本文關(guān)鍵詞：小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物的篩選及臨床應(yīng)用研究

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【摘要】：1研究背景與研究目的神經(jīng)母細胞瘤(Neuroblastoma,NB)是兒童顱腦外最常見惡性實體腫瘤,占所有小兒腫瘤8%~10%,該病具有早期臨床癥狀不明顯,發(fā)病部位隱匿,腫瘤生長迅速,惡性程度高,早期轉(zhuǎn)移等特點,容易漏診、誤診和延誤治療。目前,NB的早期診斷方法仍以彩色多普勒超聲、CT和MRI為主,切除程度的判斷及復(fù)發(fā)瘤的檢測仍缺乏特異性的方法,早期根治性手術(shù)切除配合術(shù)后放化療等綜合治療,效果及預(yù)后基本令人滿意,但進入Ⅲ期或IV期之后,NB的生存率明顯降低,且復(fù)發(fā)率高�；贜B的早期診斷、早期治療的重要性,臨床急需一個敏感度高、準(zhǔn)確性強的診斷和監(jiān)測的方法。蛋白質(zhì)組學(xué)已被廣泛的應(yīng)用于腫瘤的研究,特別是腫瘤特異性的蛋白標(biāo)記物的不斷發(fā)現(xiàn),大大提高了惡性腫瘤的早期診斷和早期治療水平,同時為腫瘤的治療提供研究方向。本課題組曾與中國科學(xué)院生物物理研究所、浙江大學(xué)腫瘤研究所聯(lián)合應(yīng)用蛋白質(zhì)質(zhì)譜技術(shù)檢測腎母細胞瘤、乳腺癌、胃癌等惡性腫瘤的血清,篩選并鑒定出特異性蛋白質(zhì)標(biāo)記物,現(xiàn)已成功的在體外人工合成腎母細胞瘤特異性蛋白質(zhì)多肽,在動物體內(nèi)外實驗階段取得滿意的療效,有待應(yīng)用于臨床治療。本課題以前期技術(shù)路線為基礎(chǔ),通過對正常組、腫瘤組血清的檢測,篩選出特異性的蛋白質(zhì)標(biāo)記物,對不同分期患兒進行詳細分組,再次驗證并統(tǒng)計分析,初步建立分期診斷模型,結(jié)合隨訪及手術(shù)結(jié)果,將篩選出的蛋白質(zhì)標(biāo)記物應(yīng)用于復(fù)發(fā)瘤的預(yù)測及手術(shù)切除程度的判斷,最后通過定量分析并與臨床常用檢查方法對比,明確其臨床應(yīng)用的敏感性及特異性。2材料與方法2.1實驗材料2.1.1臨床病例資料本課題研究選取的血清樣本365例均來自河南省鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院,采集時間2008年1月至2013年12月。分為正常對照組、術(shù)前組(根據(jù)INSS分期:I期,II期,Ⅲ期,IV期)、復(fù)發(fā)組、長期存活組、姑息性切除組、根治性切除組。該實驗神經(jīng)母細胞瘤患兒病理診斷結(jié)果均為:神經(jīng)母細胞瘤(NB),所有病理樣本均經(jīng)穿刺活檢或手術(shù)切除后取得,均送我院病理科按照統(tǒng)一的流程進行檢查,所有病理診斷結(jié)果均得到我院兩位以上的病理學(xué)專家的驗證。抽血取樣條件:晨起6點,所有神經(jīng)母細胞瘤患兒及健康小兒均在空腹?fàn)顟B(tài)下抽血,留取外周靜脈血5ml,室溫靜置1小時,后轉(zhuǎn)至離心機處理,在4℃低溫環(huán)境下離心20分鐘,轉(zhuǎn)速:3000 r/min,離心力:3000×g,抽取標(biāo)本的上清液,以每管100ul進行分裝,分裝完畢后放入;低溫冰箱儲存,冰箱溫度條件:-80℃。本實驗均得到受試者監(jiān)護人的知情同意,并通過倫理委員會的批準(zhǔn)。2.1.2主要儀器與試劑尿素(Urea)、DTT(DL-Dithiothreitol,1,4—二硫代蘇糖醇)、IAM(Iodoacetamide,碘乙酰胺)、CHAPS(3-環(huán)乙胺-1-丙磺酸)、SPA(sinapic acid,芥子酸)、TFA(Trifluoro-Acetic Acid,三氟乙酸)、超純水(HPLC grade)和乙腈(Acetonitrile,CAN)購自Sigma公司,產(chǎn)地:美國;Spectra Multicolor Low Range Protein Ladder購自Thermo公司,產(chǎn)地:美國;Trypsin購自Promega公司,產(chǎn)地:美國;Profiling Kit 100 MB-WCX購自Bruker Inc公司,產(chǎn)地:德國。