肉種雞鋅營養(yǎng)對子代肉雞免疫機(jī)能的影響及其分子機(jī)制
本文關(guān)鍵詞:肉種雞鋅營養(yǎng)對子代肉雞免疫機(jī)能的影響及其分子機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:本研究選用Ross-308肉雞,通過五個(gè)試驗(yàn)研究了肉種雞鋅營養(yǎng)對子代肉雞免疫機(jī)能的影響及其分子機(jī)制。 試驗(yàn)一旨在研究雞胚以及新生的肉仔雞發(fā)育進(jìn)程中的表遺傳模式。選用540枚Ross308種蛋進(jìn)行孵化,在不同發(fā)育階段的胚胎和出殼后的肉雛雞中測定肝臟、胸肌和空腸的表遺傳相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果表明,隨著雞胚的發(fā)育,DNA甲基化和H3K9乙;(jīng)歷了肝臟中逐漸降低、空腸中N-形和胸肌中W-形的變化模式。H3K9的二甲基化、三甲基化和乙;憩F(xiàn)為時(shí)間和組織依賴性的表達(dá)模式。在雞胚出殼后,以上表遺傳指標(biāo)相對穩(wěn)定。 試驗(yàn)二旨在探討肉種雞日糧中添加有機(jī)鋅對子代肉雞全身免疫以及腸黏膜免疫機(jī)能的影響。將45周齡雌性Ross308肉種雞分別飼喂有機(jī)鋅或無機(jī)鋅0、50、300mg/kg6周后,收集種蛋并將出殼后的子代雛雞分別飼喂含有20、70mg/kg鋅的日糧。結(jié)果表明,種雞低鋅可降低蛋黃和新生子代血清的IgY、IgA、NDV、IBDV的濃度以及14日齡時(shí)外周血單核細(xì)胞的LPS刺激指數(shù),這種效果可持續(xù)到35日齡。然而,肉種雞日糧添加鋅尤其是有機(jī)鋅可顯著改善這一效果。此外,母體飼喂高劑量有機(jī)鋅可改善子代肉雞的空腸形態(tài),增加s1gA的分泌和杯狀細(xì)胞的數(shù)量,提高黏蛋白Mucin2和鋅指蛋白A20的表達(dá)、抑制NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的轉(zhuǎn)錄,同時(shí)上調(diào)PCNA的蛋白表達(dá),下調(diào)Caspase3的蛋白表達(dá),降低A20啟動(dòng)子區(qū)域的DNA甲基化但增加了組蛋白H3K9的乙;。相比子代肉雞飼喂正常鋅含量的日糧,子代肉雞飼喂低鋅日糧可顯著降低淋巴器官指數(shù)、CD4+/CD8+比例、IBDV和NDV抗體滴度;上調(diào)炎性細(xì)胞因子的基因表達(dá)并下調(diào)A20的基因表達(dá),降低A20H3K9的乙酰化水平。研究表明,肉種雞日糧添加有機(jī)鋅50-300mg/kg可通過改變A20的DNA甲基化和組蛋白乙;揎椧种芅F-κB通路的激活并增強(qiáng)子代肉雞的腸黏膜免疫機(jī)能。 試驗(yàn)三旨在探討肉種雞鋅營養(yǎng)能否改善子代肉雞抵抗炎癥反應(yīng)的能力。選用試驗(yàn)二中各不同種雞日糧處理組的子代雌性雛雞,分成8組,飼喂正常鋅含量(94.46mg/kg)的日糧,在子代肉雞15日齡時(shí)對其腹腔注射LPS或生理鹽水,檢測連續(xù)注射LPS4次后的免疫機(jī)能。結(jié)果表明,LPS可顯著降低肉仔雞的體重、體增重和耗料量以及注射LPS后8和24h的血清IgA和IgG含量,提高脾臟指數(shù),上調(diào)脾臟和空腸IL-8、IL-1β、TNF-α, NF-κBp65和A20的mRNA水平。肉種雞日糧添加有機(jī)鋅300mg/kg可顯著提高子代肉仔雞的血清IgA和IgG含量,抑制LPS誘導(dǎo)的脾臟和空腸NF-κBp65的轉(zhuǎn)錄以及炎性細(xì)胞因子的基因表達(dá)。研究表明,肉種雞日糧添加有機(jī)鋅300mg/kg可通過抑制NF-κB信號通路的活化緩解LPS誘導(dǎo)子代肉雞的炎癥反應(yīng)。 試驗(yàn)四旨在研究種雞鋅營養(yǎng)對子代肉雞免疫器官發(fā)育和腸黏膜屏障功能的影響。將雌性Ross308肉種雞分別飼喂有機(jī)鋅或無機(jī)鋅0、100mg/kg8周后,收集種蛋并將出殼后的子代雛雞飼喂低鋅日糧(總的鋅含量為5296mg/kg),并于15日齡時(shí)隔天注射LPS,連續(xù)注射4次。結(jié)果表明,種雞日糧低鋅可顯著降低種雞外周血T和B淋巴細(xì)胞的增殖,增加血清中IL-1β、IL-8的產(chǎn)量。