發(fā)布時(shí)間：2017-07-13 18:17

  本文關(guān)鍵詞：海螵蛸對(duì)胃粘膜損傷保護(hù)及其凝血、止血功效研究

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【摘要】：海螵蛸,又名烏賊骨,為傳統(tǒng)中藥材,具有抗胃潰瘍、凝血、止血、成骨等生物活性。但是,在烏賊的加工過(guò)程中,海螵蛸通常被丟棄,造成資源浪費(fèi)。如果能根據(jù)海螵蛸自身生物活性開發(fā)成新型藥物或保健食品,不僅能變廢為寶,而且更能產(chǎn)生良好的經(jīng)濟(jì)效益。本試驗(yàn)以海螵蛸為主要原料,采用先進(jìn)的分析手段對(duì)海螵蛸的結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè),驗(yàn)證海螵蛸胃粘膜損傷保護(hù)作用、凝血、止血活性,并研制出治療胃潰瘍的片劑。主要研究?jī)?nèi)容如下：1、海螵蛸物質(zhì)結(jié)構(gòu)及其主要成分的分析研究。采用環(huán)境掃描電鏡、紅外光譜、X射線衍射、電感耦合等離子體質(zhì)譜4種手段對(duì)海螵蛸的結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)并分析,初步探究其結(jié)構(gòu)與部分生物活性的關(guān)系。經(jīng)電鏡掃描發(fā)現(xiàn),海螵蛸腹面疏松層整體呈房架結(jié)構(gòu),由疏松多孔的壁龕樣的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)形成。而粉碎后的海螵蛸,其網(wǎng)格結(jié)構(gòu)完全被破壞。但是,經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)：粉碎后海螵蛸粉末仍具有保護(hù)胃粘膜損傷、凝血、止血的活性,這說(shuō)明此網(wǎng)格結(jié)構(gòu)與其凝血、止血、保護(hù)胃粘膜損傷活性關(guān)系不大。由紅外掃描和X射線衍射分析可知：海螵蛸含有文石結(jié)構(gòu)的碳酸鈣,完整海螵蛸與其腹層相比化學(xué)成分基本相同,但文石含量不同。此外,通過(guò)電感耦合等離子體質(zhì)譜檢測(cè),海螵蛸含70種無(wú)機(jī)元素,其中含大量的Ca,少量的Na、Sr、Fe、 P、K、 Mg,微量的Si、Zn、Cu、Al、Br、Ba、B、Mn、Ni等。2、海螵蛸對(duì)乙醇誘導(dǎo)的急性胃粘膜損傷的保護(hù)作用研究。在Wistar大鼠體內(nèi)營(yíng)造乙醇誘導(dǎo)的急性胃粘膜損傷模型,以不同劑量的海螵蛸對(duì)模型Wistar大鼠進(jìn)行灌胃給藥,測(cè)定胃粘膜的損傷面積、損傷指數(shù)、損傷抑制率、胃液體積、酸度、MDA、GSH、T-SOD、PEG2、MPO等指標(biāo),比較各組對(duì)乙醇誘導(dǎo)的急性胃粘膜損傷的保護(hù)效果。結(jié)果顯示：海螵蛸具有保護(hù)乙醇誘導(dǎo)的胃粘膜損傷的作用。其作用機(jī)制可能是：海螵蛸中的鈣與胃酸產(chǎn)生中和作用,提高胃液pH值,減輕其對(duì)胃粘膜侵蝕作用。同時(shí),可調(diào)節(jié)胃粘膜組織中NO含量,加強(qiáng)胃粘膜的屏障功能；促進(jìn)胃液、胃組織、血清中PGE2的合成,增強(qiáng)黏膜組織的抵抗能力,加速潰瘍的愈合。此外,提高SOD的活力,清除氧自由基和減輕脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),降低胃組織和血清中MDA的含量,減輕對(duì)胃粘膜細(xì)胞的損傷,不同程度的降低胃組織中MPO的活性,參與調(diào)節(jié)胃粘膜損傷的炎癥反應(yīng),可能是其保護(hù)胃粘膜的另一機(jī)制。3、海螵蛸凝血作用效果研究。通過(guò)分析海螵蛸懸浮液對(duì)不同實(shí)驗(yàn)組小鼠出血時(shí)間和凝血時(shí)間的影響,驗(yàn)證其凝血效果,并對(duì)可能的凝血機(jī)制進(jìn)行探討,為新型海螵蛸藥物的開發(fā)提供理論依據(jù)。結(jié)果表明,在250g/L劑量下,海螵蛸的出血時(shí)間和凝血時(shí)間分別比生理鹽水對(duì)照組縮短11.45 mmin和1.38 min。海螵蛸各劑量組均能明顯縮短小鼠的出血時(shí)間和凝血時(shí)間,且不同程度脫鈣后的海螵蛸固形物組的出血時(shí)間和凝血時(shí)間與生理鹽水對(duì)照組相比均差異極顯著。這表明,不論海螵蛸中鈣含量多寡,均具有凝血活性,且未脫鈣海螵蛸的凝血效果最好,對(duì)劑量也有一定的依賴性。而單純的碳酸鈣卻不具有凝血活性。海螵蛸能明顯縮短凝血時(shí)間,提示海螵蛸凝血活性可能與各種凝血因子的含量及它們的功能有關(guān)。海螵蛸能明顯縮短出血時(shí)間,這提示海螵蛸可能與血小板數(shù)胃粘膜損傷量、血小板的功能、毛細(xì)血管功能、組織因子數(shù)量及組織收縮力等有關(guān)。4、海螵蛸體外止血效果研究。通過(guò)小鼠試驗(yàn),比較海螵蛸與其他常見(jiàn)的止血材料的止血性能。以豚鼠模型,評(píng)價(jià)海螵蛸粉末對(duì)豚鼠背部健康皮膚和破損皮膚產(chǎn)生刺激的反應(yīng),探究其致敏性。通過(guò)小鼠股動(dòng)脈橫切面止血試驗(yàn),證實(shí)了超微粉碎海螵蛸止血時(shí)間最短為(1.21±0.11)min,止血速度短于云南白藥和淀粉,止血效果理想。經(jīng)豚鼠背部健康皮膚和破損皮膚的單次接觸試驗(yàn)證明,海螵蛸粉末對(duì)皮膚無(wú)刺激性、無(wú)致敏性、安全性強(qiáng)。因此,海螵蛸具有良好的止血效果和無(wú)致敏性。5、海螵蛸片劑的制備工藝研究。通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)及正交試驗(yàn)優(yōu)化影響片劑質(zhì)量的因素條件,獲得最佳的片劑配方：麥芽糊精1.0g、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉(CCNa)添加量3%、硬脂酸鎂添加量0.2%。按此配方,得到的片劑外觀光潔,片重差異、崩解時(shí)間均符合藥典要求且重現(xiàn)性好。
【關(guān)鍵詞】：海螵蛸 生物活性 胃粘膜損傷 凝血 止血
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R285.5
【目錄】：

