本文關(guān)鍵詞：艾拉莫德對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者骨代謝作用的研究

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【摘要】：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種以關(guān)節(jié)破壞及關(guān)節(jié)功能障礙為特點(diǎn)的自身免疫性炎性疾病。RA的發(fā)病機(jī)制并未完全明確,但已發(fā)現(xiàn)有多種細(xì)胞、炎性因子以及信號通路參與其中。RA重要的特征之一就是關(guān)節(jié)損害,由骨代謝異常所致。骨代謝的平衡由骨吸收和骨形成控制,而骨吸收和骨形成可以被多種細(xì)胞因子及信號通路所調(diào)節(jié)。核因子κB受體活化因子配體(receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)/核因子κB受體活化因子(receptor activator of nuclear factor-kappa B,RANK)/骨保護(hù)素(osteoprotegerin,OPG)系統(tǒng)以及Wnt信號通路是兩條調(diào)節(jié)RA骨代謝的重要通路。RANKL是腫瘤壞死因子家族的成員,它可以與它的受體RANK結(jié)合,來促進(jìn)破骨細(xì)胞的分化和活化。OPG作為RANKL的誘騙性受體,可以通過阻斷RANKL和RANK的相互作用起到骨保護(hù)作用。RANKL的過表達(dá)和OPG的表達(dá)不足可以促進(jìn)RANKL介導(dǎo)的骨破壞。RA患者血清中RANKL/OPG比例較健康人和骨關(guān)節(jié)炎患者升高,它可以作為預(yù)測未來關(guān)節(jié)破壞進(jìn)展的標(biāo)志物,并且在治療后出現(xiàn)下降。Wnt信號通路也是骨代謝的重要調(diào)節(jié)因素。Wnt信號通路的激活可以促進(jìn)成骨細(xì)胞分化與活化。Dickkopf-1(DKK-1)是Wnt通路的重要的可溶性抑制因子,它可以通過阻斷Wnt信號通路抑制成骨細(xì)胞的活性。DKK-1作為骨量改變和關(guān)節(jié)重塑的調(diào)節(jié)因子,在RA患者血清中水平較健康人升高,并且與炎癥和骨破壞相關(guān),在經(jīng)過生物改善病情抗風(fēng)濕藥(biological disease modifying antirheumatic drugs,bDMARDs)治療后下降。I型膠原羥基端肽(C-telopeptide of type I collagen,CTX-I)和I型膠原氨基端前肽(procollagen type I N-terminal propeptide,PINP)是廣泛應(yīng)用的骨代謝標(biāo)志物。CTX-I是骨破壞的敏感和特異的標(biāo)志物。與之相反,PINP是骨形成的標(biāo)志物。艾拉莫德,一種對RA有治療作用的新型DMARD,可以有效抑制疾病活動,并且對骨代謝表現(xiàn)出積極的保護(hù)作用。目前已有研究表明艾拉莫德可以促進(jìn)成骨細(xì)胞的分化和抑制破骨細(xì)胞分化,并且可以抑制關(guān)節(jié)區(qū)RANKL的表達(dá)。然而,艾拉莫德的具體骨保護(hù)作用機(jī)制尚未完全明確,尤其是對ra患者血清中骨代謝調(diào)節(jié)因子及標(biāo)志物的影響以及對ra患者成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞(fibroblast-likesynoviocytes,fls)在白細(xì)胞介素-1(interleukin-1,il-1)誘導(dǎo)下高表達(dá)的rankl和opg的作用仍有待研究。目的:探討艾拉莫德對ra患者血清中骨代謝調(diào)節(jié)因子(rankl、opg、dkk-1)及標(biāo)志物(ctx-i、pinp)的影響以及對ra患者fls在il-1誘導(dǎo)下高表達(dá)的rankl和opg的作用,進(jìn)一步揭示艾拉莫德在骨代謝中起到的作用,以便更好地指導(dǎo)ra患者的臨床治療。方法:收集67名應(yīng)用艾拉莫德(25mg,每日2次口服)或甲氨蝶呤(methotrexate,mtx,10mg,每周1次口服)或聯(lián)合應(yīng)用艾拉莫德(25mg,每日2次口服)及mtx(10mg,每周1次口服)的ra患者在治療前基線期,治療6個月和治療12個月的臨床資料、實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)、影像學(xué)評分。所有患者符合2010年美國風(fēng)濕病學(xué)會(americancollegeofrheumatology,acr)/歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(europeanleagueagainstrheumatism,eular)制定的分類標(biāo)準(zhǔn)及評分系統(tǒng)。同時收集ra患者血清,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(enzymelinkedimmunosorbentassay,elisa)和電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(electrochemiluminescenceimmunoassay,eclia)檢測血清中rankl、opg、dkk-1、ctx-i、pinp的含量。收集3名行膝關(guān)節(jié)置換術(shù)的ra患者的滑膜組織,分離fls并培養(yǎng)�；颊呔�1987年acr制訂的ra分類標(biāo)準(zhǔn)。fls傳代至4-8代時用于試驗(yàn)。fls在含有10ng/mlil-1β以及分別含有5、10或20μg/ml艾拉莫德,或100nmmtx,或20μg/ml艾拉莫德聯(lián)合100nmmtx的培養(yǎng)體系中孵育48小時,收集細(xì)胞培養(yǎng)上清及fls。