發(fā)布時(shí)間：2017-12-06 16:38

  本文關(guān)鍵詞：白紋伊蚊感染寨卡病毒和登革病毒的媒介能力研究

  更多相關(guān)文章： 寨卡病毒 登革病毒-2 白紋伊蚊 埃及伊蚊 致倦庫蚊 媒介能力

【摘要】：背景:寨卡病毒(zikavirus,ZIKV)和登革病毒(dengue virus,DENV)是近年來流行較廣的蚊媒病毒,可致小頭癥、格林-巴利綜合征、登革出血熱和登革休克綜合征等嚴(yán)重危害。了解中國能傳播ZIKV的蚊媒,明確溫度對(duì)白紋伊蚊傳播DENV-2的媒介能力的影響,對(duì)蚊媒疾病的防控具有指導(dǎo)意義。目的:建立ZIKV和DENV-2感染的細(xì)胞和蚊蟲模型,明確中國埃及伊蚊、白紋伊蚊和致倦庫蚊感染ZIKV的媒介能力;對(duì)比不同溫度下白紋伊蚊感染DENV-2的媒介能力差異。方法:qRT-PCR對(duì)比Vero、C6/36、Aag2細(xì)胞和乳鼠富集ZIKV的效果;間接免疫熒光確定ZIKV的位置;病毒全細(xì)胞懸液、上清液和細(xì)胞裂解后的上清液分別與羊血混合喂食白紋伊蚊,確定ZIKV的收集方式;根據(jù)最佳條件感染白紋伊蚊,RT-PCR和qRT-PCR檢測蚊蟲感染ZIKV情況。埃及伊蚊、白紋伊蚊和致倦庫蚊感染ZIKV,于感染后0d、4d、7d、10d和14d檢測整只蚊蟲的ZIKV感染情況和病毒量,另外感染一批蚊蟲,于上述各時(shí)間點(diǎn)解剖蚊蟲中腸、頭、唾液腺和卵巢,檢測各組織的感染情況和病毒量。C6/36細(xì)胞感染DENV-2,觀察細(xì)胞病變效應(yīng);RT-PCR、TCIDso和間接免疫熒光檢測DENV-2及其滴度;新鮮的病毒上清液與羊血混合喂食白紋伊蚊,RT-PCR檢測蚊蟲攜帶DENV-2的情況。吸食DENV-2血餐的白紋伊蚊置于18℃、23℃、28℃和32℃飼養(yǎng),于感染后Od、5d、10d和15d檢測白紋伊蚊中腸、卵巢和唾液腺的DENV-2和病毒量;免疫組化觀察32℃、15 d的蚊蟲中腸和唾液腺。結(jié)果:C6/36細(xì)胞感染ZIKV于28℃、5d的病毒滴度最高;全細(xì)胞病毒懸液與羊血混合喂食白紋伊蚊效果最佳;白紋伊蚊感染ZIKV的陽性率為27.27%～30.77%,且病毒滴度逐漸增高。埃及伊蚊和白紋伊蚊在感染后各時(shí)間點(diǎn)保持較高的感染率且病毒滴度逐漸升高,致倦庫蚊僅在4 d和7 d檢測到少量的感染和極低的病毒量,7 d后未檢測到感染;ZIKV在感染后4 d可在埃及伊蚊唾液腺檢測到病毒,在白紋伊蚊則需要10d。C6/36細(xì)胞感染DENV-2置于37℃,2d則出現(xiàn)空泡化,RT-PCR、TCID50和間接免疫熒光證實(shí)細(xì)胞感染成功;喂食白紋伊蚊,有不同程度的蚊蟲感染DENV-2。18℃,DENV-2僅在中腸內(nèi)緩慢增殖,不能播散至唾液腺。18℃～32℃,隨著溫度的升高,其播散至卵巢和唾液腺的時(shí)間越短,23℃和28℃需要10d,而32℃,5d侵入唾液腺。免疫組化可觀察到中腸和唾液腺內(nèi)的病毒抗原。結(jié)論:C6/36細(xì)胞為富集ZIKV和DENV-2的理想細(xì)胞,兩種病毒均能成功感染白紋伊蚊。中國分布的埃及伊蚊和白紋伊蚊可傳播ZIKV,而致倦庫蚊不能作為ZIKV的傳播媒介。白紋伊蚊的媒介能力較埃及伊蚊差,但其在中國廣泛分布,白紋伊蚊可能成為中國傳播ZIKV的主要媒介。溫度是影響白紋伊蚊感染DENV-2媒介能力的重要因素,18℃～32℃,溫度越高,病毒在白紋伊蚊增殖越快,其播散至卵巢和唾液腺的時(shí)間越短。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R384.1

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