本文關(guān)鍵詞：基于光敏保護(hù)策略TPO模擬肽的設(shè)計(jì)與合成研究

  更多相關(guān)文章： TPO模擬肽 PEG化 光敏策略 定點(diǎn)修飾 促血小板生成

【摘要】：核能與核技術(shù)與我們的生活息息相關(guān),它們?yōu)槲覀儙?lái)便利的同時(shí)也增加了人們?cè)馐茌椛鋼p傷的潛在危險(xiǎn)。輻射損傷是指由電離輻射所致的急性,遲發(fā)性或慢性的機(jī)體組織損害。在核輻射損傷產(chǎn)生后,機(jī)體最先產(chǎn)生響應(yīng)的是造血系統(tǒng),臨床表現(xiàn)為中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板等血液關(guān)鍵組成的數(shù)量減少。血小板是維持血液正常功能必須的重要成分,它由骨髓成熟的巨核細(xì)胞分化而來(lái),在止血、傷口愈合等生理過(guò)程中起到重要作用。目前針對(duì)造血系統(tǒng)的藥物多集中于白細(xì)胞及紅細(xì)胞,而鮮有藥物用于治療血小板減少。因此開(kāi)發(fā)能夠迅速提升血小板數(shù)量的藥物具有十分重要的意義。血小板生成因子(TPO)是一種作用于巨核細(xì)胞-血小板生成系統(tǒng)的細(xì)胞因子,能夠誘導(dǎo)巨核細(xì)胞分化成為血小板。TMP是一種具有十四個(gè)氨基酸殘基的活性肽,其具有與TPO類似的作用但具有較大的結(jié)構(gòu)差異性,因此不會(huì)引起同源免疫反應(yīng)。在綜述了各種升血小板藥物的基礎(chǔ)上,本論文以血小板生成素模擬肽TMP為先導(dǎo)化合物,對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造和修飾,以期獲得藥效更強(qiáng)的活性分子,為進(jìn)一步克服TMP藥代動(dòng)力學(xué)不佳的缺點(diǎn),發(fā)現(xiàn)防治核輻射損傷的新藥,奠定理論與實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。本文工作主要取代如下進(jìn)展:1.多模微波輔助制備PEG化聚苯乙烯樹(shù)脂。聚苯乙烯樹(shù)脂目前仍是固相合成中最主要的固相載體,但在極性溶劑中較差的溶脹性限制了在某些情況下的使用,通過(guò)對(duì)樹(shù)脂進(jìn)行PEG化后能使其獲得更好的溶劑相容性。常規(guī)化學(xué)手段的PEG修飾耗時(shí)長(zhǎng),原料消耗大,而我們發(fā)現(xiàn)多模微波輔助能克服以上缺點(diǎn),能夠快速完成聚苯乙烯樹(shù)脂的PEG化。與傳統(tǒng)方法相比,該方法操作簡(jiǎn)單,快速高效,為實(shí)驗(yàn)室快速制備PEG化聚苯乙烯樹(shù)脂提供了參考,并最終使用自行制備的PEG樹(shù)脂完成目標(biāo)產(chǎn)物的合成。2.制備得到了一種用于多肽合成的快速光解去保護(hù)的分子。對(duì)于簡(jiǎn)單多肽的合成,通常使用Fmoc-tBu和Boc-Bn策略即可完成。若需要合成結(jié)構(gòu)更為復(fù)雜的肽,例如環(huán)肽或定點(diǎn)修飾肽,則需要使用其它特殊保護(hù)基。光敏保護(hù)基是通過(guò)光的作用下發(fā)生分解的一類分子,其優(yōu)勢(shì)在于不需要化學(xué)處理,僅通過(guò)紫外光照即可完成去保護(hù),因此通過(guò)與其它保護(hù)基搭配使用,能夠方便的對(duì)復(fù)雜化合物進(jìn)行合成和修飾。在多肽固相合成中,由于受到樹(shù)脂透光度及多肽分子活性影響,光敏方法未能廣泛使用。在綜述了若干種光敏保護(hù)基后,我們選定了2-(2-硝基苯基)-乙基(Npp)作為研究對(duì)象。利用易得的原料,合成了五種不同的光敏保護(hù)基。在探討了反應(yīng)機(jī)制以及并考察了各種特性后,最終得到出了一例令人滿意的光敏保護(hù)基,并以此建立了一種合成環(huán)肽的策略。該保護(hù)基能夠完全耐受Fmoc-tBu策略,且光解速度極快,在常規(guī)的聚苯乙烯樹(shù)脂上僅需三十分鐘即可完成去保護(hù)�；谠摬呗�,能夠方便的用于制備環(huán)肽和進(jìn)行側(cè)鏈修飾,因此對(duì)于制備復(fù)雜多肽具有十分重要的意義。使用自行建立的光化學(xué)方法,結(jié)合Fmoc-tBu策略,成功合成了一個(gè)海洋環(huán)肽。與文獻(xiàn)方法相比,合成步驟更少,制備成本更低,避免了反復(fù)的酸處理,色氨酸側(cè)鏈無(wú)需保護(hù),且產(chǎn)率高于文獻(xiàn)。環(huán)肽結(jié)構(gòu)通過(guò)HRMS、1HNMR和13CNMR鑒定。之后將該策略用于TPO模擬肽的修飾中,合成制備了一系列側(cè)鏈修飾物和環(huán)肽,終產(chǎn)物通過(guò)RP-HPLC進(jìn)行純化,使用MALDI-TOF對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。3.在綜述了若干光敏樹(shù)脂后,我們制備了三種光敏連接臂,分別使用聚苯乙烯和PEG聚苯乙烯樹(shù)脂作為固相載體制備得到了6種光敏樹(shù)脂。通過(guò)使用氨基酸對(duì)其進(jìn)行負(fù)載,考察了各樹(shù)脂的負(fù)載率情況。隨后考察了連接臂的酸堿穩(wěn)定性并對(duì)制備的光敏樹(shù)脂進(jìn)行了光脫除測(cè)試并進(jìn)行了比較,發(fā)現(xiàn)了一例未見(jiàn)報(bào)道的光解快速的安全拉手型光敏樹(shù)脂,為制備全保護(hù)肽段提供了參考。同時(shí),發(fā)現(xiàn)了trigger安息香樹(shù)脂的酸敏感特性,可作為常規(guī)肽合成樹(shù)脂使用。4.本文基于TMP為先導(dǎo)化合物,設(shè)計(jì)了其D型氨基酸替換、N端�；⒅麈溞揎�、側(cè)鏈修飾、環(huán)化等新化合物。通過(guò)活性篩選,發(fā)現(xiàn)了5-溴阿魏酸�；腡MP具有明顯的升紅細(xì)胞、血紅蛋白和血小板的作用,提升N端進(jìn)行�；岣咧苄杂锌赡軙�(huì)增強(qiáng)血小板的活性,為升血小板抗輻射新化合物的發(fā)現(xiàn)提供了新的活性分子,值得進(jìn)一步研究。本文工作建立了一種高效快速且能耐受Fmoc-t Bu策略的光敏方法,并成功應(yīng)用于兩例環(huán)肽的合成,共合成16個(gè)TPO模擬肽衍生物。按照輻射所致的小鼠造血損傷模型,初步評(píng)價(jià)了擬肽類化合物的活性。初步結(jié)果表明,使用具有抗輻射活性的小分子將N端進(jìn)行�；�,可與TMP形成孿藥,并改變TMP的油水分配系數(shù),具有明顯的提升紅細(xì)胞,血紅蛋白和血小板的作用。
【學(xué)位授予單位】：北京工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R914.5