• 摘要9-11
• Abstract11-14
• 第一章 緒論14-25
• 1.1 海螵蛸的形態(tài)14
• 1.2 海螵蛸的結(jié)構(gòu)14-15
• 1.3 海螵蛸的化學(xué)成分15
• 1.4 海螵蛸生物活性15-21
• 1.4.1 中和胃酸15-16
• 1.4.2 成骨16
• 1.4.3 降低血磷和甲狀腺素16-17
• 1.4.4 凝血17-18
• 1.4.5 抗胃潰瘍18-21
• 1.4.5.1 胃潰瘍的成因18
• 1.4.5.2 建立潰瘍模型的方法18-20
• 1.4.5.3 粘膜損傷評(píng)價(jià)方法20
• 1.4.5.4 海螵蛸抗?jié)兊难芯楷F(xiàn)狀20-21
• 1.5 海螵蛸應(yīng)用現(xiàn)狀21-23
• 1.5.1 作組織支架的材料21
• 1.5.2 制備乳酸鈣21
• 1.5.3 海螵蛸中甲殼素的研究利用21-22
• 1.5.4 海螵蛸中多糖的研究利用22
• 1.5.5 藥劑應(yīng)用22-23
• 1.6 本論文的研究意義及研究?jī)?nèi)容23-25
• 1.6.1 研究意義23
• 1.6.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容23-25
• 第二章 海螵蛸結(jié)構(gòu)分析與主要化學(xué)成分測(cè)定25-32
• 2.1 材料與儀器25
• 2.1.1 材料與試劑25
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器25
• 2.2 試驗(yàn)方法25-26
• 2.2.1 環(huán)境掃描電鏡的測(cè)定25
• 2.2.2 紅外光譜的測(cè)定25-26
• 2.2.3 X射線衍射的測(cè)定26
• 2.2.4 電感耦合等離子體質(zhì)譜的測(cè)定26
• 2.3 結(jié)果與討論26-31
• 2.3.1 環(huán)境掃描電鏡的分析26-28
• 2.3.2 紅外光譜的分析28-29
• 2.3.3 X射線衍射的分析29-30
• 2.3.4 電感耦合等離子體質(zhì)譜的分析30-31
• 2.4 小結(jié)31-32
• 第三章 海螵蛸乙醇誘導(dǎo)的大鼠急性胃粘膜損傷保護(hù)作用研究32-50
• 3.1 材料與儀器32-33
• 3.1.1 試驗(yàn)材料32
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器32-33
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物33
• 3.2 試驗(yàn)方法33-38
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)分組33
• 3.2.2 給藥與造模33-34
• 3.2.2.1 給藥33-34
• 3.2.2.2 造模34
• 3.2.3 標(biāo)本采集與處理34-35
• 3.2.3.1 樣本采集34
• 3.2.3.2 樣本處理34-35
• 3.2.4 胃粘膜損傷指標(biāo)35
• 3.2.4.1 胃粘膜損傷指數(shù)35
• 3.2.4.2 胃粘膜損傷抑制率35
• 3.2.4.3 胃粘膜損傷面積的測(cè)定35
• 3.2.5 胃液中胃液體積、胃液酸度、NO含量、PEG_2指標(biāo)35-36
• 3.2.5.1 胃液體積的測(cè)定35-36
• 3.2.5.2 胃液酸度的測(cè)定36
• 3.2.5.3 胃液中NO含量的測(cè)定36
• 3.2.5.4 胃液中PEG_2含量的測(cè)定36
• 3.2.6 胃組織中MDA、GSH、T-SOD、PEG_2、MPO等指標(biāo)36-37
• 3.2.6.1 胃組織中MDA含量的測(cè)定36
• 3.2.6.2 胃組織中GSH含量的測(cè)定36-37
• 3.2.6.3 胃組織中T-SOD含量的測(cè)定37
• 3.2.6.4 胃組織中MPO含量的測(cè)定37
• 3.2.6.5 胃組織中PEG_2含量的測(cè)定37
• 3.2.7 血清中MDA、T-SOD、PEG_2指標(biāo)37-38
• 3.2.7.1 血清中MDA含量的測(cè)定37
• 3.2.7.2 血清中T-SOD含量的測(cè)定37-38
• 3.2.7.3 血清中PGE_2含量的測(cè)定38
• 3.2.8 統(tǒng)計(jì)分析38
• 3.3 結(jié)果與討論38-48
• 3.3.1 海螵蛸對(duì)大鼠體重的影響38-39
