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KAI1基因?qū)ξ赴┘?xì)胞體外生長、遷移的影響

發(fā)布時間:2023-08-06 13:38
  目的:用轉(zhuǎn)染慢病毒載體的方式改變不同胃癌細(xì)胞株中KAI1基因的表達(dá)量,探討KAI1基因?qū)ξ赴┘?xì)胞體外生長與遷移能力的影響。方法:1.將人低分化胃癌細(xì)胞BGC823分組,分別為轉(zhuǎn)染KAI1基因過表達(dá)慢病毒載體pLenti-EF1a-EGFP-P2A-Puro-CMV-KAI1-3Flag的實驗組(BGC823-OE組)、轉(zhuǎn)染空病毒載體pLenti-EF1a-EGFP-F2A-Puro-CMV-MCS的陰性對照組(BGC823-NC組)和未做特殊處理的空白對照組(BGC823-Ctrl組);同時將人高分化胃癌細(xì)胞MKN28進(jìn)行分組,分別為轉(zhuǎn)染KAI1基因慢病毒RNA干擾載體pLKD-CMV-EGFP-2A-Puro-U6-shRNA(KAI1)的實驗組(MKN28-siRNA組)、轉(zhuǎn)染空病毒載體pLKD-CMV-EGFP-Puro-U6-shRNA的陰性對照組(MKN28-NC組)以及未做特殊處理的空白對照組(MKN28-Ctrl組),病毒感染72小時后熒光顯微鏡下觀察各組細(xì)胞中綠色熒光蛋白EGFP的表達(dá),并通過加藥篩選方法建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株。2.應(yīng)用蛋白印跡實驗(Western Blo...

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學(xué)位級別】:碩士

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