本文關鍵詞：循經(jīng)取穴針刺對心肌缺血大鼠模型ATP敏感性鉀通道和蛋白激酶相關基因調(diào)控作用影響的研究

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【摘要】：目 的：該實驗采用能酸異丙腎上腺素制造心肌缺血大鼠模型,運用RT-PCR檢測技術,通過觀察針刺不同經(jīng)脈穴位對心肌缺血大鼠模型心肌細胞ATP敏感鉀通道(KATP通道)基因Kir6.1、Kir6.2及其結合蛋白SUR2A、SUR2B和蛋白激酶PKA、PKG、PKCβ2的mRNA表達水平的影響,從ATP敏感鉀通道及蛋白激酶基因表達差異角度,探討電針內(nèi)關穴抗心肌缺血在細胞膜離子通道基因表達層面的作用機制,求證經(jīng)穴效應的循經(jīng)特異性,為臨床針刺治療心肌缺血提供相應的借鑒。材料與方法：72只健康雄性SD大鼠(SPF級),自由攝取飲用礦泉水和普通清潔級飼料,以適應性喂養(yǎng)7天。應用隨機數(shù)字表法,從72只大鼠中隨機抽取10只,作為對照組。其余62只大鼠,連續(xù)2天采用皮下多點位注射異丙腎上腺素以建立心肌缺血大鼠模型,對照組10只大鼠在相同位置注射等量的生理鹽水,并于造模前、后檢測各組大鼠心電圖。剔除造模不成功(心電圖不合格或死亡者)的22只大鼠,將剩下的40只大鼠隨機分為4組,即：模型組、內(nèi)關組、列缺組、非經(jīng)非穴組,每組10只。在清醒狀態(tài)下,對內(nèi)關組、列缺組、非經(jīng)非穴組大鼠的相應穴位進行電針治療,每日1次,連續(xù)7天。對照組和模型組的大鼠,不施加針刺,但每天都采用同樣的抓取和固定,以排除人為的干擾因素。治療結束后,再次檢測各組大鼠心電圖。采用斷脊法,將各組大鼠處死,開胸以獲得心肌組織。采用實時熒光定量PCR (RT-PCR)技術,檢測心肌細胞KATP通道相關基因Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B和蛋白激酶PKA、PKG、PKCβ2以及參考基因GAPDH表達的變化,進行統(tǒng)計學處理。結 果：1.治療前后,各組大鼠左心室肌細胞Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B mRNA表達情況：與對照組比較：模型組的各目的基因(Kir6.1、Kir62、SUR2A、SUR2B) mRNA相對表達量明顯升高,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與模型組比較：內(nèi)關組、列缺組各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B)的相對表達量明顯降低,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；非經(jīng)非穴組各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA的相對表達量無明顯變化,沒有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與內(nèi)關組比較：列缺組、非經(jīng)非穴組各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA的相對表達量明顯升高,有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與列缺組比較：非經(jīng)非穴組各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、 SUR2B) mRNA的相對表達量明顯升高,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.治療前后,各組大鼠左心室肌細胞PKA、PKG、PKCβ2mRNA表達情況：與對照組比較：模型組目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相對表達量明顯升高,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與模型組比較：內(nèi)關組、列缺組各目的基因(PKA、 PKG、PKCβ2)的相對表達量明顯降低,具有統(tǒng)計學意義(p0.05)；非經(jīng)非穴組各目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相對表達量無明顯變化,沒有統(tǒng)計學意義(p0.05)。與內(nèi)關組比較：列缺組、非經(jīng)非穴組各目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相對表達量明顯升高,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與列缺組比較：非經(jīng)非穴組各目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相對表達量明顯升高,具有統(tǒng)計學意義(p0.05)結 論：1.電針內(nèi)關穴、列缺穴降低心肌細胞KATP (Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA和蛋白激酶(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA表達量的作用較非經(jīng)非穴明顯,表明電針內(nèi)關穴、列缺穴都具有抗心肌缺血的效果；2.電針內(nèi)關穴降低心肌細胞KATP (Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA和蛋白激酶(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA表達量的作用較列缺穴明顯,表明電針內(nèi)關穴抗心肌缺血的效果優(yōu)于列缺穴；3.電針手厥陰心包經(jīng)內(nèi)關穴抗心肌缺血具有循經(jīng)特異性；4.電針內(nèi)關穴降低心肌缺血大鼠心肌細胞KATP (Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA基因表達量的結果,與以往文獻中成藥冠心康干預結果相反,提示電針內(nèi)關穴抗心肌缺血機理可能是干預啟動了機體自我修復的內(nèi)源性保護機制,促進了機體自身調(diào)節(jié)機能的良性轉歸。
【關鍵詞】：針刺 內(nèi)關 心肌缺血 鉀離子通道 K_(ATP)通道 蛋白激酶 循經(jīng)特異性
【學位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R245;R-332
【目錄】：

• 中文論著摘要4-6
• 英文論著摘要6-9
• 英文縮略語9-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-18
• 實驗結果18-21
• 討論21-28
• 結論28-29
• 參考文獻29-33
• 附錄 綜述33-48
• 參考文獻43-48
• 致謝48-49
• 個人簡介49

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本文編號：555825