發(fā)布時(shí)間：2023-02-20 18:10

　　Wolbachia是一種胞內(nèi)共生菌,其在節(jié)肢動物中廣泛存在,憑借胞質(zhì)不親和的作用Wobachia可以在寄主種群中快速擴(kuò)散。胞質(zhì)不親和的現(xiàn)象表現(xiàn)為感染W(wǎng)olbachia的雄蟲與不感染W(wǎng)olbachia的雌蟲交配,或者與攜帶不同Wolbachia株系的雌蟲進(jìn)行交配,后代不孵化的現(xiàn)象。這種胞質(zhì)不親和的表型可以被攜帶同種Wolbachia的雌蟲所拯救。目前對于胞質(zhì)不親和的機(jī)理已經(jīng)有幾個(gè)比較成熟的模型,但胞質(zhì)不親和的機(jī)理仍然是一個(gè)謎題。一些研究表明,Wolbachia在精細(xì)胞的形成過程中會對精子細(xì)胞有一定的修飾作用,這些修飾作用可能對雄性精子造成一些損傷,這些損傷可能會誘導(dǎo)胞質(zhì)不親和的形成。然而Wolbachia在性腺的滴度與CI的強(qiáng)度并不是完全正相關(guān)。Wolbachia也可以為寄主提供生殖優(yōu)勢�？梢詾槠浼闹魈峁┥L發(fā)育必須的營養(yǎng)物質(zhì),Wolbachia對某些寄主的胚胎發(fā)育至關(guān)重要,也可以影響一些寄主的產(chǎn)卵行為。Wolbachia還可以影響一些寄主昆蟲對病毒的抗性;甚至在果蠅中可以抑制一些致病菌的作用。Wolbachia還感染線蟲,對線蟲的胚胎以及幼蟲的發(fā)育,起到了至關(guān)重要的作用。通過持續(xù)提供這...

【文章頁數(shù)】：182 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1. 共生菌Wolbachia的概述
    2. 共生菌Wolbachia的形態(tài)特征及其分布情況
    3. 共生菌Wolbachia的系統(tǒng)發(fā)育研究
    4. 共生菌Wolbachia的傳播方式
    5. 共生菌Wolbachia對其寄主的生殖調(diào)控作用
        5.1 Wolbachia誘導(dǎo)寄主胞質(zhì)不親和機(jī)理的研究
        5.2 Wolbachia誘導(dǎo)寄主孤雌生殖、雌性化和殺雄的研究
    6. Wolbachia對宿主的其他影響
    7. 利用高通量技術(shù)研究 Wolbachia與寄主互作
    8. 利用Wolbachia控制人類疾病
    9. 稻飛虱中Wolbachia的研究進(jìn)展
    10. 本研究的目的和意義
第二章 Wolbachia誘導(dǎo)灰飛虱CI基因的篩選
    1. 材料與方法
        1.1 灰飛虱的飼養(yǎng)與樣本收集
        1.2 RNA的提取以及質(zhì)量檢測
        1.3 測序文庫的構(gòu)建以及測序
        1.4 生物信息學(xué)分析
        1.5 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量評估
        1.6 測序數(shù)據(jù)過濾
        1.7 轉(zhuǎn)錄本的拼接
        1.8 基因功能注釋
        1.9 CDS預(yù)測
        1.10 基因表達(dá)水平分析
        1.11 RNA-seq整體質(zhì)量評估
        1.12 不同灰飛虱樣本間基因差異表達(dá)分析
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 測序數(shù)據(jù)結(jié)果統(tǒng)計(jì)
        2.2 測序質(zhì)量的整體評估
        2.3 Wolbachia對灰飛虱精巢基因表達(dá)的影響
        2.4 差異表達(dá)基因GO富集分析
        2.5 差異表達(dá)基因KEGG富集分析
        2.6 Wolbachia誘導(dǎo)灰飛虱CI基因的篩選
        2.7 qPCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄組結(jié)果
    3. 討論
第三章 候選基因在不同日齡灰飛虱精巢的定量分析
    1. 材料方法
        1.1 供試材料
        1.2 灰飛虱精巢總RNA的提取
        1.3 cDNA的合成以及定量PCR
    2. 結(jié)果與分析
    3. 討論
第四章 RNAi和氨基酸飼喂驗(yàn)證候選基因是否參與Wolbachia誘導(dǎo)灰飛虱胞質(zhì)不親和現(xiàn)象
    1. 材料和方法
        1.1 供試材料
        1.2 灰飛虱精巢RNA的提取
        1.3 cDNA的合成
        1.4 dsRNA的合成
        1.5 dsRNA飼喂試驗(yàn)
        1.6 灰飛虱雜交實(shí)驗(yàn)
        1.7 支鏈氨基酸轉(zhuǎn)移酶活性測定
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 RNAi干擾效率測定
        2.2 iLvE酶活的測定
        2.3 雜交實(shí)驗(yàn)
        2.4 氨基酸飼喂實(shí)驗(yàn)
    3. 討論
第五章 Wolbachia對灰飛虱交配行為的影響
    1. 材料方法
        1.1 供試材料
        1.2 雜交實(shí)驗(yàn)
        1.3 解剖受精囊
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 Wolbachia感染對灰飛虱精子轉(zhuǎn)移數(shù)的影響
        2.2 氨基酸飼喂對灰飛虱精子轉(zhuǎn)移數(shù)的影響
        2.3 Wolbachia感染對雌蟲接受在交配比例的影響
    3. 討論
第六章 不同溫度條件下Wolbachia對灰飛虱和褐飛虱的生殖調(diào)控
    1. 材料方法
        1.1 供試材料
        1.2 溫度實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.3 卵巢中Wolbachia的定量
        1.4 質(zhì)譜分析、維生素飼喂實(shí)驗(yàn)、以及交配實(shí)驗(yàn)
    2. 結(jié)果分析
        2.1 Wolbachia感染在常溫下對灰飛虱和褐飛虱產(chǎn)卵量的影響
        2.2 Wolbachia感染在變溫下對灰飛虱和褐飛虱產(chǎn)卵量的影響
        2.3 在變溫下對灰飛虱和褐飛虱卵巢中Wolbachia滴度的測定
        2.4 比較兩個(gè)Wolbachia基因組以及質(zhì)譜分析
        2.5 維生素飼喂實(shí)驗(yàn)
    3. 討論
全文總結(jié)
    1. Wolbachia誘導(dǎo)灰飛虱CI機(jī)理的初步探究
    2. 不同溫度下Wolbachia對灰飛虱和褐飛虱的生殖調(diào)控機(jī)理的探究
    3. 研究中的創(chuàng)新點(diǎn)
    4. 研究中的不足之處
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄一 wStri株系特異基因
    附錄二 wLug株系特異基因
論文發(fā)表以及獎勵情況
致謝



本文編號：3747066