用elisa法檢測fls培養(yǎng)上清液中opg含量,實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(quantitativereal-timepolymerasechainreaction,qpcr)和免疫印跡法檢測fls中rankl和opg信使核糖核酸(messengerribonucleicacid,mrna)以及蛋白的表達(dá)。結(jié)果:對治療前后28個關(guān)節(jié)的疾病活動性評分(diseaseactivityscore28,das28)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)三組ra患者在治療6個月及12個月時,與基線期相比,das28均顯著下降(均p0.001)。盡管在治療前基線期三組患者das28水平無差別,在治療6個月時,與艾拉莫德組和mtx組相比,聯(lián)合用藥組das28水平更低(均p0.05),在治療12個月時三組das28水平無明顯差異�；�期所有血清骨代謝調(diào)節(jié)因子和標(biāo)志物在三組ra患者間均無顯著性差異。對rankl來說,在治療6個月和12個月時,三組rankl水平均顯著下降(均p0.01),并且聯(lián)合用藥組在治療6個月時對rankl的抑制作用較其他兩組明顯(均p0.05),在治療12個月時三組間已無差異。rankl/opg比值的變化與rankl的變化趨勢相似。不同的是,雖然在治療12個月時三組rankl/opg比例與基線期相比都出現(xiàn)顯著性下降(均p0.001),但在治療6個月時,只有聯(lián)合用藥組rankl/opg比值顯著下降(p0.001),另兩組rankl/opg比值與基線期相比沒有顯著性差異。血清opg水平和dkk-1水平在三組中均不隨治療而改變。三組血清pinp水平在治療后均有所上升,但只在治療后12個月時差異顯著(分別為艾拉莫德組p0.01,甲氨蝶呤組p0.05,聯(lián)合用藥組p0.001)。對于ctx-i,只有聯(lián)合用藥組在治療6個月及12個月時表現(xiàn)出顯著性下降(分別為p0.05,p0.001),而其他兩組沒有顯著性差異。對das28評分以及血清中骨代謝調(diào)節(jié)因子和標(biāo)志物在治療前后的改變量進(jìn)行相關(guān)性分析,發(fā)現(xiàn)治療6個月時,艾拉莫德組△das28-紅細(xì)胞沉降率(erythrocytesedimentationrate,esr),△das28-c反應(yīng)蛋白(c-reactiveprotein,crp)與△ctx-i呈正相關(guān)(r=0.557,p0.01;r=0.652,p0.01),而△das28-esr與△pinp呈負(fù)相關(guān)(r=-0.443,p0.05)。治療12個月時,聯(lián)合用藥組△das28-esr,△das28-crp與△pinp呈負(fù)相關(guān)(r=-0.433,p0.05;r=-0.554,p0.01)。影像學(xué)評分發(fā)現(xiàn)治療6個月及治療12個月時,三個組ra患者之間影像學(xué)進(jìn)展并不存在差異。il-1β誘導(dǎo)的ra患者的fls培養(yǎng)上清液中opg較未經(jīng)誘導(dǎo)組顯著增高(p0.05),但對艾拉莫德和mtx的作用無顯著反應(yīng)。ra患者的fls經(jīng)過il-1β誘導(dǎo)后,RANKL和OPG的mRNA表達(dá)和RANKL mRNA/OPG mRNA比值均增加(分別為p0.01,p0.01,p0.05)。艾拉莫德和MTX對OPG mRNA的表達(dá)并無顯著作用。對于RANKL mRNA,艾拉莫德和MTX都可以顯著抑制其高表達(dá)(均p0.01)。另外,兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用較單藥應(yīng)用表現(xiàn)出更強(qiáng)大的抑制作用(均p0.05)。RANKL mRNA/OPG mRNA比值與RANKL mRNA表達(dá)的變化趨勢相似,不同的是,對于RANKL mRNA/OPG mRNA比例,聯(lián)合用藥組只與MTX組比較有顯著性差異(p0.05),而與艾拉莫德組之間并無顯著性差異。RA患者的FLS經(jīng)過IL-1β誘導(dǎo)后,細(xì)胞內(nèi)OPG蛋白表達(dá)增高(p0.01),但是對艾拉莫德和MTX的作用無顯著反應(yīng)。MTX與艾拉莫德(10和20μg/m L)均可抑制IL-1β誘導(dǎo)的RANKL高表達(dá)(均p0.01),且艾拉莫德的抑制作用呈現(xiàn)濃度依賴性,20μg/mL的艾拉莫德較5和10μg/m L的艾拉莫德作用更強(qiáng)大(分別p0.01以及p0.05)。另外,兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用較兩種單藥作用表現(xiàn)出對RANKL更強(qiáng)大的抑制作用(MTX p0.01和艾拉莫德p0.05)。觀察RANKL/OPG比例也出現(xiàn)了與RANKL表達(dá)相似的變化趨勢。結(jié)論:1.艾拉莫德可以有效抑制RA的疾病活動,將疾病控制在中、低活動度。2.艾拉莫德可以有效促進(jìn)骨形成,與MTX聯(lián)合作用可以有效抑制骨吸收。RA患者經(jīng)過艾拉莫德治療6個月及12個月后血清中骨代謝調(diào)節(jié)因子RANKL得到抑制,12個月后RANKL/OPG比例下降。同時,艾拉莫德可以濃度依賴性地抑制FLS中RANKL的表達(dá)。艾拉莫德可以通過調(diào)節(jié)RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)以及抑制炎癥實(shí)現(xiàn)骨保護(hù)作用。3.艾拉莫德對血清中骨代謝調(diào)節(jié)因子DKK-1水平無影響,其骨保護(hù)作用并非通過調(diào)節(jié)由DKK-1介導(dǎo)的Wnt信號通路而實(shí)現(xiàn)。4.艾拉莫德對RA的治療作用、對關(guān)節(jié)破壞的保護(hù)作用、對骨代謝調(diào)節(jié)因子和標(biāo)志物的作用與MTX相似,聯(lián)合應(yīng)用艾拉莫德和MTX較單藥應(yīng)用展現(xiàn)出更快及更強(qiáng)的效果。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R593.22