Protein Chip、WCX2 Protein Chip、PBS II+SELDI-TOF-MS和Bio-processor購自Ciphergen Biosystems公司,產(chǎn)地:美國;MALDI-TOF-MS購自Bruker公司,產(chǎn)地:德國;High performance liquid chromatography購自Shimadzu公司,產(chǎn)地:日本;2D-LC-LTQ-MS購自Thermo Electron公司,產(chǎn)地:美國;ZUCIPDAS來自浙江大學(xué),產(chǎn)地:中國。2.2實驗方法2.2.1小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物的篩選及其臨床應(yīng)用的構(gòu)建已經(jīng)留取的血清樣本在冰浴中解凍30分鐘至60分鐘,完成解凍后使用4℃低溫離心機進行離心5分鐘,離心力為:12000×g,離心出來的上清液留取備用。5μL血清樣本、10μL MB-WCX Magnetic Beads、10μL MB-WCX Binding Buffer依次加入Eppendorf管中,充分振蕩,植入磁珠分離器中,后加入MB-WCX Wash Buffer 100μL,MB-WCX Elution Buffer 5μL加入裝有磁珠的Eppendorf管中,反復(fù)吹打,MB-WCX Stabilization Bu ffer 5μL加入待測管中,再次吹打,備用。芯片的預(yù)處理。添加稀釋液U9(1%DTT、9mol/L尿素、2%CHAPS),混合并搖勻,加入弱陽離子交換芯片的孔中,96個樣本可以通過弱陽離子交換芯片WCX2Protein Chip一次性得到檢測,WCX2 Protein Chip插入Bio-processor工作支架中,仔細記錄芯片的詳細結(jié)果。應(yīng)用SELDI-TOF-MS儀器檢測上述結(jié)果,篩選差異性血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物。整理并導(dǎo)出SELDI-TOF-MS實驗檢測數(shù)據(jù),去除無效數(shù)據(jù),分子質(zhì)量與相對表達量的標(biāo)準(zhǔn)要統(tǒng)一,完整提取各個樣本中蛋白質(zhì)分子質(zhì)量和相對表達量準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。SELDI-TOF-MS提取的數(shù)據(jù)經(jīng)過ZUCIPDAS技術(shù)分析(浙江大學(xué)),排除并嚴(yán)格處理技術(shù)上的干擾,挑選出m/z差異小于0.3%的數(shù)據(jù),并將其歸為一類。Wilcoxon秩和檢驗對初篩的數(shù)據(jù)進行進一步處理分析初篩及不同組別的處理數(shù)據(jù),提取m/z相同、m/z對應(yīng)的峰值不同的數(shù)據(jù),為差異性蛋白質(zhì),通過SVM篩選處理,得到組合模型,youden指數(shù)最高。質(zhì)譜數(shù)據(jù)過濾噪音,聚類分析,使用SPSS17.0對m/z峰做Wilcoxon秩和檢驗,不同組別質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行獨立樣本t檢驗。再經(jīng)過SVM篩選出youden指數(shù)最高的組合模型,得出小兒神經(jīng)母細胞瘤特異性血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物,統(tǒng)計學(xué)分析不同分期血清樣本的蛋白質(zhì)標(biāo)記物,得出相應(yīng)的表達強度數(shù)據(jù)。統(tǒng)計學(xué)分析復(fù)發(fā)組、長期存活組、根治性切除組、姑息性切除組患兒血清中具有差異表達的血清學(xué)標(biāo)記物,得出不同組別患兒蛋白質(zhì)標(biāo)記物的表達強度。2.2.2小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物的純化與鑒定應(yīng)用HPLC分離純化樣本中目標(biāo)蛋白質(zhì),分離純化對象根據(jù)SELDI-TOF-MS篩選結(jié)果,從中選取目標(biāo)蛋白質(zhì)表達量較高的腫瘤組術(shù)前血清樣本。