癌癥的發(fā)生發(fā)展是對人類健康和生命的主要威脅之一。根據(jù)有關國家權威癌癥數(shù)據(jù)機構的報導,全球將近四分之一到三分之一的每年新增惡性癌癥患者和每年新增的死亡癌癥患者均發(fā)生中國,且其所患者占的癌癥死亡比率仍在不斷增加和上升。因此,癌癥的早期治療目標靶點、治療方法手段以及抗癌藥物的發(fā)現(xiàn)和應用已成為了我國腫瘤科學家的重要努力和研究方向。運用手術治療、化學藥物療法和放射療法都是現(xiàn)如今我國臨床上最常使用的三種治療癌癥方案,在這之中,化學藥物療法被廣泛認為在臨床上是重要、有效且最為普遍的一種治療癌癥方法。先導藥物或新藥的發(fā)現(xiàn)途徑有許多種,從天然的植物微生物中分離、提取出高生理活性的化合物則是其中一種有效途徑。放線菌素是一類從微生物中分離出來的色素肽內(nèi)酯類天然抗生素。其中,放線菌素D是率先被批準作為抗癌藥物用于臨床治療,尤其是對兒童腎母細胞瘤有理想的療效,總體治愈率高達80%。不足的是,放線菌素D在臨床治療中表現(xiàn)出的嚴重肝毒性,極大程度上限制了其的使用。放線菌素V是放線菌素D的結構類似物,由L-4-酮脯氨酸替代L-4-脯氨酸。有研究表明,放線菌素V對多種腫瘤細胞的抑制作用均優(yōu)于放線菌素D,但仍未對放線菌素V... 

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞匯總表
第一章 緒論
    1.1 腫瘤及抗腫瘤藥物
    1.2 放線菌素v的研究進展
    1.3 P53信號通路及其功能
        1.3.1 p53與細胞周期
        1.3.2 p53與細胞程序性死亡
        1.3.3 p53與非小細胞肺癌
第二章 放線菌素V誘導人非小細胞肺痛細胞A549凋亡
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 化合物及實驗試劑
        2.1.3 試劑配制
        2.1.4 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞復蘇、培養(yǎng)及凍存
        2.2.2 MTT實驗檢測化合物的細胞毒性
        2.2.3 流式細胞儀檢測細胞凋亡
        2.2.4 DAPI染色實驗
        2.2.5 細胞全蛋白的提取及定量
        2.2.6 Western Blot檢測
    2.3 實驗結果
        2.3.1 MTT實驗結果
        2.3.2 放線菌素V誘導肺癌A549細胞凋亡
        2.3.3 DAPI實驗結果
        2.3.4 放線菌素V對Bcl-2家族蛋白影響
    2.4 討論
    2.5 小結
第三章 放線菌素V誘導人非小細胞肺癌A549細胞G2/M期阻滯
    3.1 實驗材料
        3.1.1 細胞株
        3.1.2 化合物和實驗試劑
        3.1.3 試劑配置
    3.2 實驗方法
        3.2.1 細胞培養(yǎng)
        3.2.2 流式細胞儀檢測細胞周期分布
        3.2.3 Western Blot檢測
    3.3 實驗結果
        3.3.1 放線菌素V誘導肺癌A549細胞G2/M期阻滯
        3.3.2 放線菌素V對M-期促進因子的影響
    3.4 討論
    3.5 小結
第四章 P53信號通路介導放線菌素V誘導的凋亡及G2/M期阻滯
    4.1 實驗材料
        4.1.1 細胞株
        4.1.2 化合物和實驗試劑
        4.1.3 試劑配置
        4.1.4 實驗儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 細胞培養(yǎng)
        4.2.2 Western Blot檢測
        4.2.3 mRNA提取及real-time PCR檢測
        4.2.4 流式細胞儀檢測細胞周期分布
        4.2.5 流式細胞儀檢測細胞凋亡
        4.2.6 MTT實驗檢測化合物的細胞毒性
    4.3 實驗結果
        4.3.1 放線菌素V誘導p53 mRNA的轉錄和蛋白的表達
        4.3.2 P53的抑制削弱了放線菌素V的誘導凋亡和周期阻滯
        4.3.3 P53的抑制降低放線菌素V的細胞毒性
    4.4 討論
    4.5 總結
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄
學位論文評閱及答辯情況表


【參考文獻】：
期刊論文
[1]p53基因相關的細胞非經(jīng)典死亡[J]. 孫鵬,趙云富.  中國腫瘤生物治療雜志. 2019(05)
[2]腫瘤靶向藥物的分類與研究進展[J]. 葉佳丹,余克富,朱斌,司延斌,趙志剛.  藥學進展. 2018(05)
[3]抗腫瘤抗生素藥物制劑的研究進展[J]. 劉薇,陳麗青,辛欣,黃偉,高鐘鎬.  藥學學報. 2018(06)
[4]抗腫瘤抗生素的作用機制研究進展[J]. 鄧衛(wèi)寧,趙力揮,王璐.  現(xiàn)代藥物與臨床. 2018(02)
[5]p53表達對老年晚期非小細胞肺癌化療效果的影響研究[J]. 王陽,張黎黎,盧穎,苗小青,李淑華,劉堃,張佩.  中國全科醫(yī)學. 2015(09)
[6]晚期非小細胞肺癌的藥物治療進展[J]. 胡毅,陶海濤.  中國藥物應用與監(jiān)測. 2014(06)
[7]細胞凋亡途徑及其機制[J]. 李敏,林俊.  國際婦產(chǎn)科學雜志. 2014(02)
[8]p53基因及其功能研究進展[J]. 李文娟,潘慶杰,李美玉.  生物技術通訊. 2014(02)
[9]局部晚期非小細胞肺癌p53蛋白表達與同步放化療療效的關系研究[J]. 汪宏斌,楊俊泉.  中國全科醫(yī)學. 2014(03)
[10]植物生物堿抗腫瘤的研究進展[J]. 葉友進,王春雷,蘆柏震.  醫(yī)藥導報. 2012(07)

博士論文
[1]P53與細胞衰老、自噬和凋亡[D]. 雷岳山.武漢大學 2013

碩士論文
[1]兩株泥蜂共生鏈霉菌次級代謝產(chǎn)物及其生物活性研究[D]. 宋亞潔.山東大學 2018
[2]海洋放線菌素X2的抗腫瘤和抗病毒研究[D]. 施珊珊.暨南大學 2009



本文編號：3717101