目的:Ang1-7對HUVECs內(nèi)皮細胞抗衰老作用是否通過線粒體裂變途徑,并進一步探討其是否通過p53/Drp1軸介導起作用。方法:1 HUVECs內(nèi)皮細胞培養(yǎng)、傳代、種板,6孔板中細胞密度達80%以上時,根據(jù)實驗方案加入AngⅡ建立內(nèi)皮細胞衰老模型;2實驗分組:經(jīng)過前期大量預實驗及查閱文獻,確定AngⅡ、Ang1-7最適濃度均為1μmol/L,具體分組情況如下:第一部分:檢測Ang1-7是否可減輕AngⅡ誘導的內(nèi)皮細胞衰老（1）Control組;（2）Ang1-7組:1μmol/L的Ang1-7的完全培養(yǎng)液作用細胞48h;（3）AngⅡ組:1μmol/L的AngⅡ的完全培養(yǎng)液作用細胞48h;（4）AngⅡ+Ang1-7組:先用1μmol/L Ang1-7干預30分鐘,然后加入含有1μmol/L Ang II完全培養(yǎng)基培養(yǎng)48h。檢查各組衰老情況:觀察并計數(shù)各組中SA-β-Gal陽性細胞,線粒體活性氧試劑盒檢測細胞內(nèi)總ROS的水平,Western blotting檢測衰老蛋白（p53、Drp1）的表達量。第二部分:檢測Ang1-7是否是通過p53/Drp1軸引起細胞內(nèi)ROS增多,導致內(nèi)... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Ang1-7對細胞衰老的影響

山西醫(yī)科大學碩士學位論文14圖1-2表示Ang1-7對抗AngⅡ引起的HUVEC中ROS過度生成（n=3）。分析示：與Control組相比，AngⅡ組細胞ROS生成明顯增多（P＜0.001）；Ang1-7組ROS生成無明顯意義(P＞0.05)；與AngⅡ組相比，Ang1-7預處理組ROS生成減少(P＜0.001)。猜想，Ang1-7可能是通過影響線粒體功能，使細胞內(nèi)ROS生成減少。圖1-2Ang1-7對細胞內(nèi)ROS水平的影響注：A圖是ROS熒光圖(200×)；B圖是各組細胞ROS熒光強度統(tǒng)計圖（n=3），與Control組比較，aP＞0.05，bP＜0.001；與AngⅡ組比較，cP＜0.0012.1.3Westernblotting檢測衰老相關蛋白p53和Drp1蛋白的表達量圖1-3表示Ang1-7抑制AngⅡ誘導的HUVEC中p53、Drp1蛋白表達（n=5），統(tǒng)計學分析示：與Control組相比，AngⅡ組細胞p53、Drp1蛋白相對表達量明顯增多（P＜0.001），Ang1-7組蛋白相對表達量無明顯統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；與AngⅡ組相比，Ang1-7預處理組上述蛋白相對表達量降低(P＜0.001)�？梢苑治龀鯝ngI-7可抑制AngⅡ誘導的p53和Drp1蛋白的表達，猜想AngI-7可能是通過p53/Drp1軸來減輕AngⅡ誘導的內(nèi)皮細胞的衰老。

Ang1-7對衰老相關蛋白p53、Drp1表達的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]血管緊張素（1-7）/Mas受體軸通過調(diào)控ATP敏感性鉀通道對抗高糖引起的人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷[J]. 梁偉杰,陳君,余盛龍,陳美姬,林佳瓊,吳文.  中國動脈硬化雜志. 2017(10)
[2]血管緊張素（1-7）和血管緊張素Ⅱ對THP-1源性泡沫細胞膽固醇外流的影響[J]. 柴嬋娟,楊慧宇,楊志明,梁斌,閻豐,武瑞,邊云飛.  中國動脈硬化雜志. 2014(09)



本文編號：3595328