發(fā)布時(shí)間：2017-05-21 21:07

  本文關(guān)鍵詞：珊瑚真菌OUCMDZ-3658的次生代謝產(chǎn)物研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：海綿和珊瑚屬于海洋低等無(wú)脊椎腔腸動(dòng)物,在海洋生態(tài)系統(tǒng)中分布廣泛且在生存競(jìng)爭(zhēng)中能夠產(chǎn)生獨(dú)特的化學(xué)防御物質(zhì),是抗菌、抗污、抗腫瘤、防附著、拒捕食等生物活性分子的重要來(lái)源,構(gòu)成現(xiàn)代醫(yī)藥研發(fā)的重要資源。海綿和珊瑚具有獨(dú)特的雙層結(jié)構(gòu)及海水過(guò)濾的捕食策略,提供給微生物巨大的棲息系統(tǒng)以形成共附生關(guān)系,微生物的聚集體積可占海綿生物量的50-60%；而且研究發(fā)現(xiàn)海綿珊瑚的共附生微生物可能是那些生物活性分子的來(lái)源而并非是其宿主；海綿珊瑚的代謝產(chǎn)物研究雖然取得許多重大進(jìn)展但仍受其藥源問(wèn)題的制約；基于以上事實(shí)科學(xué)家們逐漸將目光轉(zhuǎn)移到其共附生微生物的研究上來(lái)。地跨亞熱帶及熱帶的中國(guó)南海是海綿珊瑚的主要聚集地,而且珊瑚礁數(shù)量眾多類(lèi)型齊全,具有很高的研究?jī)r(jià)值,因此,為獲得具有研究意義的次級(jí)代謝產(chǎn)物本論文選定中國(guó)南海的海綿和珊瑚樣品進(jìn)行研究。對(duì)來(lái)源于西沙永興島及七連嶼的15個(gè)海綿和珊瑚樣品進(jìn)行微生物的分離主要包括真菌和放線(xiàn)菌。選用梯度稀釋法對(duì)上述樣品進(jìn)行真菌及放線(xiàn)菌的分離,最終得到海綿和珊瑚的共附生真菌115株和放線(xiàn)菌72株。將分離得到的共附生微生物通過(guò)不同的培養(yǎng)方式將其發(fā)酵獲得代謝產(chǎn)物,然后進(jìn)行TLC特征顯色分析挑選出具有生物堿或鹵素特征顯色的菌株,然后對(duì)這些具有特殊顯色的菌株進(jìn)行HPLC指紋分析觀察其紫外吸收,根據(jù)特呈異性和系列性吸收原則進(jìn)行菌株的挑選。接著對(duì)挑選出的株菌測(cè)定其抗菌(Candida albicans和Staphylococcus aureus)活性和細(xì)胞毒(MCF-7.A549和K562)活性并關(guān)注其中表現(xiàn)出較高活性的菌株。綜合以上各個(gè)方面的考察最終確定1株"Talented Strains"作為目標(biāo)菌株以發(fā)酵進(jìn)行進(jìn)一步的次級(jí)代鰣產(chǎn)物研究。根據(jù)本論文的研究指導(dǎo)方法挑選出真菌OUCMDZ-3658作為目標(biāo)菌株進(jìn)行最優(yōu)發(fā)酵條件的摸索,主要評(píng)價(jià)依據(jù)為發(fā)酵效價(jià)、生物活性以及化學(xué)特異性；優(yōu)化方式主要通過(guò)改變其培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)方式、培養(yǎng)基的pH以及鹽度等。在最優(yōu)條件下進(jìn)行規(guī)模化發(fā)酵并獲得發(fā)酵產(chǎn)物,綜合利用薄層色譜、硅膠和凝膠柱色譜、制備型高效液相色譜等分離手段對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行單體化合物的分離與純化,獲得14個(gè)化合物單體(1-14)。利用NMR(核磁共振譜)、MS(質(zhì)譜)、UV(紫外光譜)、OR(比旋光)、CD(圓二色譜)等現(xiàn)代波譜學(xué)方法確定了這14個(gè)化合物的結(jié)構(gòu),包括5個(gè)喹唑啉酮類(lèi)生物堿(1-5)、3個(gè)二酮哌嗪類(lèi)生物堿(8-10)。對(duì)所得的單體化合物進(jìn)行活性評(píng)價(jià)包括抗腫瘤活性、抑菌活性以及糖苷酶抑制活性,結(jié)果表明：化合物10具有抑制白色念珠菌的活性,化合物8、9和11具有微弱的抑制產(chǎn)氣桿菌的活性；化合物5對(duì)K562細(xì)胞株有抑制活性,化合物3對(duì)MCF-7細(xì)胞株有一定的抑制活性；化合物3和4對(duì)α-糖苷酶有與陽(yáng)性藥相當(dāng)?shù)囊种苹钚?為α-糖苷酶抑制劑的發(fā)現(xiàn)提供了新的結(jié)構(gòu)類(lèi)型。
【關(guān)鍵詞】：珊瑚 共附生 次級(jí)代謝產(chǎn)物 化學(xué)豐富度 生物活性
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R915
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-12
• 前言12-29
• 參考文獻(xiàn)24-29
• 第一章 共附生真菌的分離及篩選29-57
• 第一節(jié) 菌株的分離與純化29-38
• 第二節(jié) “Talented Strains”的篩選38-45
• 第三節(jié) 目標(biāo)菌株的發(fā)酵條件的摸索45-55
• 第四節(jié) 小結(jié)與討論55-57
• 第二章 珊瑚真菌OUCMDZ-3658的次生代謝產(chǎn)物研究57-75
• 第一節(jié) 菌株次生代謝產(chǎn)物的提取分離57-60
• 第二節(jié) 單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定60-72
• 第三節(jié) 化合物的活性評(píng)價(jià)72-73
• 第四節(jié) 小結(jié)與討論73-75
• 第三章 實(shí)驗(yàn)部分75-79
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與材料75-77
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)用溶液的配制77-79
• 參考文獻(xiàn)79-80
• 結(jié)語(yǔ)與創(chuàng)新點(diǎn)80-81
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷及本論文相關(guān)研究成果81-82
• 致謝82-83
• 附錄83-94

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王文玲;珊瑚真菌OUCMDZ-3658的次生代謝產(chǎn)物研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：珊瑚真菌OUCMDZ-3658的次生代謝產(chǎn)物研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：384821