本文關(guān)鍵詞：飼料脂肪水平和脂肪酸種類對(duì)大黃魚脂肪沉積的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：以我國(guó)重要的海水性養(yǎng)殖魚類大黃魚(Larmichthys crocea)為研究對(duì)象,在海水浮式網(wǎng)箱內(nèi)進(jìn)行攝食生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),以觀察飼料脂肪水平和脂肪酸種類對(duì)大黃魚生長(zhǎng)、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積相關(guān)基因表達(dá)的影響,在此基礎(chǔ)上探討脂肪水平和脂肪酸調(diào)控大黃魚脂肪沉積的分子機(jī)制。本文研究?jī)?nèi)容和主要研究結(jié)果如下：1.飼料脂肪水平對(duì)大黃魚生長(zhǎng)、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積的影響用三種不同脂肪水平——低脂(6%)、適宜脂肪水平(12%)和高脂(18%)的飼料飼養(yǎng)大黃魚(150.0±4.9 g)10周,研究脂肪水平對(duì)大黃魚生長(zhǎng)性能、血漿生化指標(biāo)、組織脂肪含量以及脂肪沉積相關(guān)過(guò)程(脂蛋白組裝和清除、脂肪酸吸收和甘油三酯合成、分解)基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明,脂肪水平對(duì)大黃魚特定生長(zhǎng)率(SGR)沒有顯著影響(P0.05)。然而,大黃魚肝體比(HSI)、臟體比(VSI)、血漿甘油三酯(TAG)、非酯化脂肪酸(NEFA)和低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-c)含量隨飼料脂肪水平的升高而顯著升高(P0.05)。與對(duì)照組相比,攝食低脂飼料時(shí),在一定程度上,雖然肝臟對(duì)脂蛋白的攝取、脂肪酸的吸收增加,甘油三酯合成增加,甘油三酯分解和分泌降低,但由于攝食的脂肪少,肝臟脂肪含量顯著降低：雖然肌肉對(duì)脂肪酸的吸收可能增加,但脂蛋白攝取和甘油三酯合成的降低以及脂肪的來(lái)源不足使肌肉脂肪含量降低。攝食高脂飼料時(shí),肝臟對(duì)脂蛋白攝取、脂肪酸吸收的增加以及甘油三酯分解的降低等途徑可能參與了肝臟脂肪含量的增加,同時(shí)肝臟也可能通過(guò)增加甘油三酯的分泌、降低脂肪的合成來(lái)減少肝脂的沉積；肌肉可能通過(guò)降低對(duì)脂蛋白的攝取、脂肪酸的吸收以及甘油三酯的合成等途徑來(lái)抑制脂肪的過(guò)度沉積；腹部脂肪組織可能通過(guò)增加脂蛋白攝取、脂肪酸吸收以及甘油三酯合成來(lái)增加脂肪沉積,但脂肪組織脂解率也可能增加,使其脂肪含量低于對(duì)照組。因此,飼料脂肪水平調(diào)控脂肪沉積是個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,存在組織特異性調(diào)控方式。2.飼料中飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸對(duì)大黃魚生長(zhǎng)、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積的影響用三種分別富含長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸(FO)、棕櫚酸(PA)和油酸(OO)的飼料投喂大黃魚(151.0±3.5 g)10周,研究飼料中不同脂肪酸種類對(duì)大黃魚生長(zhǎng)性能、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積相關(guān)基因(包括脂蛋白組裝和清除、脂肪酸吸收、甘油三酯合成和分解)表達(dá)的影響。結(jié)果表明,與FO組相比,PA組大黃魚增重率(WGR)沒有顯著變化,而OO組增重率顯著降低(P0.05)。PA組大黃魚肝體比(HSI)和臟體比(VSI)顯著低于OO組(P0.05),但與FO組之間差異不顯著(P0.05)。血漿甘油三酯(TAG)、總膽固醇、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-c)的濃度不受飼料處理的影響(P0.05)。OO組大黃魚血漿非酯化脂肪酸(NEFA)濃度最高,其濃度約為PA組的2倍。PA組肝臟和肌肉脂肪水平的降低可能主要是由于肝臟脂蛋白分泌、脂肪酸p-氧化增加以及肌肉甘油三酯合成降低和脂肪酸β-氧化增加。與PA組相反,攝食OO組飼料的大黃魚肝臟和肌肉脂肪含量顯著增加；脂蛋白和脂肪酸吸收增加以及沒有明顯增強(qiáng)的脂肪酸β-氧化能力可能是導(dǎo)致OO組肝臟脂肪含量增加的重要原因；肌肉脂肪含量增加可能主要是因?yàn)橹鞍住⒅舅嵛赵黾雍透视腿ズ铣稍黾�。此�?雖然腹部脂肪組織脂肪含量沒有明顯變化,但脂肪組織ATGL表達(dá)量顯著增加,脂肪組織脂解率的增加也可能是導(dǎo)致OO組肝臟脂肪沉積增加的原因之一。3.飼料中亞油酸和亞麻酸對(duì)大黃魚生長(zhǎng)、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積的影響用三種分別富含長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸(FO)、亞油酸(SO)和亞麻酸(PO)的飼料投喂大黃魚(151.5±3.9 g)10周。