本文關(guān)鍵詞：香煙煙霧和脂多糖對大鼠肺SP-B蛋白表達(dá)的影響

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【摘要】：背景炎癥和香煙煙霧是慢性呼吸功能不全的危險(xiǎn)因素。在肺組織慢性炎性損傷過程中纖維組織增生、肺泡上皮細(xì)胞變性、肺泡活性物質(zhì)數(shù)量和活性下降,是呼吸功能障礙的前提。表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白-B (Surfactantassociated protein B, SP-B)是肺泡表面活性物質(zhì)中最重要的蛋白成分。革蘭氏陰性菌是肺部感染常見的致病菌,脂多糖是革蘭氏陰性菌釋放的生物活性物質(zhì)。因此本研究以香煙煙霧暴露大鼠為研究對象,脂多糖大鼠氣管內(nèi)滴注模擬COPD氣道炎癥環(huán)境,觀察香煙煙霧和脂多糖對大鼠SP-B表達(dá)的影響,并探討其機(jī)制,為慢性呼吸功能障礙的防治提供實(shí)驗(yàn)的依據(jù)和理論基礎(chǔ)。目的通過對正常大鼠、香煙煙霧暴露大鼠、內(nèi)毒素處理大鼠和香煙煙熏暴露+內(nèi)毒素處理大鼠的呼吸曲線參數(shù)、動脈血氧分壓和二氧化碳分壓、肺組織SP-B蛋白表達(dá)及SP-B mRNA水平的對比,探討香煙煙霧和內(nèi)毒素對大鼠肺組織表達(dá)SP-B的影響。方法選擇SD大鼠40只,數(shù)字隨機(jī)法分為四組,每組Pc0210只。第一組大鼠正常對照組飼養(yǎng),不做任何處理。第二組大鼠每日煙霧暴露2次,每次30 min,持續(xù)暴露28d。第三組大鼠不進(jìn)行煙霧暴露,第1d、第14d以1 mg.Kg-1的劑量氣管內(nèi)滴注脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)。第四組大鼠每日煙霧暴露2次,每次30 min,持續(xù)暴露28d,且在第1d、第14d以1 mg.Kg-1的劑量氣管內(nèi)滴注脂多糖,又稱實(shí)驗(yàn)組。第29d將四組大鼠4%水合氯醛(10ml.kg-1)腹腔注射麻醉,頸總動脈插管術(shù)和頸外靜脈插管術(shù),暴露膈肌、兩個(gè)針式電極將膈肌與BL-420生物信號采集處理系統(tǒng)相連。四組大鼠均保留呼吸曲線,取動脈血和肺組織標(biāo)本,完成①各組大鼠呼吸曲線參數(shù)、動脈血氧分壓、動脈血二氧化碳分壓的測算。②酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測各組大鼠肺組織勻漿中SP-B的含量。③免疫組化SP法觀察各組大鼠肺組織細(xì)胞SP-B表達(dá)、HE染色光鏡下觀察各組家大鼠肺組織形態(tài)。④逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)檢測肺組織中SP-B蛋白mRNA水平。對上述結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)對比分析。結(jié)果①吸氣持續(xù)時(shí)間及呼吸幅度,實(shí)驗(yàn)組大鼠低于第二組和第三組,第二組和第三組低于第一組,第二組和第三組呼吸幅度相比無差異,但第二組吸氣持續(xù)時(shí)間低于第三組；呼氣持續(xù)時(shí)間及呼吸頻率,實(shí)驗(yàn)組大鼠高于第二組和第三組、第二組和第三組高于第一組,第二組和第三組相比無差異。②血?dú)庵笜?biāo)比較：Pa02,實(shí)驗(yàn)組大鼠低于第二組和第三組,第二組和第三組低于第一組,第二組和第三組相比無差異。PaCO2,實(shí)驗(yàn)組大鼠高于第二組,第二組高于第三組,第三組高于第一組。③ELISA法檢測肺組織勻漿中SP-B含量,實(shí)驗(yàn)組大鼠肺組織勻漿中SP-B蛋白含量低于第二組、第二組低于第三組,第三組低于第一組。④HE染色光鏡下肺組織結(jié)構(gòu)對比：實(shí)驗(yàn)組大鼠呈現(xiàn)呈現(xiàn)間質(zhì)增生、肺泡結(jié)構(gòu)破壞的病理表現(xiàn),第二組大鼠也存在間質(zhì)增生、肺泡結(jié)構(gòu)受損的表現(xiàn),但程度較實(shí)驗(yàn)組輕,第三組大鼠呈現(xiàn)炎癥損傷表現(xiàn),第一組大鼠正常肺組織結(jié)構(gòu)。免疫組化：實(shí)驗(yàn)組SP-B蛋白表達(dá)低于第二組,第二組低于第三組,第三組低于第一組。⑤實(shí)驗(yàn)組SP-B蛋白mRNA水平與第二組相比下調(diào)、第二組較第三組下調(diào),第三組又低于第一組。上述結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論香煙煙霧/LPS作為單獨(dú)的危險(xiǎn)因素可使SP-B的表達(dá)下調(diào),香煙煙霧和LPS共同作用使SP-B的表達(dá)下調(diào)更明顯。SP-B的下調(diào)可使肺順應(yīng)性進(jìn)一步下降,肺換氣減少和肺通氣量減少。
【關(guān)鍵詞】：香煙煙霧 脂多糖 表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白-B 呼吸功能 大鼠
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R56
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-12
• 材料和方法12-19
• 結(jié)果19-25
• 討論25-29
• 小結(jié)29-30
• 參考文獻(xiàn)30-37
• 綜述：呼吸功能障礙機(jī)制的研究進(jìn)展37-54
• 參考文獻(xiàn)45-54
• 附錄54-56
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況56-57
• 致謝57-58
• 個(gè)人簡歷58

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本文編號：570511