冰水浴解凍自-80℃冰箱取出的血清樣本,抽取100μl血清樣本。600μl ACN和300μl超純水加入100μl血清樣本中,吹打、離心,SPD Speed Vac真空冷卻離心濃縮系統(tǒng)將上清液凍干,高效液相色譜儀中沖洗C18色譜柱對上述血清樣品進行分離純化,HPLC圖上峰值中的蛋白質(zhì)應(yīng)用EP管收集,使用MALDI-TOF-MS對蛋白質(zhì)樣品進行質(zhì)荷比的檢測,找出質(zhì)荷比與5920Da相近的的蛋白質(zhì)所在的樣本(大約存在0.03%的誤差)。酶解目標(biāo)蛋白質(zhì)。串聯(lián)2D-LC-LTQ-MS系統(tǒng)的噴霧系統(tǒng)與加樣后的洗脫柱,進行肽質(zhì)荷比圖譜的檢測,得到目標(biāo)蛋白。應(yīng)用SEQUEST程序數(shù)據(jù)檢索目標(biāo)蛋白質(zhì),搜索Bioworks數(shù)據(jù)庫,檢索出可能與所得的肽段及氨基酸相匹配的蛋白質(zhì)。2.2.3小兒神經(jīng)母細胞瘤血清特異性標(biāo)記物的驗證及敏感性/特異性分析ELISA方法對目標(biāo)蛋白質(zhì)(Class APO C-Ⅲ)進行定量分析。配備APO C-Ⅲ凍干標(biāo)準(zhǔn)品,濃度每2倍遞增。加樣器校準(zhǔn)后,取100μl各濃度樣本,吸頭垂直滴加入96孔板,抗APO C-Ⅲ抗體提前預(yù)包被,同時設(shè)置3個復(fù)孔。每組各取10個血清樣本,取100μl各濃度樣本,吸頭垂直滴加入96孔板,板塊整個用封板模封閉,溫箱控制嚴(yán)格按照說明書,酶標(biāo)板孵育。各孔液體吸去后,抗人APO C-Ⅲ抗體用生物素標(biāo)記,取100μl注入小孔,應(yīng)用酶標(biāo)板進行孵育;應(yīng)用自來水和清洗劑注滿孔板,清洗玻璃板、電泳槽及相關(guān)附件,在吸水紙上拍干孔內(nèi)的液體,后使用通風(fēng)櫥,自然狀態(tài)下晾干�？装甯骺壮浞至栏珊蠹尤階BC工作液,酶標(biāo)板孵育;超純水再次洗板,自然狀態(tài)下晾干,90μl TMB顯色液加入每孔中,酶標(biāo)板孵育后,注入100μl TMB終止液。將酶標(biāo)儀調(diào)整到450nm,顯色終止15min內(nèi)讀出各孔吸光值,繪制標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后計算出樣品的濃度。ELISA方法對目標(biāo)蛋白質(zhì)(Class APO C-Ⅲ)進行定量分析的結(jié)果與臨床常用診斷方法進行對比,以病理學(xué)檢查結(jié)果作為判斷的金標(biāo)準(zhǔn),以驗證Class APO C-Ⅲ診斷模型的敏感性及特異性。3結(jié)果3.1小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白標(biāo)記物的篩選標(biāo)準(zhǔn)化處理并分析腫瘤組和正常組質(zhì)譜數(shù)據(jù),提取蛋白質(zhì)表達的峰值數(shù)據(jù)及蛋白質(zhì)分解的肽段峰值數(shù)據(jù)信息。Wilcoxon秩和檢驗對蛋白質(zhì)峰值數(shù)據(jù)進行處理(P0.01),通過數(shù)據(jù)分析及統(tǒng)計,得到蛋白質(zhì)各自表達的m/z及其峰值;對比兩種數(shù)據(jù)并進行t檢驗(α=0.01),針對上述兩組數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析得出:神經(jīng)母細胞瘤患兒血清高表達的蛋白質(zhì)峰值有6個,神經(jīng)母細胞瘤患兒血清低表達的蛋白質(zhì)峰值有1個,通過SVM篩選處理,得到組合模型,youden指數(shù)最高,結(jié)果為:m/z 5920Da的蛋白標(biāo)記物。該標(biāo)記物在正常對照組中低表達,表達強度為132.87±93.41;在腫瘤組中高表達,表達強度為760.42±414.25。兩組數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.01。3.2小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物M/Z 5920Da對腫瘤分期的判斷統(tǒng)計學(xué)分析質(zhì)荷比為5920的蛋白質(zhì)或肽段,得出其在各腫瘤分期中的表達差異。