研究不同脂肪酸種類對(duì)大黃魚生長(zhǎng)性能、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積相關(guān)基因(包括脂蛋白組裝和清除、脂肪酸吸收、甘油三酯合成和分解)表達(dá)的影響。結(jié)果表明,大黃魚增重率(WGR)、存活率和肝體比(HSI)不受飼料處理的影響(P0.05),但SO組臟體比(VSI)顯著高于FO組(P0.05)。血漿甘油三酯(TAG)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-c)和非酯化脂肪酸(NEFA)勺濃度不受飼料處理的影響(P0.05)。PO組血漿總膽固醇水平、SO組和PO組血漿低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-c)水平顯著高于FO組(P0.05)。SO和PO組肝臟脂肪含量顯著高于FO組,但全魚、肌肉和脂肪組織脂肪含量與FO組相比差異不顯著(P0.05)。SO組肝臟對(duì)脂蛋白的攝取和脂肪酸的吸收增加可能是導(dǎo)致肝脂沉積的主要原因,雖然肝臟甘油三酯合成降低、甘油三酯分解以及分泌增加等途徑可能參與了降低脂肪沉積,但這些方法仍不足以抑制肝脂沉積,從而使SO組肝臟脂肪含量顯著增加。PO組肝脂沉積增加可能是由于對(duì)脂蛋白的攝取和脂肪酸的吸收增加,雖然肝臟甘油三酯分泌可能增加,但仍不能將過(guò)多脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)至肝外,導(dǎo)致PO組肝脂沉積顯著增加。此外,腹部脂肪組織ATGL表達(dá)量顯著增加,脂肪組織脂解率的增加也可能是導(dǎo)致SO和PO組肝臟脂肪沉積增加的原因之一。4.不同脂肪酸條件下大黃魚肝臟基因表達(dá)譜分析采用Illumina HiSeqTM2000/MiseqTM高通量測(cè)序技術(shù),分析了大黃魚腦、胃、腸、腎、心臟、肌肉、脂肪組織和肝臟混合樣品的轉(zhuǎn)錄組文庫(kù),共獲得126963條Unigene,長(zhǎng)度范圍為201bp-29701bp,平均長(zhǎng)度795 bp。在NR數(shù)據(jù)庫(kù)中注釋成功的Unigenes數(shù)目為28586條,注釋成功率為22.51%。利用所得的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù),對(duì)不同脂肪酸(FO，SO和PO)條件下大黃魚肝臟基因表達(dá)譜進(jìn)行了分析。結(jié)果表明脂肪酸種類對(duì)肝臟基因表達(dá)譜有顯著影響。與FO組相比,SO組差異表達(dá)基因主要集中于代謝過(guò)程和催化活性,PO組差異表達(dá)基因集中于氧化還原過(guò)程、羧酸代謝過(guò)程、酮酸代謝過(guò)程、有機(jī)酸代謝過(guò)程和氧化還原酶活性。PI3K-Akt、TNFα等信號(hào)通路參與了脂肪酸對(duì)脂肪沉積的調(diào)控。
【關(guān)鍵詞】：大黃魚 脂肪水平 魚油 植物油 脂蛋白受體 脂肪酸吸收 脂代謝 基因表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S965.322
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-17
• 引言17-19
• 第一章 文獻(xiàn)綜述19-45
• 1. 前言19
• 2. 魚類對(duì)脂肪的消化、吸收19-20
• 2.1 脂肪的消化19-20
• 2.2 脂肪的吸收20
• 3. 脂肪在組織間的轉(zhuǎn)運(yùn)20-27
• 3.1 脂蛋白的種類和組成20-23
• 3.1.1 脂蛋白的種類20-22
• 3.1.2 脂蛋白的組成22-23
• 3.2 脂肪的轉(zhuǎn)運(yùn)23-24
• 3.2.1 外源性脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)23
• 3.2.2 內(nèi)源性脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)23-24
• 3.3 腸道脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)控24-26
• 3.4 肝臟脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)控26-27
• 4. 脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)27-31
• 4.1 脂肪酸的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)27-28
• 4.2 脂肪酸在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)28-29
• 4.3 脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)控29-31
• 5. 脂類的合成31-34
• 5.1 腸道31-33
• 5.2 肝臟33-34
• 6. 脂肪的分解34-35
• 7. 展望35-36
• 8. 本研究的目的和意義36-45
• 8.1 研究目的36
• 8.2 研究意義36-45
• 第二章 飼料脂肪水平對(duì)大黃魚生長(zhǎng)、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積影響45-77
• 1. 引言45-46
• 2. 材料方法46-49
• 2.1 飼料制作46-47
• 2.2 飼養(yǎng)管理47
• 2.3 樣品采集47
• 2.4 生化分析47-48
