本文關(guān)鍵詞：SFTS布尼亞病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NSs抑制MAVS介導(dǎo)天然免疫機(jī)制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：發(fā)熱伴血小板減少綜合征(Severe fever with thrombocytopenia syndrome, SFTS)是由布尼亞病毒科(Bunyaviridae)白蛉病毒屬(Phlebovirus)的一種新型病毒引起,后命名為發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(severe fever with throm-bocytopenia syndrome virus, SFTSV)。該病癥臨床上出現(xiàn)胃腸道癥狀,關(guān)節(jié)痛、肌肉痛、血小板減少、白細(xì)胞減少。嚴(yán)重者出現(xiàn)多器官功能損傷,一般病死率高達(dá)12-30%。關(guān)于SFTSV感染所致疾病的病理機(jī)制還不清楚。細(xì)胞內(nèi)RIG-I樣受體(RLR, retinioic acid-inducible gene I-like receptors)識(shí)別RNA病毒,招募下游線粒體抗病毒蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein, MAVS)作為信號(hào)接頭蛋白,并將其激活。MAVS在介導(dǎo)RNA病毒感染誘導(dǎo)宿主反應(yīng)過程中起關(guān)鍵作用。MAVS一旦被激活,將招募下游信號(hào)激酶復(fù)合物,進(jìn)而磷酸化和激活NF-κB、MAP激酶和IRF3等通路,從而誘導(dǎo)多種宿主反應(yīng)。本研究在于闡明SFTSV感染宿主誘導(dǎo)抗病毒和炎性反應(yīng),及其MAVS被病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NSs調(diào)控的分子機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)報(bào)道,用SFTSV感染HEK293細(xì)胞,可以誘導(dǎo)抗病毒干擾素和干擾素誘導(dǎo)蛋白,以及炎性細(xì)胞因子反應(yīng)。NSs通過和TBKl相互作用,將TBKl以及IRF3轉(zhuǎn)位、隱藏于NSs形成的病毒包涵體,從而抑制IRF3激活和干擾素誘導(dǎo)。我們進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),除干擾素被抑制之外,在感染前期炎性細(xì)胞因子(IL-6和IL-8)的誘導(dǎo)也受到抑制,而細(xì)胞因子的調(diào)控與TBK1和IRF3的激活無關(guān)。因此我們提出假設(shè),在SFTSV感染細(xì)胞中,TBK1上游存有靶位點(diǎn),同時(shí)受到病毒蛋白的作用,從而不但I(xiàn)RF3/干擾素通路受到調(diào)控,與炎性細(xì)胞因子誘導(dǎo)有關(guān)的NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)也受到病毒蛋白調(diào)控。本研究觀察到,用shRNA沉默MAVS, HEK293T細(xì)胞中的MAVS下調(diào),導(dǎo)致SFTSV感染后,細(xì)胞內(nèi)炎性因子以及干擾素的誘導(dǎo)下降；MAVS下調(diào)有利于病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖。相反,在HEK293細(xì)胞中過表達(dá)MAVS則炎性因子和干擾素誘導(dǎo)上調(diào),病毒增殖增強(qiáng)。這些結(jié)果表明,TBKl上游的MAVS可能作為一個(gè)靶點(diǎn),受病毒感染作用而導(dǎo)致IRF3以及NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)激活減弱。我們采用免疫共沉淀和共聚焦免疫熒光技術(shù)證明NSs和MAVS可以相互作用；MAVS在NSs存在下,向感染細(xì)胞中NSs形成的包涵體結(jié)構(gòu)中轉(zhuǎn)位,并與NSs在包涵體共定位。而NSs和MAVS的相互作用和共定位是特異性的,MAVS上游RIG-I或MDA5則仍然均勻分布在細(xì)胞漿。通過分離感染細(xì)胞中的線粒體蛋白進(jìn)行免疫印跡實(shí)驗(yàn),我們觀察到NSs通過捕獲線粒體膜上的MAVS到病毒包涵體內(nèi),從而削弱MAVS在天然免疫應(yīng)答中作用,包括其誘導(dǎo)抗干擾素以及炎性細(xì)胞因子的功能。本研究發(fā)現(xiàn)SFTSV調(diào)控宿主反應(yīng)的一個(gè)新靶點(diǎn),即通過非結(jié)構(gòu)蛋白NSs和MAVS相互作用,并“劫持”MAVS到病毒包涵體中,從而抑制SFTSV感染中抗病毒干擾素的誘導(dǎo),并削弱NF-κB導(dǎo)致的炎性因子反應(yīng)。本研究結(jié)果為病毒以包涵體為逃避宿主反應(yīng)的免疫逃逸新機(jī)制提供了一個(gè)新的靶點(diǎn),有助于我們對(duì)病毒免疫調(diào)控和SFTS發(fā)病機(jī)制的深入了解。
【關(guān)鍵詞】：發(fā)熱伴血小板減少綜合征 SFTS 發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒 SFTSV NSs MAVS 干擾素 炎性細(xì)胞因子 NF-κB
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R510
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 中英文縮略詞表10-11
• 第一章 緒論11-14
• 一、基本背景11-12
• 二、研究目的及意義12-14
• 第二章 SFTSV抑制宿主天然免疫應(yīng)答以及MAVS影響SFTSV增殖的研究14-36
• 一、前言14-16
• 二、材料與方法16-23
• 三、結(jié)果23-35
• 四、討論35-36
• 第三章 SFTSV非結(jié)構(gòu)蛋白NSs通過與MAVS相互作用影響宿主天然免疫反應(yīng)36-51
• 一、前言36-37
• 二、材料與方法37-40
• 三、結(jié)果40-49
• 四、討論49-51
• 參考文獻(xiàn)51-59
• 附錄59-60
• 致謝60-61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ZHANG XiaoShuang;LIU Yan;ZHAO Li;LI Bing;YU Hao;WEN HongLing;YU Xue-Jie;;An emerging hemorrhagic fever in China caused by a novel bunyavirus SFTSV[J];Science China(Life Sciences);2013年08期

  本文關(guān)鍵詞：SFTS布尼亞病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NSs抑制MAVS介導(dǎo)天然免疫機(jī)制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：395781