本文關(guān)鍵詞：面神經(jīng)損傷干細(xì)胞移植修復(fù)免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究

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【摘要】：背景與目的:面神經(jīng)(FN,facial nerve)損傷可能由外傷或醫(yī)源性損傷造成,患者的面部形態(tài)及相關(guān)功能發(fā)生改變,目前常采用顯微外科技術(shù)以恢復(fù)面神經(jīng)的連續(xù)性,但功能恢復(fù)不甚滿意。近年來(lái)的研究表明免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)之間存在著相互作用,CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的獲得性免疫反應(yīng)在面神經(jīng)損傷后的面運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元活性維持中起重要作用。同時(shí)大量研究表明,干細(xì)胞在周圍神經(jīng)修復(fù)過(guò)程中具有神經(jīng)保護(hù)和促進(jìn)軸突再生的作用,其免疫調(diào)節(jié)功能成為一個(gè)重要的研究方向。本研究探索了 SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(SDBMSCs)對(duì)面神經(jīng)損傷后CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的獲得性免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)機(jī)制,尤其是對(duì)Th17亞群比例的調(diào)節(jié)作用,以及對(duì)保護(hù)面神經(jīng)核內(nèi)面運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的作用。方法:本研究分為4個(gè)部分,分別為:(1)觀察SDBMSCs在體外傳代培養(yǎng)的形態(tài)、生長(zhǎng)情況,選取適用于面神經(jīng)損傷處局部注射的細(xì)胞;(2)ELISA 法分別測(cè)定 Blank、SDBMSCs、FN、FN+SDBMSCs 組培養(yǎng)72小時(shí)的上清液中TGF-β1、IL-6、HGF、iNOS、PGE2的水平;(3)建立SD大鼠面神經(jīng)損傷/未損傷與SDBMSCs局部注射/PBS局部注射的模型,術(shù)后第9天比較不同實(shí)驗(yàn)組雙側(cè)頸部引流淋巴結(jié)內(nèi)Th17亞群比例;(4)建立SD大鼠面神經(jīng)損傷SDBMSCs局部注射/PBS局部注射的模型,術(shù)后第21天取面神經(jīng)核層面腦干冠狀切片,Tunel凋亡染色比較雙側(cè)面神經(jīng)核內(nèi)面運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的凋亡指數(shù)。結(jié)果:P(passage)3、P4 SDBMSCs均一性強(qiáng),體外增殖能力與傳代能力強(qiáng);SDBMSCs能自主分泌高水平IL-6、HGF、PGE2、iNOS與TGF-β1五種細(xì)胞因子;術(shù)后第9天,未切斷FN組、切斷FN組中注射SDBMSCs側(cè)SDBMSCs(+)的頸部引流淋巴結(jié)Th17亞群比例均低于未注射SDBMSCs側(cè)SDBMSCs(-)的頸部引流淋巴結(jié)Th17亞群比例;雙側(cè)切斷面神經(jīng)干的SD大鼠雙側(cè)面神經(jīng)核在術(shù)后21天均可見明顯的面運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元(FMN,facial motoneuron)凋亡現(xiàn)象,右側(cè)SDBMSCs(+)的凋亡指數(shù)顯著低于左側(cè)SDBMSCs(-)。結(jié)論:P4 SDBMSCs適合用于實(shí)驗(yàn)中局部注射;SDBMSCs具有自主分泌高水平IL-6、HGF、PGE2、iNOS與TGF-β1的能力;在FN損傷部位局部注射SDBMSCs可顯著降低該側(cè)頸部引流淋巴結(jié)內(nèi)Th17亞群的比例,且對(duì)保護(hù)面神經(jīng)核內(nèi)的FMN有較為明顯的作用。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R745.12

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本文編號(hào)：1283610