本文選題：向日葵黃萎病　切入點(diǎn)：大麗輪枝菌　出處：《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：向日葵黃萎病是向日葵上普遍發(fā)生的病害,近年來由于向日葵商品種子的頻繁運(yùn)輸及向日葵輪作倒茬的困難,使得黃萎病不斷加重,成為制約我國向日葵產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素。本研究以我國主要向日葵產(chǎn)區(qū)采集分離到的向日葵黃萎病菌為材料,研究推遲播期對(duì)向日葵黃萎病發(fā)生及向日葵產(chǎn)量的影響;向日葵種皮攜帶黃萎病菌的可能性;向日葵黃萎病菌的遺傳多樣性;以及通過R-PCR技術(shù)篩選與向日葵黃萎病菌致病力有關(guān)的候選基因,得到以下結(jié)論:1.在2010-2012年的不同地點(diǎn)的進(jìn)行的不同播期對(duì)向日葵黃萎病發(fā)程度的試驗(yàn)中,除2010年在內(nèi)蒙古巴彥淖爾市五原縣,隨著播期的推遲黃萎病發(fā)病程度呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢外,其余各點(diǎn)在不同年份的播期實(shí)驗(yàn)中,黃萎病發(fā)生程度都隨向日葵播期推遲而下降,說明推遲向日葵播期可以降低黃萎病的發(fā)生程度。同時(shí),不同播期的測產(chǎn)結(jié)果表明隨著播期推遲,向日葵黃萎病害逐漸減輕,其產(chǎn)量也呈現(xiàn)出逐漸增高的態(tài)勢。2.向日葵種子帶菌的研究結(jié)果表明,利用真菌的通用引物對(duì)ITS1/4進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)出現(xiàn)的雙帶型,說明在向日葵種子種皮上可能存在包括黃萎病菌在內(nèi)的不同類型的其他真菌。而利用黃萎病菌的特異引物VD1/2進(jìn)行巢氏PCR再次擴(kuò)增出單一的條帶的結(jié)果不僅說明黃萎病菌引物VD1/2的特異性,同時(shí)也表明向日葵種皮攜帶有黃萎病菌。同時(shí),結(jié)合熒光顯微觀察我們確定了向日葵種子的種皮能夠攜帶黃萎病菌進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播。3.本研究利用國際通用的大麗輪枝菌不同親合組的標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)57株來自我國不同向日葵產(chǎn)區(qū)的黃萎菌進(jìn)行營養(yǎng)親和群的劃分結(jié)果表明,供試的57份菌株可以被劃分為三個(gè)不同的營養(yǎng)親和群即VCG4B、VCG4A和VCG2B,其中VCG4B為優(yōu)勢親和群體。親和群VCG2B和VCG4B中包括的黃萎病菌菌株與其采集的地域分布沒有相關(guān)性。4.利用國際黃萎病菌生理小種1和2的通用引物對(duì)我國向日葵種植區(qū)黃萎病菌進(jìn)行生理小種鑒定結(jié)果表明,所有分離到的向日葵黃萎菌都是2號(hào)生理小種。對(duì)來源于我國不同向日葵種植區(qū)的黃萎菌進(jìn)行交配型鑒定結(jié)果表明,向日葵大麗輪枝菌中有MAT1-1和MAT1-2兩種交配型,其中MAT1-1型為優(yōu)勢交配型。5.對(duì)我國主要向日葵產(chǎn)區(qū)的向日葵大麗輪枝菌進(jìn)行IGS序列系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)行分析的結(jié)果表明,供試的57份向日葵黃萎病菌菌株被劃分為成3個(gè)大的聚類群,其中大多數(shù)的鑒定為VCG4親和群的菌株都分布在一個(gè)群中,而VCG2B型的菌株卻分布在三個(gè)不同的聚類群中,說明VCG2B親和群的菌株在遺傳上具有多源性。6.利用R-PCR技術(shù)篩選得到一些向日葵黃萎病菌致病相關(guān)基因的EST序列,通過對(duì)所篩選到的序列進(jìn)行功能注釋,發(fā)現(xiàn)編碼甘露醇-1-磷酸5-脫氫酶的基因,編碼鈣調(diào)蛋白、糖苷水解酶基因,編碼過氧化物酶、STI35蛋白基因可能參與了向日葵大麗輪枝菌的致病過程。
[Abstract]:Sunflower verticillium wilt is a common disease in sunflower. In recent years, because of the frequent transportation of sunflower commercial seeds and the difficulty of rotation of sunflower rotation, Verticillium wilt becomes more and more serious. This study studied the effect of delaying sowing date on the occurrence of sunflower verticillium wilt and the yield of sunflower. The possibility of sunflower seed coat carrying Verticillium wilt, genetic diversity of sunflower Verticillium wilt, and screening candidate genes related to virulence of sunflower Verticillium wilt by R-PCR, The following conclusions are drawn: 1.In the experiment on the incidence of sunflower verticillium wilt in different locations in 2010-2012, except in Wuyuan County of Bayannur City, Inner Mongolia on 2010, With the delay of sowing date, the incidence degree of Verticillium wilt increased first and then decreased. In the experiment of sowing date in different years, the occurrence degree of Verticillium wilt decreased with the delay of sunflower sowing date. The result showed that delaying the sowing date of sunflower could reduce the occurrence degree of Verticillium wilt, and the result of different sowing date showed that the damage of sunflower Verticillium wilt gradually decreased with the delay of sowing date. The results of the study of sunflower seed carrying bacteria showed that the double band type appeared in the PCR amplification of ITS1/4 by using universal primers of fungi. It is suggested that there may be different types of fungi including Verticillium wilt on the seed coat of sunflower. However, the result of using the specific primer VD1/2 of Verticillium wilt to amplify a single band by nested PCR not only shows that the single band is yellow. The specificity of primer VD1/2 of Fusarium wilt, It also shows that sunflower seed coat carries Verticillium wilt. Combined with fluorescence microscopic observation, we determined that the seed coat of sunflower seeds can carry Verticillium wilt for long-distance transmission. 3. In this study, 57 standard strains from different affinity groups of Verticillium dahliae were used in this study. The results of the classification of the vegetative affinity group of wilt fungus in the same sunflower producing area showed that, The 57 strains tested can be divided into three different vegetative affinity groups: VCG4BnVCG4A and VCG2B. among them, VCG4B is the dominant affinity group. The Verticillium wilt strains included in VCG2B and VCG4B have no correlation with the regional distribution. The results of identification of Verticillium wilt strains in sunflower planting area of China by using universal primers of 1 and 2 species of Verticillium wilt showed that: 1 and 2 primers were used to identify Verticillium wilt in sunflower growing area of China. All the sunflower wilt bacteria isolated were 2 physiological races. The results of mating type identification showed that there were two mating types of MAT1-1 and MAT1-2 in the plants of different sunflower growing areas in China. Among them, MAT1-1 type is the dominant mating type. 5. The IGS sequence phylogeny of Vibrio sunflower in main sunflower producing areas in China was analyzed. The results showed that 57 strains of Verticillium wilt strains were divided into three clusters. Most of the strains identified as VCG4 affinity groups were found in one group, while VCG2B type strains were found in three different clusters. The results showed that the strains with VCG2B affinity group had multi-source. 6. the EST sequences of some pathogenic genes of Verticillium wilt were screened by R-PCR, and the function of the selected genes was annotated. It was found that the genes encoding mannitol -1-phosphate 5-dehydrogenase, calmodulin, glucoside hydrolase and peroxidase STI35 may be involved in the pathogenicity of Vibrio dahliensis.
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S435.655

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本文編號(hào)：1606331