蛇莓提取物抗單純皰疹病毒的有效部位研究
本文關鍵詞:蛇莓提取物抗單純皰疹病毒的有效部位研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:通過蛇莓體外抗病毒效果,篩選出敏感病毒株,從蛇莓中提取分離出具有體外抗單純皰疹病毒(HSV-1)活性的有效部位,通過體內實驗驗證該有效部位的抗病毒效果,并初步探討該有效部位抗HSV-1的作用機制。方法:采用中性紅染色法和觀察細胞病變(CPE)法檢測蛇莓提取物的體外滅活病毒作用,并以體外抗病毒治療指數(shù)(TI)為指標,對蛇莓的抗病毒譜進行篩選,確立其病毒敏感株;將蛇莓水提液進行醇沉工藝優(yōu)化,得到最佳醇沉工藝;選取三種類型大孔吸附樹脂對蛇莓上清液進行分離,以體外抗病毒治療指數(shù)(TI)為指標,篩選出最佳的大孔吸附樹脂;蛇莓上清液經(jīng)過D101大孔樹脂吸附后,依次用水、25%乙醇進行洗脫,以體外抗病毒治療指數(shù)(TI)為指標,得到抗病毒有效部位,然后采用制備薄層分離,進一步確定其有效部位;用HSV-1建立小鼠肝炎模型,對蛇莓有效部位體內抗病毒活性進行評價;建立4種形式的病毒-細胞感染模型,對有效部位的抗HSV-1作用機制進行初步探討。結果:在體外抗病毒譜篩選實驗中,蛇莓提取物抗HSV-1的作用最為明顯,其治療指數(shù)(TI)是15.09;最佳醇沉工藝為藥液濃縮比1:1.3,醇沉濃度為60%,醇沉時間為24h;使用三種類型的大孔吸附樹脂對上清液進行分離,得出D101型大孔樹脂抗病毒效果較好;通過大孔樹脂及制備薄層分離得到斑點部位有顯著抗病毒效果,TI為51.34。以HSV-1建立小鼠肝炎模型,經(jīng)灌胃給藥,取蛇莓組肝組織與病毒組比較,從肝組織外觀可以觀察到肝組織的病變程度有所減輕,通過動物肝組織病理指數(shù)分析,蛇莓組與病毒模型組相比(P=0.0270.05)有顯著性差異。斑點部位抗HSV-1的作用機制結果發(fā)現(xiàn)該有效部位對病毒無直接殺滅作用,而是對病毒的穿入產(chǎn)生影響,減少細胞與病毒的結合,其次可能是對HSV-1的某功能蛋白產(chǎn)生了影響,抑制了病毒的反轉錄,復制過程。結論:本實驗以體外抗病毒治療指數(shù)(TI)為評價指標,對蛇莓中抗病毒活性部位逐步分離純化,通過體內實驗發(fā)現(xiàn)斑點部位可以抑制由HSV-1引起的小鼠肝組織感染,表明其具有較為顯著的體內抗病毒的作用。該有效部位可阻止病毒的穿入,并可抑制病毒的生物合成,但無直接殺傷作用。
【關鍵詞】:蛇莓 單純皰疹病毒 提取分離 有效部位 抗病毒
【學位授予單位】:山東中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R285;R284.2
【目錄】:
- 提要3-4
- Abstract4-10
- 引言10-11
- 實驗綜述11-25
- 1 蛇莓的研究概況11-16
- 1.1 蛇莓的形態(tài)特征及資源分布11
- 1.2 蛇莓的化學成分11-13
- 1.3 蛇莓的藥理作用13-14
- 1.4 蛇莓的臨床應用14-16
- 1.5 蛇莓的毒副作用16
- 2 單純皰疹病毒的研究概況16-23
- 2.1 HSV的生物學特性及結構17
- 2.2 HSV發(fā)病機制17-19
- 2.3 HSV疫苗研究的現(xiàn)狀19-20
- 2.4 化學藥物治療HSV現(xiàn)狀20-21
- 2.5 中草藥抗HSV現(xiàn)狀21-23
- 3 課題研究內容23-24
- 4 技術路線24-25
- 實驗研究25-52
- 第一部分 蛇莓體外抗病毒的篩選25-30
- 1 實驗材料25-26
- 1.1 儀器25
- 1.2 藥品與試劑25-26
- 1.3 細胞株26
- 1.4 病毒株26
- 1.5 培養(yǎng)液26
- 2 實驗方法26-28
- 2.1 蛇莓提取液的制備26
- 2.2 陽性對照藥物的制備26
- 2.3 病毒滴度的測定26-27
- 2.4 抗病毒實驗27-28
- 3 實驗結果28-29
- 3.1 各病毒TCID50的測定28
- 3.2 藥物抗病毒篩選結果28-29
- 4 討論29-30
- 第二部分 蛇莓水提液醇沉工藝優(yōu)化30-33
- 1 實驗材料30
- 1.1 實驗儀器30
- 1.2 藥品與試劑30
- 1.3 細胞株與病毒株30
- 1.4 培養(yǎng)液30
- 2 實驗方法30-31
- 2.1 醇沉工藝正交試驗30
- 2.2 體外抗病毒實驗30-31
- 3 實驗結果31-32
- 4 討論32-33
- 第三部分 大孔吸附樹脂的篩選33-37
- 1 實驗材料33
- 1.1 實驗儀器33
- 1.2 藥品與試劑33
- 1.3 細胞株與病毒株33
- 1.4 培養(yǎng)液33
- 2 實驗方法33-35
- 2.1 大孔吸附樹脂的預處理33