根據(jù)INSS分期分類得出I期、II期、Ⅲ期、IV期表達強度分別為422.58±120.81,663.37±219.40,930.64±278.69,1229.59±338.85,同時對正常組、NB-I期組、NB II期組、NB-Ⅲ期組和NB-IV期組分別進行統(tǒng)計學(xué)分析,任意兩組數(shù)據(jù)之間差異均有統(tǒng)計學(xué)差異,P0.01。3.3小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物M/Z 5920Da對復(fù)發(fā)瘤預(yù)測及判斷對m/z 5920Da蛋白質(zhì)標(biāo)記物在正常對照組、術(shù)前組、復(fù)發(fā)組、長期存活組中的m/z 5920Da血清學(xué)標(biāo)記物進行統(tǒng)計學(xué)分析,該蛋白質(zhì)標(biāo)記物在術(shù)前腫瘤組、復(fù)發(fā)腫瘤組中呈現(xiàn)高表達,表達強度分別為1125.00±577.57,1325.61±471.70;在正常對照組、長期存活組中低表達,表達強度分別為178.98±129.82,225.16±165.08;m/z 5920 Da蛋白標(biāo)記物在術(shù)后復(fù)發(fā)組的表達與術(shù)前組對比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與正常對照組對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);m/z 5920Da蛋白標(biāo)記物在術(shù)后長期存活組的表達與正常組對比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與術(shù)前組對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。3.4小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物M/Z 5920Da對手術(shù)切除程度判斷對m/z 5920Da蛋白質(zhì)標(biāo)記物在不同手術(shù)切除程度組中的差異進行對比分析,表達強度如下:正常對照組為178.98±129.82、術(shù)前組為1125.00±577.57、姑息性切除組為1054.02±417.01、根治性切除組為625.44±338.57;m/z 5920Da蛋白標(biāo)記物在姑息性切除組的表達與術(shù)前組對比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與正常對照組對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);m/z 5920Da蛋白標(biāo)記物在根治性切除組的表達與正常組對比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),與術(shù)前組對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。3.5小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物的純化及鑒定目標(biāo)蛋白質(zhì)應(yīng)用應(yīng)用HPLC技術(shù)進行分離純化,HPLC圖上峰值中的蛋白質(zhì)應(yīng)用EP管收集,進行MALDI-TOF-MS檢測,找出質(zhì)荷比為5920Da蛋白質(zhì)或肽段樣品。酶解質(zhì)荷比為5920 Da的蛋白質(zhì)或肽段,置入2D-LC-LTQ-MS系統(tǒng)檢測,獲得PMFs,進一步檢測分析獲得酶解蛋白質(zhì)片段氨基酸序列,導(dǎo)入SEQUEST程序,應(yīng)用Bioworks數(shù)據(jù)庫檢索,匹配并獲得完整的氨基酸序列圖。質(zhì)荷比為5920Da的蛋白質(zhì)或肽段其序列為:KDALSSVQESQVAQQARGWVTDGFSSLKD YWSTVKDKFSEFWDLDPEVRPAS此肽段為類APO C-Ⅲ。