溝葉結(jié)縷草[Zoysia matrella(L.)Merr.],又名馬尼拉草,作為生長(zhǎng)力強(qiáng),觀賞性好,整體品質(zhì)佳的優(yōu)良暖季型草坪草,在我國(guó)南方地區(qū)廣為應(yīng)用。因其在養(yǎng)護(hù)管理時(shí)需要充足供水和定期修剪,花費(fèi)大量的人工和成本,為了降低供水量和減少修剪頻率,降低草坪養(yǎng)護(hù)管理成本,本研究利用體細(xì)胞無(wú)性系變異篩選抗旱和矮化的溝葉結(jié)縷草。本研究以重要暖季型草坪草溝葉結(jié)縷草為材料,通過(guò)外源施加表油菜素內(nèi)酯(EBL),探究了植物激素油菜素甾醇(BR)對(duì)溝葉結(jié)縷草體細(xì)胞胚胎發(fā)生過(guò)程的作用,不斷優(yōu)化完善長(zhǎng)期離體的愈傷組織培養(yǎng)體系并維持其高效的再生能力。利用PEG-6000模擬干旱脅迫,篩選具有耐旱性的溝葉結(jié)縷草體細(xì)胞無(wú)性系再生植株,并外源施加EBL研究BR提高溝葉結(jié)縷草逆境脅迫的作用機(jī)理。同時(shí),以溝葉結(jié)縷草⁶⁰Coγ輻射誘變的體細(xì)胞無(wú)性系矮化突變體為材料,結(jié)合形態(tài)、生理生化、內(nèi)源激素水平,利用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)(RNA-seq)對(duì)溝葉結(jié)縷草矮化突變體進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,分析植物激素調(diào)控溝葉結(jié)縷草生長(zhǎng)作用的潛在機(jī)制,篩選調(diào)控溝葉結(jié)縷草矮化的候選基因,為進(jìn)行遺傳工程改良,提高優(yōu)良性狀提供分子基礎(chǔ)。主...

【文章頁(yè)數(shù)】：117 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
縮略詞
1 緒論
    1.1 暖季型草坪草生物技術(shù)研究進(jìn)展
        1.1.1 組織培養(yǎng)再生體系的建立和完善
        1.1.2 體細(xì)胞無(wú)性系變異
        1.1.3 遺傳轉(zhuǎn)化的研究
        1.1.4 轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究
    1.2 植物激素與生長(zhǎng)調(diào)控
        1.2.1 生長(zhǎng)素參與植物生長(zhǎng)調(diào)控
        1.2.2 油菜素甾醇參與植物生長(zhǎng)調(diào)控
        1.2.3 脫落酸參與植物生長(zhǎng)調(diào)控
    1.3 植物激素在植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用
        1.3.1 生長(zhǎng)素在植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用
        1.3.2 細(xì)胞分裂素在植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用
        1.3.3 油菜素甾醇在植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用
    1.4 研究目的、主要內(nèi)容及技術(shù)路線
        1.4.1 研究目的及意義
        1.4.2 主要內(nèi)容
        1.4.3 技術(shù)路線
2 油菜素甾醇調(diào)控溝葉結(jié)縷草愈傷組織生長(zhǎng)和再生
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 EBL處理下愈傷組織的繼代生長(zhǎng)
        2.1.3 EBL處理下愈傷組織的再生
        2.1.4 EBL處理下愈傷組織繼代和再生過(guò)程中的生理測(cè)定
        2.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 不同濃度EBL對(duì)溝葉結(jié)縷草愈傷組織生長(zhǎng)的影響
        2.2.2 不同濃度EBL對(duì)溝葉結(jié)縷草愈傷組織再生的影響
    2.3 討論
        2.3.1 BR調(diào)控溝葉結(jié)縷草愈傷組織生長(zhǎng)和再生
        2.3.2 BR激活溝葉結(jié)縷草愈傷組織生長(zhǎng)和再生過(guò)程中抗氧化體系
    2.4 小結(jié)
3 油菜素甾醇調(diào)控溝葉結(jié)縷草再生的干旱脅迫響應(yīng)
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 不同濃度PEG-6000處理下愈傷組織的再生
        3.1.3 EBL處理干旱脅迫下愈傷組織的再生
        3.1.4 EBL處理干旱脅迫下愈傷組織再生的生理測(cè)定
        3.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 不同濃度PEG處理對(duì)溝葉結(jié)縷草愈傷組織再生形態(tài)的影響
        3.2.2 不同濃度PEG處理對(duì)溝葉結(jié)縷草再生生理的影響
        3.2.3 干旱脅迫下不同濃度EBL對(duì)溝葉結(jié)縷草愈傷組織再生形態(tài)的影響
        3.2.4 干旱脅迫下不同濃度EBL對(duì)溝葉結(jié)縷草再生植株生理的影響
    3.3 討論
        3.3.1 干旱脅迫對(duì)溝葉結(jié)縷草愈傷組織再生的影響
        3.3.2 干旱脅迫下溝葉結(jié)縷草愈傷組織抗氧化系統(tǒng)的響應(yīng)
        3.3.3 BR參與溝葉結(jié)縷草愈傷組織對(duì)干旱脅迫的響應(yīng)
    3.4 小結(jié)
4 溝葉結(jié)縷草矮化突變體矮化機(jī)理研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗(yàn)材料
        4.1.2 矮化突變體遺傳穩(wěn)定性的形態(tài)學(xué)評(píng)估
        4.1.3 矮化突變體遺傳穩(wěn)定性的生理學(xué)測(cè)定
        4.1.4 矮化突變體內(nèi)源激素分析
        4.1.5 RNA提取和文庫(kù)構(gòu)建
        4.1.6 RNA-Seq測(cè)序、組裝和注釋
        4.1.7 差異表達(dá)基因的鑒定與功能注釋
        4.1.8 實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)分析
        4.1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 矮化突變體形態(tài)特征的穩(wěn)定性
        4.2.2 矮化突變體生理變化的穩(wěn)定性
        4.2.3 矮化突變體內(nèi)源激素含量的變化
        4.2.4 Unigene組裝和注釋
        4.2.5 差異表達(dá)基因的識(shí)別與聚類(lèi)分析
        4.2.6 差異表達(dá)基因的功能注釋和富集分析
        4.2.7 矮化相關(guān)DEGs的 RT-qPCR分析
    4.3 討論
        4.3.1 突變體表型的長(zhǎng)期穩(wěn)定性
        4.3.2 抗氧化酶活性和其他與矮化相關(guān)的生理變化
        4.3.3 植物激素對(duì)矮化突變體的調(diào)控作用
        4.3.4 細(xì)胞壁與植物矮化
    4.4 小結(jié)
5 結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷及攻讀學(xué)位期間研究成果



本文編號(hào)：3814343