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土壤中大麗輪枝菌微菌核的定量流行學(xué)研究

發(fā)布時間:2018-03-13 06:48

  本文選題:棉花黃萎病 切入點(diǎn):病害預(yù)警 出處:《西北農(nóng)林科技大學(xué)》2016年博士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】:大麗輪枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)是一種分布廣、破壞力強(qiáng)的土傳病原真菌,可以導(dǎo)致400多種植物黃萎病害。微菌核作為大麗輪枝菌的休眠結(jié)構(gòu),可以在土壤中存活10年以上,是病害的初侵染來源。大麗輪枝菌引起的棉花黃萎病是典型的單循環(huán)病害,在播種前進(jìn)行風(fēng)險預(yù)測、制定防治策略是減少產(chǎn)量損失的有效途徑。但是微菌核快速定量技術(shù)和合理的田間抽樣技術(shù)的缺乏,限制了對該病害定量流行學(xué)及預(yù)報(bào)預(yù)測技術(shù)的深入研究。本論文通過定量檢測土壤中的微菌核,在個體棉株水平上研究了土壤中微菌核密度與發(fā)病概率及發(fā)病級別的關(guān)系;以株距為最小考查距離,研究了棉田微菌核和發(fā)病植株的空間分布;評估了生物熏蒸衍生產(chǎn)品對土壤中微菌核活力和土壤微生物群落的影響。取得以下主要結(jié)果:1.建立了土壤中大麗輪枝菌微菌核的快速定量檢測方法。結(jié)合土壤水篩提純微菌核和qPCR技術(shù),建立了適合田間大量土樣中微菌核的快速定量檢測方法(水篩+qPCR方法)。該方法具有特異性強(qiáng)、靈敏度高及快速準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),檢測下限為每克土0.5個微菌核,檢測結(jié)果與傳統(tǒng)的選擇性培養(yǎng)基平板法檢測結(jié)果具有顯著相關(guān)性(r=0.98)。2.感病和抗病棉花品種的發(fā)病閾值分別為每克土壤4和7個微菌核。采集5塊棉田的405個發(fā)病棉花和健康棉花根圍土樣,利用水篩+qPCR方法檢測土樣中微菌核密度。通過廣義線性模型擬合土壤中微菌核密度與棉花黃萎病發(fā)病概率以及發(fā)病級別的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)logistic模型(R2=0.62)和累積logit模型(R2=0.79)可以分別擬合這兩種關(guān)系,但是不同抗性棉花品種的擬合模型參數(shù)不同。這表明了土壤中微菌核密度越高,棉花黃萎病發(fā)病概率和發(fā)病級別也越高。以冀棉11和中植棉2號為感病和抗病品種的代表,明確了感病和抗病棉花品種的發(fā)病閾值(50%發(fā)病概率)分別為每克土壤4和7個微菌核。3.棉田土壤中大麗輪枝菌微菌核和病株在空間距離1.0 m以下呈聚集分布。以株距為最小空間距離,采集3塊棉田中不同空間距離下的210個土壤耕層樣品,利用水篩+qPCR方法檢測中微菌核密度。對不同空間距離下土樣中微菌核密度進(jìn)行自相關(guān)分析,結(jié)果表明,棉田土壤中微菌核密度呈偏態(tài)分布,同一田塊內(nèi)不同部位的微菌核密度差異較大;微菌核在行內(nèi)空間距離1.0 m以下顯著相關(guān)。對6塊棉田中發(fā)病棉株的空間位置進(jìn)行自相關(guān)分析,結(jié)果表明行內(nèi)病株也在空間距離1.0 m內(nèi)聚集分布,行間病株的空間分布屬隨機(jī)分布。因此,棉田土壤1.0 m間隔的隨機(jī)采樣方案可以提供微菌核密度的無偏估計(jì)。4.候選生物熏蒸產(chǎn)品可以有效減少土壤中微菌核密度,且對土壤微生物群落無顯著影響。通過田間微小區(qū)試驗(yàn)評估了3種生物熏蒸衍生產(chǎn)品單獨(dú)和混合使用對土壤中微菌核活力的影響,并在田間試驗(yàn)條件下,采用Metabarcording測序技術(shù)研究了土壤熏蒸對土壤微生物群落的影響。結(jié)果表明,BioFence?、萜類化合物和沼渣都能顯著減少土壤中微菌核數(shù)量,但混合使用生物熏蒸產(chǎn)品未能顯著提高殺菌效率。萜類化合物和BioFence?處理的殺菌效率達(dá)到60%以上,對土壤中細(xì)菌和真菌群落結(jié)構(gòu)無顯著影響;而化學(xué)熏蒸劑氯化苦處理后4周可顯著改變土壤中細(xì)菌和真菌的種群結(jié)構(gòu),處理后16周土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)恢復(fù)到對照水平,真菌群落結(jié)構(gòu)尚未恢復(fù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S432.4
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本文編號:1605240

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