發(fā)布時(shí)間：2022-01-20 19:47

　　正常情況下人體內(nèi)的尿酸維持在動(dòng)態(tài)平衡中,當(dāng)平衡被打破時(shí),體內(nèi)尿酸逐漸累積最終發(fā)展為高尿酸血癥。目前,高尿酸血癥的主要治療方法是使用黃嘌呤氧化酶抑制劑來減少尿酸的產(chǎn)生。但是,在伴隨其有效的降尿酸作用的同時(shí)還會引發(fā)較多不良事件。對于體內(nèi)異常積累的尿酸除了可減少其來源還可以通過增加其排泄來治療。因此,成功治療高尿酸血癥的關(guān)鍵之一是增加體內(nèi)尿酸的排泄。目的:在小組前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,將已經(jīng)構(gòu)建好的表達(dá)尿酸酶的基因工程菌應(yīng)用于高尿酸血癥大鼠模型上,分析工程菌對高尿酸血癥大鼠模型中尿酸水平降低的影響及該重組菌的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值和意義。方法:隨機(jī)分為5組的實(shí)驗(yàn)大鼠均為雄性SPF級SD大鼠,每組10只,共50只。分別為重組尿酸酶大腸桿菌基因工程菌羧甲基纖維素鈉溶液灌胃組（E36eu組）、空載體大腸桿菌工程菌羧甲基纖維素鈉溶液灌胃組（E36e組）、大腸桿菌羧甲基纖維素鈉溶液灌胃組（E組）、羧甲基纖維素鈉溶液灌胃組（NS組）、空白對照組（Con組）,其中前4組采用5%果糖水聯(lián)合注射氧嗪酸鉀來構(gòu)建高尿酸血癥模型,Con組為空白對照組。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行八周,前四周構(gòu)建高尿酸血癥模型,從第五周開始應(yīng)用工程菌。每天測量每組大鼠的... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組大鼠嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)（400×）

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文30圖2.2各組大鼠小腸組織病理學(xué)分析（100×）Figure2.2Histologicalanalysisofintestinaltissueinrats(100×)A:E36eu組;B:E36e組;C:E組;D:NS組;E:Con組2.8各組大鼠腸道內(nèi)容物分析各組大鼠的小腸腸道內(nèi)容物經(jīng)過高通量測序后，通過生物信息學(xué)分析腸道內(nèi)容物，包括OTU聚類分析、Alpha多樣性分析、Beta多樣性分析以及物種分析。2.8.1OTU聚類分析和Alpha多樣性分析圖2.3所示是大鼠腸道內(nèi)容物OTU聚類分析和Alpha多樣性分析的結(jié)果。結(jié)果顯示，趨于平滑的稀釋曲線表示測序的數(shù)據(jù)量較合理，并且樣品中的大多數(shù)微生物可被覆蓋。依據(jù)圖2.3E（Goods_coverage）可知，測序結(jié)果可以代表樣品的真實(shí)情況。由圖2.3A、B、C、D（Observed_species、Chao1、Shannon、Simpson）可知，Con和NS組大鼠的腸道內(nèi)容物的物種豐富度和均勻度相對較高。

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文31圖2.3大鼠腸道內(nèi)容物OTU聚類分析和Alpha多樣性分析Figure2.3OTUclusteranalysisandAlphadiversityanalysisoftheintestinalcontentsinratsA:Chao1指數(shù);B:Observed_species指數(shù);C:Shannon指數(shù);D:Simpson指數(shù);E:Goods_coverage指數(shù)2.8.2Beta多樣性分析和物種分析大鼠腸道內(nèi)容物Beta多樣性分析和物種分析的結(jié)果如圖2.4、圖2.5、圖2.6所示。Beta多樣性分析和物種分析的結(jié)果表明，E36eu組腸道內(nèi)容物和Con組腸道內(nèi)容物之間的物種多樣性存在差異（圖2.4）。根據(jù)菌群水平的聚類分析，每組的腸道菌群主要由厚壁菌門、放線菌門、擬桿菌門、變形菌門、梭桿菌門組成（圖2.5A和圖2.6A）。Con組的腸道內(nèi)容物和NS組的腸道內(nèi)容物菌落組成相似，而Con組腸道內(nèi)容物和E36eu組腸道內(nèi)容物的菌落組成不同。根據(jù)屬水平聚類分析，每組腸道內(nèi)容物菌落的組成和豐度都不同（圖2.5B和圖2.6B）。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，工程菌成功在模型大鼠腸道定植，并對小腸腸道菌群結(jié)構(gòu)及物種多樣性產(chǎn)生影響。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]重組尿酸酶基因工程菌的構(gòu)建與表達(dá)及應(yīng)用模型的篩選[D]. 李琴.重慶醫(yī)科大學(xué) 2018



本文編號：3599416