靶基因SYT6的分子病理研究

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【摘要】：胸腺上皮性腫瘤是發(fā)生于前上縱隔的罕見腫瘤,根據(jù)細(xì)胞組成比例不同和上皮形態(tài)差異分為多種亞型。其中,B3型胸腺瘤和胸腺癌惡性程度最高,而且這兩個(gè)腫瘤無(wú)論在組織形態(tài)學(xué),還是生物學(xué)行為上均存在相似性,常導(dǎo)致誤診。MiRNAs是短鏈非編碼RNA,長(zhǎng)度約為22nt。MiRNAs已經(jīng)被提出可作為腫瘤抑制物和癌癥生物學(xué)行為的候選標(biāo)志物。本研究通過(guò)多種實(shí)驗(yàn)方法對(duì)B3型胸腺瘤和胸腺鱗狀細(xì)胞癌病例進(jìn)行回顧性分析,研究這兩者的臨床病理學(xué)特征、診斷、鑒別診斷及其在miRNAs方面的差異和功能。材料和方法(1)收集南京軍區(qū)南京總醫(yī)院、安徽省立醫(yī)院南區(qū)病理科手術(shù)切除的B3型胸腺瘤和胸腺癌病例共59例(30例B3型胸腺瘤和29例胸腺癌),收集完整的臨床病理資料,通過(guò)免疫組織化學(xué)標(biāo)記方法研究MUC1、GLUT1在胸腺上皮性腫瘤的表達(dá)并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。(2)選取胸腺增生組織、B3型胸腺瘤及胸腺癌組織各3例,提取組織總RNA,運(yùn)用miRNA基因芯片法對(duì)各組標(biāo)本進(jìn)行了miRNA表達(dá)譜研究,并對(duì)結(jié)果進(jìn)行GO分析及信號(hào)通路分析。(3)從下調(diào)表達(dá)的miRNA中挑選出感興趣的幾種miRNA采用熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法進(jìn)一步檢測(cè)這三組組織中miRNA的表達(dá)情況。(4)對(duì)B3型胸腺瘤及胸腺癌之間差異表達(dá)明顯的miRNA及其靶基因進(jìn)行熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)。購(gòu)買靶基因相關(guān)的抗體,進(jìn)行免疫組化檢測(cè),進(jìn)一步驗(yàn)證靶基因蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果(1)MUC1和GLUT1在胸腺癌中表達(dá)高于B3型胸腺瘤,差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)B3型胸腺瘤3例及胸腺鱗狀細(xì)胞癌3例進(jìn)行miRNA芯片分析,結(jié)果顯示與B3型胸腺瘤相比,胸腺癌有32個(gè)上調(diào)miRNA和19個(gè)下調(diào)miRNA。(3)選取其中下調(diào)明顯的 miR-192-5p,miR-454-3p 和 miR-148a-3p 進(jìn)行 QRT-PCR驗(yàn)證,結(jié)果顯示miR-454-3p和miR-148a-3p與miRNA芯片表達(dá)譜的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符合。(4)通過(guò)生物信息學(xué)分析研究,胸腺癌中下調(diào)表達(dá)的miR-454-3p和miR-148a-3p具有共同的靶基因SYT6。利用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)方法,顯示miR-454-3p對(duì)SYT6有顯著的抑制作用。免疫組化標(biāo)記顯示SYT6在胸腺鱗狀細(xì)胞癌中陽(yáng)性表達(dá),而在B3型胸腺瘤中陰性。結(jié)論B3型胸腺瘤和胸腺癌組織學(xué)形態(tài)、生物學(xué)行為相近,可通過(guò)免疫組化MUC1、GLUT1輔助鑒別診斷。兩者在微小RNA方面亦存在差異,下調(diào)組miR-454-3p和miR-148a-3p的表達(dá)失調(diào)在胸腺癌中是一個(gè)經(jīng)常性的事件。miR-454-3p明顯抑制調(diào)控靶基因SYT6基因。miR-454-3p是抑癌基因,其靶基因SYT6在胸腺鱗狀細(xì)胞癌中可能為潛在的原癌基因,miR-454-3p和靶基因SYT6通過(guò)促進(jìn)增殖和分化從而在胸腺癌的發(fā)病機(jī)制中具有重要作用,可作為診斷標(biāo)記物和潛在的治療靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R736.3

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1 趙鵬,李湘虎;女性原發(fā)胸腺癌1例[J];中國(guó)冶金工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2001年05期

2 姚U，

本文編號(hào)：1287964