植物病毒的流行和爆發(fā)嚴(yán)重威脅糧食生產(chǎn)和食品安全,因此人們的研究主要集中在農(nóng)作物病毒傳播和危害上。20世紀(jì)初以來(lái),野生植物病毒也引起了人們的廣泛興趣,野生植物與栽培作物可能由于某些基因的一致性而共享某些病毒和傳播介質(zhì)種群,導(dǎo)致農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)一些奇怪現(xiàn)象,如一些非種子傳播的病毒病,在農(nóng)作物引種到新栽培區(qū)時(shí)也會(huì)發(fā)生和流行。這暗示著新栽培區(qū)附近的野生植物中潛藏著某些病毒,因此其作為中間寄主或轉(zhuǎn)主寄主而引起作物病害。多年生野生植物可以在多年份、多季節(jié)獲得病毒感染,成為病毒傳播的中間寄主,完成病毒的安全渡夏或越冬。有研究證明作物中的病毒可以傳播給野生植物,并在野生植物中貯存,但病毒是否可以從野生植物傳染到栽培作物卻鮮為人知。本研究采集具有典型病毒樣癥狀的200多種多年生草本植物樣品,以植物病毒中數(shù)量最多的Potyvirus屬病毒作為檢測(cè)對(duì)象,通過(guò)簡(jiǎn)并引物來(lái)檢測(cè)已知Potyvirus屬病毒的存在及發(fā)現(xiàn)Potyvirus屬新病毒的可能性。研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了一種Potyvirus屬新病毒,繼續(xù)對(duì)該病毒的生物學(xué)特性、基因組全序列及結(jié)構(gòu)、檢測(cè)方法及栽培作物中分布狀況進(jìn)行了研究。本研究結(jié)論如下:1.本研究以... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１植物病毒粗提純化方法??Ｆｉｇ．?２－１?Ｍｅｔｈｏｄ?ｏｆ?ｃｒｕｄｅ?ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｐｌａｎｔ?Ｖｉｒｕｓｅｓ??－１５－??

東北林業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文???２．２．７病毒基因組３雜的擴(kuò)增??以病毒基因組為模板，利用日本ＴＯＹＯＢＯ公司的反轉(zhuǎn)錄試劑盒（ＲｅｖｅｒＴｒａ?Ａｃｅ?ｑＰＣＲ??ＲＴ?Ｋｉｔ），以３＇?ａｄａｐｔｏｒ?（見表２－３）為反轉(zhuǎn)引物合成第一鏈ｃＤＮＡ。按照?qǐng)D２－２所示的３＇－??ＲＡＣＥ擴(kuò)增策略，進(jìn)行逐段擴(kuò)增。??３?＾ＲＡＣＥ?ｌｏ?ａｍｐｌｊｔｙ?ｃＤＨＡ?３?＇ｅｎｄ??各匕?—?３，??酶（９４４ｂｐ）?ＣＰ（Ｓ８２ｂｐ）?ＵＴＲ?ＡＡＡ??｜??ＨＩｂ２Ｆ?ＨＩｂ３Ｒ?ｊ??１３００ｂｐ?Ｉ??ｉ?——ｉ?Ｉ??—＞?ｈ?咖?４—?Ｉ???ｖ?Ｆ２?ｉｒｔｎｅｒ?＾??Ｉ??ｉＯＯＯｂｐ?ｊ??１—１?｜??—Ｆ?Ｒ?—??４００ｂｐ?ｊ??１?１??？??圖２－２?３＾?ＲＡＣＥ擴(kuò)增策略圖??Ｆｉｇ．?２－２?Ｔｈｅ?ｓｔｒａｔｅｇｙ?ｔｏ?ａｍｐｌｉｆｙ?ｏｆ?３?－?ＲＡＣＥ??２＿２＿７＿１巢氏ＰＣＲ反應(yīng)??以３＇?ａｄａｐｔｏｒ?yàn)榉崔D(zhuǎn)引物，以ｃＤＮＡ為模板進(jìn)行巢氏ＰＣＲ，反應(yīng)體系如表２－７所示，反??應(yīng)條件如表２－８所示。??表２－７?ＰＣＲ反應(yīng)體系??Ｔａｂｌｅ?２－７?Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ?ｏｆ?ＰＣＲ?ｓｙｓｔｅｍ??反應(yīng)成分?第一輪（ＨＬ）?第二輪（ｐＬ）??２ｘＧＣ?Ｂｕｆｆｅｒ?Ｉ?１２．５?２５??Ｆ?（１０?ｎＭ）?０．５?（Ｆ１／Ｆ７）?１?（Ｆ２／Ｆ８）??Ｒ?（１０?＾ｘＭ）?０．５?（５．３＇ｏｕｔｅｒ）?１?（５．３＇ｍｎｅｒ）??ｄＮＴＰ?（２．５?ｍＭ）?４?８??ｄｄＨ２０?６．３?１２．

圖２－６病葉中提純的ＣＰ蛋丨７ｉ條帶??Ｆｉｇ．?２－６?Ｔｈｅ?ＣＰ?ｉｎ?ｆｒｅｓｈ?ｐｌａｎｔ?ｓａｐ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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