本文關(guān)鍵詞：馬齒莧黃酮類化合物分離純化及抗糖尿病活性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：據(jù)統(tǒng)計,全世界糖尿病人數(shù)每年都呈高速增長的趨勢,2030年全世界將會有5.5億糖尿病病人。現(xiàn)有的眾多種類的治療糖尿病的西藥能有效地降低高血糖,但其存在較多的毒副作用。因此,尋找新的高效低毒的抗糖尿病物質(zhì),已經(jīng)成為解決問題的突破點和重心。馬齒莧黃酮(Portulaca oleracea L.flavonoids, POF)是植物馬齒莧的一種主要活性成分,對其分離提取、含量測定和結(jié)構(gòu)分析已有較多研究,其抗氧化、消炎、抗糖尿病等作用也有少量研究報道。本研究對馬齒莧黃酮的分離提取工藝進行了優(yōu)化,并從細胞分子水平和整體動物水平研究馬齒莧黃酮的降糖功能及其分子作用機制。1、超聲波提取馬齒莧黃酮響應(yīng)曲面優(yōu)化結(jié)果：乙醇溶液濃度39%,料液比24：1(v：m),超聲溫度55℃,超聲時間為15 min,黃酮的平均提取率為16.25 mg/g。2、從馬齒莧黃酮類化合物中分離得到槲皮素。3、馬齒莧黃酮類化合物對·OH、DPPH和O2-三種自由基有明顯的清除作用,展現(xiàn)了較強的抗氧化效果。4、馬齒莧黃酮及槲皮素(0.5 mg/mL,24 h)可明顯抑制高糖高脂誘導(dǎo)的胰島β細胞(HIT-T15)的細胞毒性,促進細胞對葡萄糖的吸收利用。其作用機制可能與馬齒莧黃酮類化合物或槲皮素調(diào)節(jié)細胞內(nèi)IR、IRS-2、PKB/Akt和GLUT-2基因與蛋白質(zhì)表達有關(guān)。5、馬齒莧黃酮類化合物可明顯降低高糖高脂飼料和注射STZ誘導(dǎo)Ⅱ型糖尿病模型大鼠的高血糖和高血脂,改善胰島素抵抗。其作用機制與馬齒莧黃酮類化合物的抗氧化活性和調(diào)節(jié)大鼠胰臟IR、IRS-1、PKB/Akt的基因表達有關(guān)。本研究從馬齒莧黃酮類化合物的提取工藝優(yōu)化、降糖功能、抗氧化和抗糖尿病作用的分子機理等方面進行了較為系統(tǒng)的研究。為進一步從天然產(chǎn)物中開發(fā)具有降糖作用的功能食品或藥物前體化合物提供了理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：馬齒莧黃酮 Ⅱ型糖尿病 胰島素抵抗 降血糖作用 分子機制
【學(xué)位授予單位】：江西科技師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R284.2;R285.5
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-11
• 第1章 緒論11-18
• 1.1 糖尿病的簡介11
• 1.2 馬齒莧的概述11-12
• 1.3 黃酮類化合物的研究進展12-15
• 1.3.1 黃酮類化合物分類和性質(zhì)12
• 1.3.2 黃酮類化合物構(gòu)效關(guān)系12-15
• 1.4 本課題的研究意義及主要內(nèi)容15-18
• 1.4.1 研究意義15-16
• 1.4.2 主要內(nèi)容16-18
• 第2章 馬齒莧黃酮超聲波提取工藝優(yōu)化及體外試驗18-32
• 2.1 引言18
• 2.2 試驗材料及儀器18-19
• 2.2.1 試驗材料18-19
• 2.2.2 試驗儀器19
• 2.3 試驗方法19-22
• 2.3.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制19
• 2.3.2 馬齒莧黃酮類化合物的含量測定方法19
• 2.3.3 馬齒莧黃酮類化合物超聲波提取單因素試驗19-20
• 2.3.4 馬齒莧黃酮類化合物超聲波提取相應(yīng)面試驗20
• 2.3.5 馬齒莧黃酮清除DPPH自由基能力試驗20-21
• 2.3.6 馬齒莧黃酮清除羥基自由基(·OH)能力試驗21
• 2.3.7 馬齒莧黃酮清除超氧陰離子(O~(2-))自由基能力試驗21-22
• 2.3.8 統(tǒng)計分析22
• 2.4 結(jié)果與討論22-30
• 2.4.1 乙醇體積分?jǐn)?shù)對馬齒莧黃酮提取率的影響23
• 2.4.2 料液比對馬齒莧黃酮提取率的影響23-24
• 2.4.3 超聲溫度對馬齒莧黃酮提取率的影響24-25
