發(fā)布時間：2017-05-18 07:00

  本文關(guān)鍵詞：慈菇多糖對小鼠免疫功能及mTOR信號通路的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的通過觀察慈菇多糖干預免疫力低下模型和S180腫瘤模型小鼠的實驗,驗證其調(diào)節(jié)免疫和抗腫瘤的功效。通過觀察慈菇多糖干預巨噬細胞的實驗,驗證其調(diào)節(jié)巨噬細胞的免疫功能并初步探討其作用機制與m TOR信號通路相關(guān)的可能性。方法(1)、慈菇多糖對免疫力低下小鼠的干預:將ICR雄性小鼠50只按體重隨機分為5組:對照組、模型組、慈菇多糖不同劑量組(100、200、300mg/kg),連續(xù)灌胃慈菇多糖28天,對照組和模型組灌胃等量蒸餾水;第21天,對照組皮下注射等量生理鹽水,其余4組小鼠皮下注射氫化可的松25mg/kg,連續(xù)6天制備免疫功能低下模型,觀察各組小鼠臟器指數(shù)、巨噬細胞碳廓清吞噬指數(shù)和熒光微球指數(shù)等指標。慈菇多糖對S180荷瘤小鼠的干預:將ICR雄性小鼠56只按體重隨機分為7組:對照組、模型組、慈菇多糖不同劑量組(100、200、300mg/kg·d)、環(huán)磷酰胺組(20 mg/kg·d)和香菇多糖組(0.577 mg/kg每周2次)。第1到11天,慈菇多糖劑量組灌胃,其余組灌胃等量蒸餾水,第12天用S180細胞給除對照組以外的6組小鼠構(gòu)造腫瘤模型,并且連續(xù)11天按上述劑量全部灌胃,對照組灌胃等量蒸餾水。第23天測定小鼠臟器指數(shù)、抑瘤率和血清IL-2、TNF-α、SOD、MDA。(2)、慈菇多糖對RAW264.7巨噬細胞的干預:分別用ELISA和Griess法檢測不同劑量慈菇多糖(5、50、500μg/m L)和香菇多糖(100μg/m L)對巨噬細胞分泌細胞因子的影響;用RT-PCR和Western Blot檢測上述劑量組對巨噬細胞m TOR/PTEN基因表達變化的影響。結(jié)果(1)慈菇多糖各劑量組免疫低下小鼠臟器指數(shù)和巨噬細胞吞噬指數(shù)均高于模型組小鼠(P0.05),慈菇多糖低劑量組小鼠巨噬細胞熒光微球指數(shù)高于模型組小鼠(P0.05)。與模型組S180荷瘤小鼠相較,慈菇多糖中、高劑量組小鼠的脾臟指數(shù)升高(P0.05);慈菇多糖各劑量組的IL-2、TNF-α水平均有所提高(P0.05);慈菇多糖高劑量組瘤重降低,抑瘤率為0.684(P0.05);慈菇多糖高劑量組SOD值增高、MDA值下降(P0.05)。(2)慈菇多糖對RAW264.7體外干預:與對照組比較,慈菇多糖各劑量組巨噬細胞分泌的IL-2、TNF-α增多;慈菇多糖高劑量組巨噬細胞內(nèi)產(chǎn)生NO增多(p0.05)。在RT-PCR實驗中,慈菇多糖中、高劑量組m TOR m RNA表達下調(diào)至對照組的0.578倍和0.391倍(p0.05);在Western Blot實驗中,與對照組相比,慈菇多糖高劑量組m TOR蛋白表達下降(p0.05)。而慈菇多糖各劑量組PTEN m RNA和蛋白表達與對照組相比均無統(tǒng)計學意義(p0.05)。結(jié)論(1)慈菇多糖在一定程度上能夠提高小鼠非特異性免疫力,既可以提高巨噬細胞的吞噬能力、促進細胞因子的分泌,又可以間接抑制S180荷瘤小鼠實體瘤的生長。(2)慈菇多糖會促進m TOR基因的表達下降,其與m TOR信號通路有一定的關(guān)系,可以抑制通路并促進免疫功能的提高。因其對PTEN基因沒有預期的效果,所以其不是通過PI3K/AKT/PTEN/m TOR這條通路產(chǎn)生作用,可能通過m TOR其他信號通路產(chǎn)生作用。
【關(guān)鍵詞】：慈菇多糖 免疫調(diào)節(jié) 巨噬細胞 mTOR
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 中英文對照表4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 引言11-14
• 第一部分 慈菇多糖對模型小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用14-28
• 1 材料與方法14-19
• 2 結(jié)果19-25
• 3 討論25-27
• 4 結(jié)論27-28
• 第二部分 慈菇多糖對巨噬細胞和m TOR信號通路的影響28-44
• 1 材料與方法28-37
• 2 結(jié)果37-41
• 3 討論41-43
• 4 結(jié)論43-44
• 參考文獻44-49
• 致謝49-50
• 綜述50-59
• 參考文獻55-59
• 附錄：攻讀學位期間發(fā)表的論文59

【參考文獻】

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本文編號：375338