• 3.3.2 海螵蛸對(duì)大鼠胃粘膜損傷的影響39-40
• 3.3.2.1 胃粘膜肉眼觀察情況39
• 3.3.2.2 海螵蛸對(duì)胃粘膜損傷指數(shù)、抑制率、面積的影響39-40
• 3.3.3 海螵蛸對(duì)胃液體積、pH、NO等指標(biāo)的影響40-42
• 3.3.4 海螵蛸對(duì)胃液、胃組織、血清中PEG_2指標(biāo)的影響42-43
• 3.3.5 海螵蛸對(duì)胃組織、血清中MDA指標(biāo)的影響43-45
• 3.3.6 海螵蛸對(duì)GSH指標(biāo)的影響45-46
• 3.3.7 海螵蛸對(duì)胃組織、血清中T-SOD指標(biāo)的影響46-47
• 3.3.8 海螵蛸對(duì)MPO指標(biāo)的影響47-48
• 3.4 小結(jié)48-50
• 第四章 海螵蛸凝血作用效果研究50-58
• 4.1 材料與方法50-53
• 4.1.1 試驗(yàn)材料50
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物50-51
• 4.1.3 試驗(yàn)方法51-53
• 4.1.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)51-53
• 4.1.3.2 動(dòng)物出血時(shí)間和凝血時(shí)間的測(cè)定測(cè)定53
• 4.1.4 統(tǒng)計(jì)分析53
• 4.2 結(jié)果與討論53-57
• 4.2.1 海螵蛸對(duì)小鼠體重、尾長(zhǎng)、出血時(shí)間、凝血時(shí)間的影響53-54
• 4.2.2 碳酸鈣對(duì)小鼠體重、尾長(zhǎng)、出血時(shí)間、凝血時(shí)間的影響54-55
• 4.2.3 不同含鈣量海螵蛸對(duì)小鼠體重、尾長(zhǎng)、出血時(shí)間、凝血時(shí)間的影響55-56
• 4.2.4 脫鈣后的海螵蛸粉末對(duì)小鼠體重、尾長(zhǎng)、出血時(shí)間、凝血時(shí)間的影響56-57
• 4.3 小結(jié)57-58
• 第五章 海螵蛸體外止血效果研究58-65
• 5.1 材料與儀器58-59
• 5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料58
• 5.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物58-59
• 5.2 試驗(yàn)方法59-61
• 5.2.1 海螵蛸止血實(shí)驗(yàn)59
• 5.2.2 海螵蛸體外止血時(shí)間的測(cè)定59
• 5.2.3 海螵蛸皮膚刺激試驗(yàn)59-61
• 5.2.3.1 試驗(yàn)分組59
• 5.2.3.2 脫毛處理59-60
• 5.2.3.3 皮膚單次接觸性試驗(yàn)60
• 5.2.3.4 致敏性觀察60-61
• 5.3 結(jié)果與討論61-64
• 5.3.1 海螵蛸止血效果驗(yàn)證61-62
• 5.3.2 海螵蛸的皮膚刺激性研究62-64
• 5.4 小結(jié)64-65
• 第六章 正交設(shè)計(jì)優(yōu)化海螵蛸片劑的制備工藝65-72
• 6.1 材料與方法65-67
• 6.1.1 實(shí)驗(yàn)材料65
• 6.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備65-66
• 6.1.3 實(shí)驗(yàn)方法66-67
• 6.1.3.1 海螵蛸片劑的制備工藝流程66
• 6.1.3.2 崩解時(shí)間的測(cè)定66
• 6.1.3.3 片劑差異的測(cè)定66-67
• 6.1.3.4 單因素實(shí)驗(yàn)67
• 6.1.3.5 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)67
• 6.2 結(jié)果與分析67-71
• 6.2.1 單因素實(shí)驗(yàn)67-69
• 6.2.1.1 麥芽糊精添加量對(duì)片重差異、崩解時(shí)間、片劑外觀的影響67-68
• 6.2.1.2 交聯(lián)羧甲基纖維素鈉添加量對(duì)片重差異、崩解時(shí)間、片劑外觀的影響68
• 6.2.1.3 硬脂酸鎂添加量對(duì)片重差異、崩解時(shí)間、片劑外觀的影響68-69
• 6.2.2 海螵蛸片劑制備正交試驗(yàn)研究69-71
• 6.3 小結(jié)71-72
• 結(jié)論72-74
• 參考文獻(xiàn)74-78
• 致謝78