• 2.4.4 超聲時間對馬齒莧黃酮提取率的影響25
• 2.4.5 響應(yīng)面對馬齒莧黃酮類化合物提取率的影響25-28
• 2.4.6 馬齒莧黃酮DPPH自由基清除率的測定結(jié)果28-29
• 2.4.7 馬齒莧黃酮羥基自由基(·OH)清除率的測定結(jié)果29
• 2.4.8 馬齒莧黃酮超氧陰離子自由基(O~(2-))清除率的測定結(jié)果29-30
• 2.5 本章小結(jié)30-32
• 第3章 馬齒莧黃酮的分離純化及單體鑒定32-39
• 3.1 引言32
• 3.2 試驗材料及儀器32-33
• 3.2.1 試驗材料32
• 3.2.2 試驗儀器32-33
• 3.3 試驗方法33-35
• 3.3.1 樣品處理33
• 3.3.2 聚酰胺粉的預(yù)處理及再生33-34
• 3.3.3 馬齒莧黃酮類化合物分離純化研究34-35
• 3.4 結(jié)果與討論35-37
• 3.4.1 馬齒莧純化黃酮的高效液相色譜檢測結(jié)果35-37
• 3.4.2 馬齒莧純化黃酮的薄層色譜檢測結(jié)果37
• 3.5 本章小結(jié)37-39
• 第4章 馬齒莧黃酮及槲皮素改善胰島細胞胰島素抵抗的機制研究39-65
• 4.1 引言39
• 4.2 材料及儀器39-43
• 4.2.1 試驗材料40-41
• 4.2.2 試驗儀器41
• 4.2.3 相關(guān)試劑的配制41-43
• 4.3 試驗方法43-52
• 4.3.1 藥物的制備43
• 4.3.2 HIT-T15細胞的培養(yǎng)43-45
• 4.3.3 馬齒莧黃酮及槲皮素對HIT-T15細胞相對增殖率影響45
• 4.3.4 HIT-T15細胞胰島素抵抗模型建立45
• 4.3.5 葡萄糖氧化酶法鑒定胰島素抵抗模型45-46
• 4.3.6 蛋白印記法(Western blotting)46-49
• 4.3.7 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)49-51
• 4.3.8 統(tǒng)計分析51-52
• 4.4 結(jié)果與討論52-63
• 4.4.1 MTT比色法52-53
• 4.4.2 形態(tài)學(xué)觀察53-54
• 4.4.3 葡萄糖吸收結(jié)果分析54-55
• 4.4.4 蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線55-56
• 4.4.5 Western blot檢測HIT-T15細胞胰島素抵抗信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)基因的蛋白水平表達56-61
• 4.4.6 RT-PCR檢測HIT-T15細胞胰島素抵抗信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平表達的影響61-63
• 4.5 本章小結(jié)63-65
• 第5章 馬齒莧黃酮對Ⅱ型糖尿病大鼠的作用機制探討65-75
• 5.1 引言65-66
• 5.2 試驗材料及儀器66-67
• 5.2.1 試驗材料66
• 5.2.2 試驗儀器66-67
• 5.3 試驗方法67-70
• 5.3.1 試驗溶液的配制67-68
• 5.3.2 馬齒莧黃酮類化合物對Ⅱ型糖尿病大鼠糖脂代謝的影響68-69
• 5.3.3 RT-PCR69
• 5.3.4 統(tǒng)計分析69-70
• 5.4 結(jié)果與討論70-74
• 5.4.1 POF對Ⅱ型糖尿病大鼠FBG的影響70
• 5.4.2 POF對Ⅱ型糖尿病大鼠血脂的影響70-71
• 5.4.3 POF對Ⅱ型糖尿病大鼠的抗氧化活性的影響71-72
• 5.4.4 RT-PCR檢測大鼠胰臟胰島素抵抗信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平表達的影響72-74
• 5.5 本章小結(jié)74-75
• 第6章 結(jié)論與展望75-77
• 6.1 結(jié)論75
• 6.2 展望75-77
• 參考文獻77-84
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果及所獲榮譽84-85
• 致謝85-86
• 附錄 縮寫詞對照表86

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6 李O

本文編號：371176