本文關(guān)鍵詞：瓜子金皂苷己在缺氧缺血性腦損傷新生大鼠心肌損傷中的保護(hù)作用及機(jī)制研究

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【摘要】：HIE是新生兒期的一種嚴(yán)重疾病,中重度病例死亡率高,嚴(yán)重威脅新生兒的生命。缺氧后可引起腦、心臟、腎臟、肝臟及肺等多臟器臟器損傷,其中心肌組織需氧量極高,對(duì)缺氧非常敏感,因此心肌損傷尤為嚴(yán)重。心肌細(xì)胞缺氧再灌注后,心肌損傷進(jìn)一步加重。因此,探索新生兒缺氧缺血性腦損傷后防治心肌損傷的藥物是目前的研究熱點(diǎn)之一。瓜子金為遠(yuǎn)志科遠(yuǎn)志屬植物,是我國(guó)常用的傳統(tǒng)中藥,具有祛痰止咳,寧心安神等功效。PGSF是從瓜子金中提取的齊墩果烷型三萜皂苷。已有研究顯示PGSF對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)具有廣泛的保護(hù)作用,但對(duì)缺氧缺血腦損傷的心肌影響的研究較少。本研究通過(guò)體外建立心肌細(xì)胞缺氧后復(fù)氧損傷模型和新生大鼠HIBD模型,探討PGSF對(duì)HIBD新生大鼠心肌損傷的保護(hù)作用。(1)PGSF對(duì)大鼠心肌細(xì)胞的毒性作用。本實(shí)驗(yàn)利用1-3天清潔級(jí)Sprague-Dawley(SD)乳鼠,原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞。利用抗α-actin免疫熒光法鑒定心肌細(xì)胞。檢測(cè)PGSF是否對(duì)原代心肌細(xì)胞和H9C2細(xì)胞有毒性作用。PGSF(0.1μM、1μM、10μM、100μM、1000μM)給藥處理后,觀察心肌細(xì)胞的形態(tài),檢測(cè)細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡率、丙二醛(MDA)和乳酸脫氫酶(LDH)活性。結(jié)果如下:1)PGSF對(duì)原代心肌細(xì)胞和H9C2細(xì)胞形態(tài)沒(méi)有明顯影響。2)PGSF對(duì)原代心肌細(xì)胞和H9C2細(xì)胞的細(xì)胞活性沒(méi)有明顯的毒性作用。3)PGSF(0.1μM、1μM、10μM、100μM)沒(méi)有引起原代心肌細(xì)胞明顯的細(xì)胞凋亡,1000μM時(shí)有少量凋亡;設(shè)置濃度范圍內(nèi)H9C2細(xì)胞無(wú)明顯凋亡。4)PGSF對(duì)原代心肌細(xì)胞和H9C2細(xì)胞的LDH和MDA水平?jīng)]有明顯的影響。本部分實(shí)驗(yàn)證明了PGSF對(duì)原代心肌細(xì)胞和H9C2細(xì)胞沒(méi)有明顯的毒性作用,可以用于心肌保護(hù)作用的研究。(2)PGSF對(duì)缺氧大鼠心肌細(xì)胞的保護(hù)作用體外建立原代心肌細(xì)胞和H9C2心肌細(xì)胞缺氧后復(fù)氧細(xì)胞模型,給予PGSF(1μg/m L、10μg/m L、100μg/m L),觀察PGSF對(duì)缺氧后復(fù)氧心肌細(xì)胞形態(tài)的影響,檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞凋亡率、MDA、LDH、活性氧自由基(ROS)、Bcl-2和Bax m RNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果如下:1)PGSF可增加心肌細(xì)胞存活率、改善損傷細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變、減少LDH的釋放,減輕缺氧后復(fù)氧心肌細(xì)胞損傷。2)PGSF可降低心肌細(xì)胞內(nèi)MDA含量和ROS的生成量,增強(qiáng)缺氧后復(fù)氧心肌細(xì)胞抗氧化能力。3)PGSF可降低心肌細(xì)胞的凋亡率、增加Bcl-2蛋白的表達(dá)、增加Bcl-2/Bax的值,增強(qiáng)缺氧后復(fù)氧心肌細(xì)胞抗凋亡能力。(3)PGSF對(duì)HIBD新生大鼠心肌損傷的保護(hù)作用本實(shí)驗(yàn)通過(guò)Rice法建立新生大鼠HIBD模型。在模型制備后腹腔注射PGSF 5mg/kg、10mg/kg、50mg/kg,以及1,6-二磷酸果糖(FDP)25 mg/kg。檢測(cè)應(yīng)用PGSF后HIBD新生大鼠體重,TTC染色檢測(cè)腦梗死面積和心肌梗死面積,Tunel法檢測(cè)腦細(xì)胞和心肌細(xì)胞凋亡,HE染色觀察腦組織細(xì)胞和心肌細(xì)胞形態(tài),檢測(cè)肌酸激酶同工酶(CK-Mb)活性、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性評(píng)估PGSF對(duì)心肌損傷的影響,檢測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和堿性磷酸酶(ALP)的活性評(píng)價(jià)PGSF對(duì)肝功能的作用,檢測(cè)血清中肌酐(Cr)和尿素氮(Bun)的含量評(píng)價(jià)PGSF對(duì)腎功能的作用,檢測(cè)血清中MDA、超氧化物歧化酶(SOD)、ROS水平,利用RT-PCR及Western Blot法檢測(cè)PGSF對(duì)HIBD新生大鼠Bcl-2和Bax m RNA及其蛋白表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:(1)PGSF可減少腦梗死面積及腦細(xì)胞凋亡率,減輕腦缺氧缺血引起的腦損傷;(2)PGSF可減少心肌梗死面積及心肌細(xì)胞凋亡率,降低血清中CK-Mb的水平,減輕腦缺氧缺血引起的心肌損傷;(3)PGSF可降低血清中AST、ALT和ALP的水平,減輕腦缺氧缺血引起的肝臟損傷;(4)PGSF可降低血清中Cr和Bun的水平,減輕腦缺氧缺血引起的腎臟損傷;(5)PGSF可增加SOD的活性,降低MDA和ROS的含量,增強(qiáng)心肌抗氧化能力;(6)PGSF可增加Bcl-2m RNA表達(dá)量以及Bcl-2/Bax蛋白比值,減少細(xì)胞凋亡,增強(qiáng)心肌抗凋亡能力。本研究首次在細(xì)胞水平和動(dòng)物水平上,證實(shí)了PGSF對(duì)HIBD新生大鼠心肌損傷具有保護(hù)作用,為臨床應(yīng)用PGSF治療HIBD后心肌損傷奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R722.1

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1 ;某些因素對(duì)大鼠胃肌電的影響[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2001年S1期

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3 陳偉強(qiáng);趙善廣;;自制注射用大鼠固定裝置[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);1992年04期

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7 戴英,陸群;復(fù)方H_(505)對(duì)Wistar大鼠外周血的血液流變學(xué)指標(biāo)的影響[J];中國(guó)血液流變學(xué)雜志;2001年01期

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2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;，

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