3.6小兒神經(jīng)母細胞瘤術(shù)前血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物驗證本階段實驗用ELISA方法檢測小兒神經(jīng)母細胞瘤不同分期類APO C-Ⅲ的含量,經(jīng)過統(tǒng)計及數(shù)據(jù)分析,結(jié)果提示隨著分期的上升,類APO C-Ⅲ的含量依次升高,正常組、I期、II期、Ⅲ期、IV期中類APO C-Ⅲ的表達量分別為545.55±176.09 pg/mL,873.55±212.59 pg/mL,1691.64±837.04 pg/mL,3155.64±495.86pg/mL,4633.91±504.01 pg/mL,各分期與正常組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。本階段實驗應(yīng)用ELISA方法對正常對照組、術(shù)前組、復(fù)發(fā)組、長期存活組類APO C-Ⅲ的表達量進行定量分析,表達量分別為545.55±176.09 pg/mL,3037.33±1448.09 pg/mL,4428.09±1255.57 pg/mL,545.91±289.26 pg/mL。復(fù)發(fā)組與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),長期存活組與術(shù)前組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。本階段實驗應(yīng)用ELISA方法對正常對照組、術(shù)前組、姑息性手術(shù)切除組、根治性手術(shù)切除組類APO C-Ⅲ的表達量進行定量分析,表達量分別為545.55±176.09 pg/mL,3037.33±1448.09 pg/mL,3166.18±958.38 pg/mL,1814.64±571.74 pg/mL。姑息性手術(shù)切除組與正常組通過統(tǒng)計學(xué)分析,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),根治性手術(shù)切除組與術(shù)前組通過統(tǒng)計學(xué)分析,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。3.7小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物的敏感性/特異性驗證本階段實驗以ELISA方法對樣本進行類APO C-Ⅲ定量分析,以該結(jié)果為臨床診斷模型,與臨床常用的輔助檢查手段進行對比,如:64層CT平掃+增強、3.0MRI,以病理學(xué)檢查結(jié)果作為判斷的金標(biāo)準(zhǔn),以驗證類APO C-Ⅲ診斷模型的敏感性及特異性,該部分實驗對象均為盲選患兒,與正常健康兒童比較,類APO C-Ⅲ診斷模型的敏感性為96.0%,特異性100%,與常見小兒腹部實體腫瘤比較,類APO C-Ⅲ診斷模型的敏感性為96.0%,特異性88.0%。4結(jié)論目標(biāo)蛋白質(zhì)m/z 5920Da可以作為小兒神經(jīng)母細胞瘤的特異性血清生物學(xué)標(biāo)記物,對臨床懷疑神經(jīng)母細胞瘤,可以對該蛋白質(zhì)標(biāo)記物進行檢測。目標(biāo)蛋白質(zhì)m/z 5920Da可以作為小兒神經(jīng)母細胞瘤的分期診斷的血清生物學(xué)標(biāo)記物,對復(fù)發(fā)瘤的預(yù)警及手術(shù)切除程度的判斷有重要的指導(dǎo)意義。通過對目標(biāo)蛋白質(zhì)或肽段的統(tǒng)計分析及鑒定,質(zhì)荷比為5920Da的蛋白質(zhì)或肽段初步確定為類APO C-Ⅲ。類APO C-Ⅲ在小兒神經(jīng)母細胞瘤早期診斷的敏感性較其它常用影像學(xué)診斷方法具有明顯的優(yōu)勢。類APO C-Ⅲ在小兒神經(jīng)母細胞瘤與常見小兒腹部實體腫瘤鑒別的特異性較好,提示APO C-Ⅲ可能存在于多種小兒實體腫瘤中。后期研究中,須進一步擴大樣本量,與其他腫瘤進行對比,以明確其特異性。同時,進一步探索類APO C-Ⅲ與NB發(fā)生發(fā)展的相互關(guān)系,從而明確類APO C-Ⅲ在NB發(fā)病機制中的關(guān)鍵作用。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R739.4