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3 羅秀菊;MicroRNAs在乙醇誘導(dǎo)的大鼠胃粘膜損傷中的作用及壬酸香草醇酯的干預(yù)研究[D];中南大學(xué);2011年

4 王瑩;不同來(lái)源幽門螺桿菌對(duì)蒙古沙土鼠胃粘膜損傷作用及其機(jī)制的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

5 顧星;針刺足三里對(duì)胃粘膜損傷家兔經(jīng)穴局部體液變化的研究[D];湖南中醫(yī)學(xué)院;2002年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王剛;新基因GDDR在小鼠急慢性胃粘膜損傷中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 賈盛佼;慢性胃炎患者胃粘膜菌群定量及定位分析[D];青島大學(xué);2015年

3 鄭紅;海螵蛸對(duì)胃粘膜損傷保護(hù)及其凝血、止血功效研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

4 杜長(zhǎng)青;健胃益氣湯對(duì)胃粘膜損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2005年

5 劉越洋;自衛(wèi)顆�？刮刚衬p傷作用的研究[D];浙江中醫(yī)學(xué)院;2003年

6 馬燕;梔子總苷對(duì)阿司匹林致胃粘膜損傷的保護(hù)作用與機(jī)制[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2005年

7 張琳琳;姜樹民教授治療急性胃粘膜損傷的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2008年

8 劉男;朝藥關(guān)蒼術(shù)抗乙醇性胃粘膜損傷有效部位及機(jī)制研究[D];延邊大學(xué);2011年

9 朱煥金;健脾益氣方藥調(diào)控血小板活化因子對(duì)急性胃粘膜損傷修復(fù)作用的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2009年

10 陳琦晗;活化蛋白C對(duì)大鼠急性胃粘膜損傷保護(hù)治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2006年

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本文編號(hào)：537925