肉種雞飼喂有機(jī)鋅日糧可促使更多的母源抗體轉(zhuǎn)移到子代肉雞的血液中,并改善子代雛雞B淋巴細(xì)胞的增殖和凋亡,同時(shí)上調(diào)法氏囊PCNA的蛋白表達(dá),下調(diào)Caspase-3的蛋白表達(dá);增加脾臟T淋巴細(xì)胞的增殖、CD3和CD4的比例和PCNA的蛋白表達(dá);同時(shí),緩解LPS誘導(dǎo)的脾臟淋巴細(xì)胞NF-κB信號通路的激活以及炎性細(xì)胞因子的釋放。肉種雞低鋅可導(dǎo)致子代肉雞12日齡空腸絨毛高度/隱窩深度比值降低,PCNA蛋白表達(dá)下調(diào);子代肉雞LPS注射后體重降低,血清中DAO含量升高,直腸灌胃HRP后45min和120min血清中HRP含量升高,E-Cadherin蛋白在空腸上皮細(xì)胞的分布和表達(dá)異常;空腸組織IL-8、IL-1β、 TNF-α、 TLR-4、NF-κBp65的基因表達(dá)增加、A20的轉(zhuǎn)錄下降,IκBα的蛋白表達(dá)下調(diào)。肉種雞日糧中添加100mg/kg的無機(jī)鋅或有機(jī)鋅可顯著改善子代肉雞在注射前后的腸道屏障和腸黏膜炎癥反應(yīng),有機(jī)鋅組在改善腸道屏障功能的效果好于無機(jī)鋅組,但在改善腸黏膜免疫機(jī)能方面鋅的來源無顯著差異。研究表明,肉種雞日糧中添加有機(jī)鋅100mg/kg可顯著增強(qiáng)子代肉雞的體液和細(xì)胞免疫機(jī)能以及免疫器官的發(fā)育和腸道屏障功能。 試驗(yàn)五旨在驗(yàn)證鋅指蛋白A20在鋅調(diào)控雞腸上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的作用。通過對雞腸上皮細(xì)胞感染A20基因RNA干擾病毒72h后,研究了鋅緩解LPS誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn),體外添加25μM鋅可顯著降低LPS誘導(dǎo)的促炎因子的產(chǎn)生。腸上皮細(xì)胞感染A20基因RNA干擾病毒后,A20的蛋白表達(dá)顯著下調(diào),IL-1β、IL-8、TNF-α的基因表達(dá)和蛋白分泌顯著升高,同時(shí)加劇LPS誘導(dǎo)的LL-8、LL-印的轉(zhuǎn)錄上調(diào)和IL-1p、TNF-a的蛋白分泌增加。此外,相對于對照組,加鋅可促進(jìn)胞漿中A20和NF-κB p65的蛋白表達(dá),并下調(diào)P-NF-κB p65的蛋白表達(dá);然而提前進(jìn)行A20基因沉默后,加鋅并不能改善由于A20基因沉默導(dǎo)致的胞漿中20、 NF-κB p65蛋白表達(dá)下調(diào)和胞漿中P-NF-κBp65、P-IκBa蛋白表達(dá)上調(diào)以及胞核中P-NF-κB p65的蛋白表達(dá)升高。研究結(jié)果表明,鋅可通過A20-NF-κB p65信號通路緩解LPS誘導(dǎo)的雞腸上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)。 綜上所述,肉種雞日糧中添加蛋氨酸羥基類似物螯合鋅300mg/kg可通過影響鋅指蛋白A20基因的表遺傳修飾促進(jìn)子代雛雞空腸鋅指蛋白A20的基因表達(dá),抑制LPS誘導(dǎo)的腸道炎癥反應(yīng),增強(qiáng)腸黏膜免疫機(jī)能。相比無機(jī)鋅組,肉種雞日糧添加有機(jī)鋅100mg/kg在改善子代雛雞的免疫機(jī)能方面無顯著差異,但可促進(jìn)子代雛雞的腸黏膜屏障功能。鋅可通過上調(diào)A20的蛋白表達(dá)緩解LPS誘導(dǎo)雞腸上皮細(xì)胞NF-κB信號通路的激活和炎癥的產(chǎn)生;然而通過感染A20干擾病毒后,鋅并不能發(fā)揮其抗炎的作用。因此,肉種雞日糧添加有機(jī)鋅增強(qiáng)子代肉雞腸黏膜免疫機(jī)能是通過促進(jìn)鋅指蛋白A20的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。
本文關(guān)鍵詞:肉種雞鋅營養(yǎng)對子代肉雞免疫機(jī)能的影響及其分子機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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