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8 王新紅;;小兒神經(jīng)母細胞瘤誤診13例探討[A];中華醫(yī)學(xué)會第三次全國兒科基層醫(yī)師學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2007年

9 楊昆;李強;趙亞寧;;小兒神經(jīng)母細胞瘤51例臨床分析[A];第八屆全國兒童腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

10 金惠明;;有脊髓壓迫的嬰幼兒神經(jīng)母細胞瘤治療的挑戰(zhàn)與困惑[A];第八屆全國兒童腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 孟剛;早期診斷神經(jīng)母細胞瘤至關(guān)重要[N];中國消費者報;2007年

2 葛素紅;我國首次完成——神經(jīng)母細胞瘤細胞原代培養(yǎng)[N];中國醫(yī)藥報;2002年

3 姚春雨 錢勇;解放軍總醫(yī)院開辟神經(jīng)母細胞瘤治療新途徑[N];中國醫(yī)藥報;2002年

4 介生;血管生成抑制劑的表達可抑制神經(jīng)母細胞瘤生長[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2001年

5 風(fēng)信;補充足夠維生素子女少患癌[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

6 天津市腫瘤醫(yī)院兒童腫瘤科主任 閆杰李運紅 胡顏整理;兒童惡性實體腫瘤有五最[N];健康報;2009年

7 王保健;父母不可忽視兒童腫瘤[N];人民日報海外版;2001年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 秦攀;小兒神經(jīng)母細胞瘤血清蛋白質(zhì)標(biāo)記物的篩選及臨床應(yīng)用研究[D];鄭州大學(xué);2017年

2 吳凱;miR-483-3p對人神經(jīng)母細胞瘤增殖、凋亡、侵襲及遷移的影響及作用機制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

3 田培超;靶向MYCN干擾穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建及聯(lián)合TAE684對神經(jīng)母細胞瘤生物學(xué)行為的影響[D];鄭州大學(xué);2014年

4 支運來;NF-κB信號通路介導(dǎo)的神經(jīng)母細胞瘤增殖及侵襲、轉(zhuǎn)移的實驗研究[D];青島大學(xué);2015年

5 李建華;靶向DDX1基因敲減穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建及其對神經(jīng)母細胞瘤生物學(xué)行為的影響[D];鄭州大學(xué);2016年

6 趙翔;轉(zhuǎn)錄因子CTCF與長鏈非編碼RNA MYCNOS協(xié)同促進神經(jīng)母細胞瘤中MYCN表達的機制研究[D];華中科技大學(xué);2016年

7 張敦科;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣穩(wěn)定蛋白CHERP對神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖與凋亡的調(diào)控研究[D];西南大學(xué);2017年

8 張焯榮;遺傳變異與神經(jīng)母細胞瘤易感性、預(yù)后關(guān)系的分子流行病學(xué)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2017年

9 于芳;應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選神經(jīng)母細胞瘤自行消退相關(guān)蛋白[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2010年

10 鄭繼翠;環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對神經(jīng)母細胞瘤生長的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉娜;神經(jīng)母細胞瘤36例臨床分析[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

2 高喜偉;神經(jīng)母細胞瘤38例臨床分析[D];鄭州大學(xué);2012年

3 王朝林;神經(jīng)母細胞瘤中DKK3基因啟動子甲基化及其表達失活的研究[D];鄭州大學(xué);2015年

4 沈玉平;GRP78蛋白的表達與神經(jīng)母細胞瘤生物學(xué)行為相關(guān)性分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

5 李永春;“氣一元論”論治神經(jīng)母細胞瘤的理論探討及療效觀察[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

6 魏嬋娟;ALK、ROS1蛋白在神經(jīng)母細胞瘤中的表達及臨床意義[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

7 楊婷;156例神經(jīng)母細胞瘤的臨床回顧性分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

8 李吉馥;組蛋白賴氨酸甲基化轉(zhuǎn)移酶SETDB1及其下游因子對神經(jīng)母細胞瘤增殖分化的影響及機制研究[D];西南大學(xué);2016年

9 張維博;組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD3調(diào)控神經(jīng)母細胞瘤增殖的研究[D];西南大學(xué);2016年

10 蔡在欣;從厥陰、中氣治療神經(jīng)母細胞瘤化療不良反應(yīng)的臨床研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

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本文編號：1259237