發(fā)布時(shí)間：2022-01-17 19:43

　　目的:Ang1-7對(duì)HUVECs內(nèi)皮細(xì)胞抗衰老作用是否通過(guò)線粒體裂變途徑,并進(jìn)一步探討其是否通過(guò)p53/Drp1軸介導(dǎo)起作用。方法:1 HUVECs內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)、傳代、種板,6孔板中細(xì)胞密度達(dá)80%以上時(shí),根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案加入AngⅡ建立內(nèi)皮細(xì)胞衰老模型;2實(shí)驗(yàn)分組:經(jīng)過(guò)前期大量預(yù)實(shí)驗(yàn)及查閱文獻(xiàn),確定AngⅡ、Ang1-7最適濃度均為1μmol/L,具體分組情況如下:第一部分:檢測(cè)Ang1-7是否可減輕AngⅡ誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞衰老（1）Control組;（2）Ang1-7組:1μmol/L的Ang1-7的完全培養(yǎng)液作用細(xì)胞48h;（3）AngⅡ組:1μmol/L的AngⅡ的完全培養(yǎng)液作用細(xì)胞48h;（4）AngⅡ+Ang1-7組:先用1μmol/L Ang1-7干預(yù)30分鐘,然后加入含有1μmol/L Ang II完全培養(yǎng)基培養(yǎng)48h。檢查各組衰老情況:觀察并計(jì)數(shù)各組中SA-β-Gal陽(yáng)性細(xì)胞,線粒體活性氧試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)總ROS的水平,Western blotting檢測(cè)衰老蛋白（p53、Drp1）的表達(dá)量。第二部分:檢測(cè)Ang1-7是否是通過(guò)p53/Drp1軸引起細(xì)胞內(nèi)ROS增多,導(dǎo)致內(nèi)... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Ang1-7對(duì)細(xì)胞衰老的影響

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14圖1-2表示Ang1-7對(duì)抗AngⅡ引起的HUVEC中ROS過(guò)度生成（n=3）。分析示：與Control組相比，AngⅡ組細(xì)胞ROS生成明顯增多（P＜0.001）；Ang1-7組ROS生成無(wú)明顯意義(P＞0.05)；與AngⅡ組相比，Ang1-7預(yù)處理組ROS生成減少(P＜0.001)。猜想，Ang1-7可能是通過(guò)影響線粒體功能，使細(xì)胞內(nèi)ROS生成減少。圖1-2Ang1-7對(duì)細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響注：A圖是ROS熒光圖(200×)；B圖是各組細(xì)胞ROS熒光強(qiáng)度統(tǒng)計(jì)圖（n=3），與Control組比較，aP＞0.05，bP＜0.001；與AngⅡ組比較，cP＜0.0012.1.3Westernblotting檢測(cè)衰老相關(guān)蛋白p53和Drp1蛋白的表達(dá)量圖1-3表示Ang1-7抑制AngⅡ誘導(dǎo)的HUVEC中p53、Drp1蛋白表達(dá)（n=5），統(tǒng)計(jì)學(xué)分析示：與Control組相比，AngⅡ組細(xì)胞p53、Drp1蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯增多（P＜0.001），Ang1-7組蛋白相對(duì)表達(dá)量無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；與AngⅡ組相比，Ang1-7預(yù)處理組上述蛋白相對(duì)表達(dá)量降低(P＜0.001)�？梢苑治龀鯝ngI-7可抑制AngⅡ誘導(dǎo)的p53和Drp1蛋白的表達(dá)，猜想AngI-7可能是通過(guò)p53/Drp1軸來(lái)減輕AngⅡ誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞的衰老。

Ang1-7對(duì)衰老相關(guān)蛋白p53、Drp1表達(dá)的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]血管緊張素（1-7）/Mas受體軸通過(guò)調(diào)控ATP敏感性鉀通道對(duì)抗高糖引起的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷[J]. 梁偉杰,陳君,余盛龍,陳美姬,林佳瓊,吳文.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2017(10)
[2]血管緊張素（1-7）和血管緊張素Ⅱ?qū)HP-1源性泡沫細(xì)胞膽固醇外流的影響[J]. 柴嬋娟,楊慧宇,楊志明,梁斌,閻豐,武瑞,邊云飛.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2014(09)



本文編號(hào)：3595328