基于高通量測(cè)序及生物信息學(xué)探討膿毒癥生存與死亡關(guān)鍵基因
發(fā)布時(shí)間:2023-04-23 03:06
目的:1.探究膿毒癥生存與死亡不同轉(zhuǎn)歸動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。2.利用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)膿毒癥生存組與死亡組的轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測(cè)序,找到兩組別的差異表達(dá)基因。3.使用生物信息學(xué)對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行分析以篩選出決定膿毒癥生存與死亡不同轉(zhuǎn)歸的關(guān)鍵基因,并對(duì)關(guān)鍵基因進(jìn)行RT-PCR驗(yàn)證以保證結(jié)果的可靠性,從而為膿毒癥的診療提供新的研究靶點(diǎn)。方法:1.使用等體積的PBS溶液及脂多糖溶液,以0 mg/kg、10mg/kg、20 mg/kg、30 mg/kg、40 mg/kg、50 mg/kg的給藥劑量對(duì)小鼠進(jìn)行腹腔注射以構(gòu)建不同死亡率的膿毒癥模型,每組10只,通過(guò)觀(guān)察記錄小鼠體溫、活動(dòng)狀態(tài)指標(biāo)來(lái)確定膿毒癥模型構(gòu)建是否成功,連續(xù)觀(guān)察7天,并記錄下小鼠生存時(shí)間以繪制生存曲線(xiàn),篩選出死亡率為30%和85%左右的兩組為最適模型,將其對(duì)應(yīng)的脂多糖劑量分別設(shè)置為生存組給藥劑量和死亡組給藥劑量。2.使用篩選出的兩種不同劑量的脂多糖溶液構(gòu)建膿毒癥生存組與死亡組小鼠模型,并使用等體積PBS溶液構(gòu)建空白對(duì)照組,在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間點(diǎn)獲取外周血樣本,使用ELISA法對(duì)膿毒癥生存組、死亡組以及空白對(duì)照組的血漿炎癥因子TNF-α、IL-1β、...
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
英漢縮略詞對(duì)照表
膿毒癥靶向治療研究進(jìn)展(綜述)
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3798955
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
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