- 2.2 樣品溶液的制備33-34
- 2.3 上樣及洗脫34
- 2.4 體外抗病毒實驗34-35
- 3 實驗結果35
- 4 討論35-37
- 第四部分 蛇莓有效部位的精制及鑒定37-42
- 1 實驗材料37
- 1.1 實驗儀器37
- 1.2 試劑與藥品37
- 1.3 細胞株與病毒株37
- 1.4 培養(yǎng)液37
- 2 實驗方法37-40
- 2.1 D101大孔樹脂的分離37-38
- 2.2 制備薄層分離38-40
- 2.3 斑點部位的理化鑒定40
- 3 實驗結果40-41
- 3.1 薄層分離有效部位40-41
- 3.2 斑點部位鑒別結果41
- 4 討論41-42
- 第五部分 蛇莓有效部位的體內抗病毒實驗42-49
- 1 實驗儀器與材料42
- 1.1 儀器42
- 1.2 藥品與試劑42
- 1.3 病毒株42
- 1.4 動物42
- 2 實驗方法42-44
- 2.1 病毒ID50的測定42
- 2.2 蛇莓有效斑點對小鼠毒性的測定42-43
- 2.3 藥物體內抗病毒試驗43-44
- 2.4 統(tǒng)計學方法44
- 3 實驗結果44-48
- 3.1 病毒ID50的測定44
- 3.2 斑點部位對小鼠毒性的測定44
- 3.3 藥物體內抗病毒實驗44-48
- 4 討論48-49
- 第六部分 有效部位抗HSV-1 機理的初步研究49-52
- 1 實驗儀器與材料49
- 1.1 儀器49
- 1.2 藥品與試劑49
- 1.3 細胞株與病毒株49
- 1.4 培養(yǎng)液49
- 2 實驗方法49-50
- 2.1 制備多孔板內單層細胞49
- 2.2 病毒擴增49-50
- 2.3 藥物對細胞的毒性測定50
- 2.4 藥物體外抗HSV-1 機理實驗50
- 3 實驗結果50-51
- 4 討論51-52
- 結語52-54
- 參考文獻54-59
- 致謝59-60
- 附錄60-65
- 詳細摘要65-69
【相似文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 陳葆仁;鄭民實;;亞膦酰乙酸的合成及其抗單純皰疹病毒的作用[J];江西醫(yī)學院學報;1982年04期
2 張杰;中草藥抗單純皰疹病毒作用的研究進展[J];中醫(yī)藥信息;1995年01期
3 羅軍,劉振安,肖紅,楊占秋,文利,劉建軍;大黃在體內抗單純皰疹病毒作用的實驗研究[J];中華傳染病雜志;1998年04期
4 李嬌;彭芳;;抗單純皰疹病毒中藥的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2012年05期
5 劉穎娟,楊占秋,肖紅,文利;中藥連翹有效成分體外抗單純皰疹病毒的實驗研究[J];湖北中醫(yī)學院學報;2004年01期
6 李聞文,施凱;喜樹果粗提取液體外抗單純皰疹病毒2型試驗[J];湖南醫(yī)學;1993年02期
7 王育良,,陸綿綿;中藥抗單純皰疹病毒的實驗研究[J];中國中醫(yī)眼科雜志;1995年02期
8 周志勇;袁丁;黃鶴飛;張長城;;天然產(chǎn)物抗單純皰疹病毒的研究進展[J];中國藥房;2010年03期
9 陳信生,范瑞強;中草藥抗單純皰疹病毒實驗研究進展[J];中醫(yī)藥信息;2001年02期
10 張軍峰;馬肖兵;詹tg;;澤漆體外抗單純皰疹病毒活性研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2008年19期
中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 吳建兵;李新宇;林麟;崔盤根;鄭家潤;;小檗堿衍生物B13體外抗單純皰疹病毒的初步研究[A];中華醫(yī)學會第十二次全國皮膚性病學術會議論文集[C];2006年
中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 吳建兵;小檗堿衍生物HB-13抗單純皰疹病毒作用及其機制初探[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年
中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條
1 張霞;蛇莓提取物抗單純皰疹病毒的有效部位研究[D];山東中醫(yī)藥大學;2015年
2 劉穎娟;中藥連翹有效部位體外抗單純皰疹病毒的實驗研究[D];武漢大學;2004年
3 梁義;十二烷基硫酸鈉抗單純皰疹病毒效應的體外研究[D];廣西醫(yī)科大學;2005年
本文關鍵詞:蛇莓提取物抗單純皰疹病毒的有效部位研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:387769
本文鏈接:http://sikaile.net/shoufeilunwen/mpalunwen/387769.html