目的:觀察復(fù)方獨(dú)正湯提取物對(duì)破骨細(xì)胞（Osteoclast,OC）前體細(xì)胞-小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7誘導(dǎo)的OC分化、增殖的影響,初探其可能的機(jī)制,進(jìn)一步為臨床治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎提供實(shí)驗(yàn)研究依據(jù)。方法:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7,用細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒（CCK-8法）檢測(cè)24h、48h、72h、96h、120h時(shí)復(fù)方獨(dú)正湯提取物（50,100,200μg/ml）對(duì)RAW264.7增殖的影響;用不同濃度（6.25,12.5,25,50,100ng/ml）核因子κB受體活化因子配體（Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL）對(duì)小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng),5天后觀察其形態(tài)變化并用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色鑒定OC;將OC分為對(duì)照組（RAW264.7細(xì)胞）、模型組（RAW264.7細(xì)胞+50ng/ml RANKL）、藥物高、中、低治療組（RAW264.7細(xì)胞+50ng/ml RANKL+藥物）進(jìn)行培養(yǎng),用T... 

【文章來源】：湖北民族大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

復(fù)方獨(dú)正湯水提物對(duì)RAW264.7細(xì)胞生存率的影響

將對(duì)照組與含6.25ng/ml,12.5ng/ml,25ng/ml,50ng/ml,100ng/ml RANKL誘導(dǎo)劑各組培養(yǎng)5天,按TRAP染色試劑盒說明書進(jìn)行染色。有3個(gè)及以上細(xì)胞核且TRAP染色陽性為OC。100倍光鏡下隨機(jī)選10個(gè)視野,計(jì)數(shù)OC數(shù)量,每孔重復(fù)計(jì)數(shù)3次,取其均數(shù),用個(gè)/10個(gè)視野表示。TRAP染色后,可見對(duì)照組細(xì)胞的形狀、體積無明顯變化,且多為單核細(xì)胞,未見OC生成;各RANKL誘導(dǎo)劑組均可見體積變大,多核的OC生成,即RAW264.7細(xì)胞經(jīng)RANKL誘導(dǎo)分化形成OC,見圖1-2。與對(duì)照組相比,各誘導(dǎo)劑組均有OC的形成,誘導(dǎo)劑各組組間OC體積大小、數(shù)量多少不等,本實(shí)驗(yàn)需誘導(dǎo)出大量的OC來進(jìn)行后續(xù)之實(shí)驗(yàn),而100ng/ml和50ng/ml RANKL組所誘導(dǎo)出的巨型細(xì)胞大小、數(shù)量明顯大于25ng/ml,12.5ng/ml,6.25ng/ml RANKL組,且誘導(dǎo)出的OC與RANKL誘導(dǎo)劑濃度成正相關(guān),統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)100ng/ml和50ng/ml RANKL兩組所誘導(dǎo)出的OC數(shù)量幾乎等同,無統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05),后續(xù)之實(shí)驗(yàn)以50ng/ml RANKL來誘導(dǎo)分化OC,見圖1-3。圖1-3 RANKL濃度對(duì)OC數(shù)量的影響

RANKL濃度對(duì)OC數(shù)量的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]易醫(yī)臍針治療痹癥的思路淺析[J]. 羅翠文,梁詠竹,徐福平,張曉軒,原嘉民,楊志敏,成杰輝.  中國(guó)針灸. 2019(07)
[2]類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者風(fēng)濕病家族史特征及臨床意義[J]. 張曉英,靳家揚(yáng),何菁,甘雨舟,陳家麗,趙曉珍,劉佳佳,尤旭杰,李雪,郭建萍,李小峰,李靜,李茹,栗占國(guó).  北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019(03)
[3]龍牙楤木皂苷Ⅳ對(duì)原代成骨細(xì)胞分化和礦化的影響[J]. 李金誠(chéng),燕夢(mèng)云,薛帆,依香叫,王松月,周文斌,裴凌鵬.  藥物評(píng)價(jià)研究. 2019(03)
[4]《金匱要略》論治風(fēng)濕病[J]. 徐燕萍,陳光星.  廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(03)
[5]獨(dú)正崗接骨膏對(duì)體外培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨活性的影響[J]. 黃瓊,向陽,曾楚華.  吉林中醫(yī)藥. 2019(01)
[6]Rheumatoid arthritis: pathological mechanisms and modern pharmacologic therapies[J]. Qiang Guo,Yuxiang Wang,Dan Xu,Johannes Nossent,Nathan J.Pavlos,Jiake Xu.  Bone Research. 2018(02)
[7]雷公藤聯(lián)合白芍總苷治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎臨床觀察[J]. 王健.  新中醫(yī). 2018(06)
[8]王付運(yùn)用烏頭湯經(jīng)驗(yàn)探索[J]. 錢兆豐,王付.  中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育. 2018(07)
[9]獨(dú)正桿接骨膏外用對(duì)骨折愈合過程中SMAD1/5、SMURF1mRNA表達(dá)的影響[J]. 黃瓊,向陽,曾楚華.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2018(03)
[10]祛風(fēng)通絡(luò)飲辨治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（風(fēng)寒痹阻證）的臨床效果及對(duì)RF、IL-17、IL-22、PGE2表達(dá)的影響[J]. 田芳,許海.  中醫(yī)藥信息. 2018(02)

博士論文
[1]中醫(yī)診治痹證學(xué)術(shù)源流探討及文獻(xiàn)整理與資料查詢系統(tǒng)建立[D]. 陳永光.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3625122