本文關(guān)鍵詞：多光子顯像技術(shù)在結(jié)直腸病變診斷和內(nèi)鏡治療中的應(yīng)用研究

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【摘要】：背景結(jié)直腸腺瘤和癌的診斷主要通過結(jié)腸鏡檢查對可疑病灶活檢進(jìn)行診斷,活檢可能導(dǎo)致出血;并且對需要后續(xù)內(nèi)鏡治療的結(jié)直腸早期病變,活檢可能造成粘膜下層的纖維化而引起粘連,使后續(xù)的內(nèi)鏡治療易發(fā)生穿孔、腫瘤剝離不完整等并發(fā)癥。為了減少活檢的并發(fā)癥,需要探索一種高效敏感的實(shí)時(shí)在體診斷成像系統(tǒng)。共聚焦內(nèi)鏡是目前較為先進(jìn)的實(shí)時(shí)診斷技術(shù),但它是單光子顯微成像,需外源性熒光物質(zhì),存在光漂白和光毒性的局限性。多光子顯微成像是利用近紅外的飛秒激光進(jìn)行非線性成像,激發(fā)生物體內(nèi)自體熒光物質(zhì),煙酰胺腺嘌呤二核苷酸、黃素腺嘌呤二核苷酸和膠原,產(chǎn)生雙光子激發(fā)熒光效應(yīng)和二次諧波信號進(jìn)行光學(xué)活檢,是細(xì)胞層次上的實(shí)時(shí)無損診斷,不需外源的熒光物質(zhì),成像分辨率高,無光毒性和光漂白小。隨著結(jié)腸鏡的普及和內(nèi)鏡治療技術(shù)的發(fā)展,早期結(jié)直腸癌和癌前病變可進(jìn)行內(nèi)鏡粘膜下剝離術(shù),術(shù)后標(biāo)本需送病理判斷切緣情況,無法實(shí)時(shí)指導(dǎo)內(nèi)鏡治療。多光子顯微成像可有效進(jìn)行實(shí)時(shí)的無損光學(xué)活檢,判斷切緣情況,實(shí)時(shí)指導(dǎo)內(nèi)鏡治療。目的1、建立結(jié)直腸病變的多光子成像診斷標(biāo)準(zhǔn)。2、比較共聚焦內(nèi)鏡和多光子顯微成像在結(jié)直腸良惡性病變診斷的敏感性、特異性及準(zhǔn)確性。3、評估多光子顯微成像實(shí)時(shí)診斷結(jié)直腸早期癌內(nèi)鏡ESD術(shù)后標(biāo)本的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性。方法1、將結(jié)直腸病變活檢的新鮮組織進(jìn)行多光子顯微成像,以HE診斷為金標(biāo)準(zhǔn),將多光子成像圖片與HE圖片進(jìn)行對照,確定多光子顯成像技術(shù)在結(jié)直腸病變中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。2、通過盲法驗(yàn)證,用共聚焦內(nèi)鏡、多光子顯微成像分別對結(jié)直腸腫瘤進(jìn)行診斷,與HE金標(biāo)準(zhǔn)對照,計(jì)算共聚焦內(nèi)鏡、多光子成像在診斷結(jié)直腸腫瘤的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性。3、將早期結(jié)直腸癌內(nèi)鏡ESD術(shù)后標(biāo)本進(jìn)行多光子顯微成像,通過對邊切緣及底切緣的掃描,判斷切緣是否有病變殘留及癌浸潤。再將標(biāo)本進(jìn)行病理檢查,與病理結(jié)果進(jìn)行對照,評估其診斷敏感性、特異性和準(zhǔn)確性。結(jié)果1、研究30例患者,建立了多光子顯微成像的結(jié)直腸腫瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)。正常結(jié)直腸粘膜:(1)正常的組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài);(2)中央可見典型的小凹結(jié)構(gòu),圓形的隱窩開口;(3)覆蓋上皮細(xì)胞和杯狀細(xì)胞規(guī)則排列;(4)細(xì)胞間隙清晰可見;(5)細(xì)胞核清晰可見,形態(tài)大小一致;(6)基底膜完整。結(jié)直腸腺瘤:(1)不規(guī)則的組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài);(2)可見絨毛狀和管狀腺管形態(tài),(3)細(xì)胞排列尚規(guī)則,未見明顯核分裂像;(4)基底膜存在。結(jié)直腸癌:(1)異常排列的組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài);(2)細(xì)胞及細(xì)胞核形態(tài)多形性;(3)細(xì)胞間隙連接消失;(4)基底膜完全消失。2、研究79例患者,共聚焦內(nèi)鏡的敏感性為61.54%(24/39),特異性為67.50%(27/40),準(zhǔn)確性為64.56%(51/79),陽性預(yù)測值為64.86%(24/37),陰性預(yù)測值為64.29%(27/42)。多光子顯微成像的敏感性為89.74%(35/39),特異性為92.5%(37/40),準(zhǔn)確性為=91.14%(72/79),陽預(yù)測值為92.11%(35/38),陰性預(yù)測值為90.24%(37/41)。3、研究50例患者,多光子顯微成像的敏感性為83.33%(5/6),特異性97.73%(43/44),準(zhǔn)確性為96%(48/50),陽性預(yù)測值為83.33%(5/6),陰性預(yù)測值為97.73%(43/44)。結(jié)論1、多光子顯微成像技術(shù)通過激發(fā)結(jié)腸粘膜內(nèi)自體熒光物質(zhì),可實(shí)現(xiàn)對結(jié)直腸病變的“光學(xué)切片”,實(shí)現(xiàn)與HE 一致的診斷。2、多光子顯微成像在診斷結(jié)直腸腺瘤和結(jié)腸癌的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性上明顯優(yōu)于共聚焦內(nèi)鏡。3、多光子顯微成像能有效的實(shí)時(shí)判斷早期結(jié)直腸癌內(nèi)鏡粘膜下剝離術(shù)后標(biāo)本的邊切緣和底切緣是否有腫瘤殘留和浸潤,可指導(dǎo)臨床治療。因此,多光子內(nèi)鏡實(shí)現(xiàn)微型化后是強(qiáng)大的實(shí)時(shí)在體診斷手段。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R735.3

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本文編號：1280587