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙永強(qiáng);;第2代促血小板生成劑臨床研究現(xiàn)狀[J];內(nèi)科理論與實(shí)踐;2008年02期

2 薛永權(quán);;伴有異常血小板生成的急性非淋巴細(xì)胞白血病的3號(hào)染色體異常[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊(cè);1983年03期

3 任永生,柳曉蘭,張卿西;γ線全身照射對(duì)小鼠血小板生成的影響[J];輻射研究與輻射工藝學(xué)報(bào);1989年03期

4 曾淑燕;;原發(fā)性血小板減少性紫癲病人的血小板生成、清除和分布[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊(cè));1992年02期

5 閻昭,蔣惠留,張媛,張媛;白介素-11對(duì)血小板生成影響的研究進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)院用藥評(píng)價(jià)與分析;2001年03期

6 王志清;;促血小板生成制劑治療慢性難治性特發(fā)性血小板減少性紫癜的發(fā)展概況[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2010年03期

7 馬靜瑤;吳潤(rùn)暉;;應(yīng)用促血小板生成劑治療兒童免疫性血小板減少癥的研究進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2012年06期

8 涂強(qiáng),張卿西;血小板生成刺激因子對(duì)巨核血小板系統(tǒng)體外生成的影響[J];生理學(xué)報(bào);1990年04期

9 康建民;;血小板減少常見(jiàn)的原因[J];健康向?qū)?2009年05期

10 歐瑞明,鐘雪云,陳運(yùn)賢;血小板生成因子的研究進(jìn)展[J];中國(guó)病理生理雜志;2001年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 趙永強(qiáng);;促血小板生成劑治療特發(fā)性血小板減少性紫癜[A];2011年浙江省血液病學(xué)術(shù)年會(huì)暨浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)血液病學(xué)分會(huì)成立50周年慶典論文匯編[C];2011年

2 郭希超;;IPF在血小板減少性疾病中診斷的應(yīng)用[A];2009年浙江省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

3 任春云;郭希超;;未成熟血小板比率(IPF)在血小板減少性疾病中的應(yīng)用[A];2012年浙江省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

4 王軍志;;重組人白細(xì)胞介素-11的質(zhì)量研究[A];第四屆中國(guó)新醫(yī)藥博士論壇論文集[C];1999年

5 郎永江;;新型促血小板生成因子Tmax的中試表達(dá)、純化及生物學(xué)活性檢測(cè)[A];第七屆全國(guó)醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)和第四屆全國(guó)臨床應(yīng)用生物化學(xué)與分子生物學(xué)聯(lián)合學(xué)術(shù)研討會(huì)暨醫(yī)學(xué)生化分會(huì)會(huì)員代表大會(huì)論文集[C];2011年

6 王芳;劉文勵(lì);;21世紀(jì)的免疫性血小板減少性紫癜[A];第八屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合血液病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 詹領(lǐng);促血小板生成因子—重組酪氨酰tRNA合成酶的研制[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 王剛;基于光敏保護(hù)策略TPO模擬肽的設(shè)計(jì)與合成研究[D];北京工業(yè)大學(xué);2015年

3 劉楠;一種高效促進(jìn)血小板生成的全新型融合蛋白SCF-TPO的分子設(shè)計(jì)及其生物學(xué)活性研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2003年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 沈彤;重組人血小板生成因子注射液的Ⅰ期臨床試驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

2 郎永江;促血小板生成因子Tmax的發(fā)酵、純化及藥效學(xué)、作用機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

3 邵波;新型促血小板生成融合蛋白體內(nèi)分布與免疫原性實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

4 宗丹丹;LPS誘導(dǎo)血小板減少癥與DIC關(guān)系的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

5 代燕平;地榆總皂苷促血小板生成作用及其機(jī)理研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：1167188