• 2.5 水分和脂肪含量測(cè)定48
• 2.6 RNA提取和實(shí)時(shí)定量PCR48
• 2.7 計(jì)算和統(tǒng)計(jì)方法48-49
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果49-51
• 3.1 生長(zhǎng)性能、形體和血漿生化指標(biāo)49
• 3.2 脂肪酸組成49
• 3.3 水分和脂肪含量49-50
• 3.4 肝臟VLDL組裝相關(guān)蛋白的基因表達(dá)50
• 3.5 脂蛋白脂酶和脂蛋白受體基因表達(dá)50
• 3.6 脂肪酸吸收相關(guān)基因的表達(dá)50
• 3.7 甘油三酯合成和分解相關(guān)基因的表達(dá)50-51
• 4. 討論51-57
• 附表和圖57-77
• 第三章 飼料中飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸對(duì)大黃魚生長(zhǎng)、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積的影響77-108
• 1. 引言77-78
• 2. 材料和方法78-79
• 2.1 飼料配方78-79
• 2.2 飼養(yǎng)管理79
• 2.3 樣品采集79
• 2.4 生化分析79
• 2.5 水分和脂肪含量測(cè)定79
• 2.6 RNA提取和實(shí)時(shí)定量PCR79
• 2.7 計(jì)算和統(tǒng)計(jì)方法79
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果79-82
• 3.1 生長(zhǎng)性能和形體指標(biāo)79-80
• 3.2 生化指標(biāo)80
• 3.3 脂肪酸組成80
• 3.4 水分和脂肪含量80-81
• 3.5 肝臟VLDL組裝和TAG代謝相關(guān)基因的表達(dá)81
• 3.6 肝臟脂蛋白脂酶、脂蛋白受體和脂肪酸吸收相關(guān)基因的表達(dá)81
• 3.7 肌肉基因的表達(dá)81
• 3.8 腹部脂肪組織基因的表達(dá)81-82
• 4. 討論82-87
• 附表和圖87-108
• 第四章 飼料中亞油酸和亞麻酸對(duì)大黃魚生長(zhǎng)、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積的影響108-139
• 1. 引言108-109
• 2. 材料方法109-110
• 2.1 配方和飼料制作109
• 2.2 飼養(yǎng)管理109-110
• 2.3 樣品采集110
• 2.4 生化分析110
• 2.5 水分和脂肪含量測(cè)定110
• 2.6 RNA提取和實(shí)時(shí)定量PCR110
• 2.7 計(jì)算和統(tǒng)計(jì)方法110
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果110-112
• 3.1 生長(zhǎng)性能和形體指標(biāo)110
• 3.2 生化指標(biāo)110
• 3.3 脂肪酸組成110-111
• 3.4 水分和脂肪含量111
• 3.5 肝臟TAG代謝和VLDL組裝相關(guān)基因的表達(dá)111-112
• 3.6 肝臟脂蛋白受體和脂肪酸吸收相關(guān)基因的表達(dá)112
• 3.7 肌肉基因的表達(dá)112
• 3.8 腹部脂肪組織基因的表達(dá)112
• 4. 討論112-117
• 附表和圖117-139
• 第五章 不同脂肪酸條件下大黃魚肝臟基因表達(dá)譜分析139-164
• 1. 引言139-140
• 2. 材料和方法140-141
• 2.1 樣品準(zhǔn)備140
• 2.2 RNA提取、質(zhì)量檢測(cè)及測(cè)序140
• 2.3 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析140-141
• 2.3.1 測(cè)序數(shù)據(jù)拼接和分析140-141
• 2.3.2 基因功能注釋及分類141
• 2.4 表達(dá)譜數(shù)據(jù)分析141
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果141-144
• 3.1 轉(zhuǎn)錄組分析141-143
• 3.1.1 測(cè)序數(shù)據(jù)過(guò)濾141
• 3.1.2 轉(zhuǎn)錄本拼接141-142
• 3.1.3 基因注釋142
• 3.1.4 基因GO功能分類142
• 3.1.5 基因KOG功能分類142
• 3.1.6 KEGG富集分析142-143
• 3.2 表達(dá)譜分析143-144
• 3.2.1 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估143
• 3.2.2 差異表達(dá)基因分析143
• 3.2.3 差異表達(dá)基因GO富集143
• 3.2.4 差異表達(dá)基因KEGG富集143-144
• 3.2.5 脂肪酸代謝相關(guān)信號(hào)通路144
• 4. 討論144-164
• 第六章 全文總結(jié)164-165
• 參考文獻(xiàn)165-194
• 縮略詞表194-196
• 致謝196-198
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷、本研究已發(fā)表的文章目錄198

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10 李s，

本文編號(hào)：333589