本文關鍵詞：SFTS布尼亞病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NSs抑制MAVS介導天然免疫機制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：發(fā)熱伴血小板減少綜合征(Severe fever with thrombocytopenia syndrome, SFTS)是由布尼亞病毒科(Bunyaviridae)白蛉病毒屬(Phlebovirus)的一種新型病毒引起,后命名為發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(severe fever with throm-bocytopenia syndrome virus, SFTSV)。該病癥臨床上出現(xiàn)胃腸道癥狀,關節(jié)痛、肌肉痛、血小板減少、白細胞減少。嚴重者出現(xiàn)多器官功能損傷,一般病死率高達12-30%。關于SFTSV感染所致疾病的病理機制還不清楚。細胞內(nèi)RIG-I樣受體(RLR, retinioic acid-inducible gene I-like receptors)識別RNA病毒,招募下游線粒體抗病毒蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein, MAVS)作為信號接頭蛋白,并將其激活。MAVS在介導RNA病毒感染誘導宿主反應過程中起關鍵作用。MAVS一旦被激活,將招募下游信號激酶復合物,進而磷酸化和激活NF-κB、MAP激酶和IRF3等通路,從而誘導多種宿主反應。本研究在于闡明SFTSV感染宿主誘導抗病毒和炎性反應,及其MAVS被病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NSs調(diào)控的分子機制。本實驗室已經(jīng)報道,用SFTSV感染HEK293細胞,可以誘導抗病毒干擾素和干擾素誘導蛋白,以及炎性細胞因子反應。NSs通過和TBKl相互作用,將TBKl以及IRF3轉(zhuǎn)位、隱藏于NSs形成的病毒包涵體,從而抑制IRF3激活和干擾素誘導。我們進一步研究發(fā)現(xiàn),除干擾素被抑制之外,在感染前期炎性細胞因子(IL-6和IL-8)的誘導也受到抑制,而細胞因子的調(diào)控與TBK1和IRF3的激活無關。因此我們提出假設,在SFTSV感染細胞中,TBK1上游存有靶位點,同時受到病毒蛋白的作用,從而不但IRF3/干擾素通路受到調(diào)控,與炎性細胞因子誘導有關的NF-κB信號傳導也受到病毒蛋白調(diào)控。本研究觀察到,用shRNA沉默MAVS, HEK293T細胞中的MAVS下調(diào),導致SFTSV感染后,細胞內(nèi)炎性因子以及干擾素的誘導下降；MAVS下調(diào)有利于病毒在宿主細胞內(nèi)增殖。相反,在HEK293細胞中過表達MAVS則炎性因子和干擾素誘導上調(diào),病毒增殖增強。這些結(jié)果表明,TBKl上游的MAVS可能作為一個靶點,受病毒感染作用而導致IRF3以及NF-κB信號傳導激活減弱。我們采用免疫共沉淀和共聚焦免疫熒光技術證明NSs和MAVS可以相互作用；MAVS在NSs存在下,向感染細胞中NSs形成的包涵體結(jié)構(gòu)中轉(zhuǎn)位,并與NSs在包涵體共定位。而NSs和MAVS的相互作用和共定位是特異性的,MAVS上游RIG-I或MDA5則仍然均勻分布在細胞漿。通過分離感染細胞中的線粒體蛋白進行免疫印跡實驗,我們觀察到NSs通過捕獲線粒體膜上的MAVS到病毒包涵體內(nèi),從而削弱MAVS在天然免疫應答中作用,包括其誘導抗干擾素以及炎性細胞因子的功能。本研究發(fā)現(xiàn)SFTSV調(diào)控宿主反應的一個新靶點,即通過非結(jié)構(gòu)蛋白NSs和MAVS相互作用,并“劫持”MAVS到病毒包涵體中,從而抑制SFTSV感染中抗病毒干擾素的誘導,并削弱NF-κB導致的炎性因子反應。本研究結(jié)果為病毒以包涵體為逃避宿主反應的免疫逃逸新機制提供了一個新的靶點,有助于我們對病毒免疫調(diào)控和SFTS發(fā)病機制的深入了解。
【關鍵詞】：發(fā)熱伴血小板減少綜合征 SFTS 發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒 SFTSV NSs MAVS 干擾素 炎性細胞因子 NF-κB
【學位授予單位】：南京大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R510
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 中英文縮略詞表10-11
• 第一章 緒論11-14
• 一、基本背景11-12
• 二、研究目的及意義12-14
• 第二章 SFTSV抑制宿主天然免疫應答以及MAVS影響SFTSV增殖的研究14-36
• 一、前言14-16
• 二、材料與方法16-23
• 三、結(jié)果23-35
• 四、討論35-36
• 第三章 SFTSV非結(jié)構(gòu)蛋白NSs通過與MAVS相互作用影響宿主天然免疫反應36-51
• 一、前言36-37
• 二、材料與方法37-40
• 三、結(jié)果40-49
• 四、討論49-51
• 參考文獻51-59
• 附錄59-60
• 致謝60-61

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ZHANG XiaoShuang;LIU Yan;ZHAO Li;LI Bing;YU Hao;WEN HongLing;YU Xue-Jie;;An emerging hemorrhagic fever in China caused by a novel bunyavirus SFTSV[J];Science China(Life Sciences);2013年08期

  本文關鍵詞：SFTS布尼亞病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NSs抑制MAVS介導天然免疫機制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：395781