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2 江維;趙毅;林輝;劉毅;陳進(jìn);;艾拉莫德治療原發(fā)性干燥綜合征療效觀察[J];西部醫(yī)學(xué);2014年06期

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5 張?jiān)闯?王峰;王威嚴(yán);于成成;楊清銳;;類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療新藥艾拉莫德[J];世界臨床藥物;2013年02期

6 王青松;黃婷;張燦;平其能;;艾拉莫德兩種晶型的體內(nèi)外比較研究[J];中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年03期

7 張靜;袁玉;李健華;王源園;劉廣余;;艾拉莫德片在中國健康志愿者體內(nèi)的藥動學(xué)[J];中國臨床藥學(xué)雜志;2007年04期

8 宋明俠;;艾拉莫德混懸劑的制備及穩(wěn)定性考察[J];泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年07期

9 郝春芳;劉毅;趙毅;;艾拉莫德在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療中的研究[J];華西醫(yī)學(xué);2013年05期

10 劉曉利;宿俊杰;王文晟;;艾拉莫德對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠系統(tǒng)性炎癥的保護(hù)作用[J];科學(xué)技術(shù)與工程;2014年13期

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1 張玲玲;魏偉;肖峰;徐建華;吳成義;;艾拉莫德治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎Ⅲ期臨床試驗(yàn)[A];第十三次全國臨床藥理學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2012年

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8 魏佩佩;艾拉莫德的合成研究[D];南京理工大學(xué);2009年

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