目的:考察以離子互補(bǔ)型自組裝短肽RADA16-I構(gòu)建的大黃素原位凝膠給藥系統(tǒng)的體內(nèi)外抗腫瘤作用,為解決疏水性藥物應(yīng)用受限問題、深入研究自組裝短肽和開發(fā)疏水性藥物新劑型提供理論和實(shí)踐應(yīng)用參考。方法:1.采用磁力攪拌法制備自組裝短肽RADA16-I-大黃素膠體混懸液,將其置于模擬體內(nèi)條件的體外體系（PBS、0.9%NaCI和細(xì)胞培養(yǎng)基）以及注射于瘤內(nèi)和瘤旁考察凝膠形成情況。2.采用家兔血液紅細(xì)胞考察短肽RADA16-I的血液相容性。3.采用MTT法考察短肽不含藥物的RADA16-I原位凝膠以及RADA16-I-大黃素原位凝膠給藥系統(tǒng)對正常及癌細(xì)胞的增殖抑制作用。5.采用免疫熒光技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)定性和定量分析腫瘤細(xì)胞對RADA16-I-大黃素原位凝膠中大黃素的攝取情況。5.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測RADA16-I-大黃素原位凝膠對腫瘤細(xì)胞的凋亡及周期的影響。6.通過Transwell和克隆形成實(shí)驗(yàn)考察RADA16-I-大黃素原位凝膠對腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲和克隆形成能力的影響。7.建立C57小鼠肝癌及肺癌皮下移植瘤模型,分別檢測游離大黃素與RADA16-I-大黃素原位凝膠腫瘤內(nèi)注射給藥后對荷瘤小鼠的體... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

大黃素的化學(xué)結(jié)構(gòu)

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文韋威朋17RADA16-I:Ac-RADARADARADARADA-CONH2圖2自組裝短肽RADA16-I電荷分布及三維分子模型的示意圖Fig.2Schematicdiagramofchargedistributionandthree-dimensionalmolecularmodelofself-assemblingpeptideRADA16-INote:Oxygenatomsarered,nitrogenatomsareblue,carbonatomsarewhite,andhydrogenatomsaregray.Inthisconformation,allofthehydrophobicalaninesidechainsarealignedononeside,andallofthearginineandasparticacidsidechainsarealignedondifferentsidestoproducetwodifferentfaces:thehydrophobicandthehydrophilic.Onthepolarside,argininealternateswithasparticacid.Thedimensionsareabout5nminlength,1.3nminheight,and0.8nminwidth.圖3（A）RADA16-I通過離子互補(bǔ)性和疏水作用自組裝形成的結(jié)構(gòu)；（B）RADA16-I進(jìn)一步自組裝形成納米纖維結(jié)構(gòu)[75]Fig.3(A)AschemeofRADA16-Iself-assemblythroughhydrophobicinteractionandionic-complementarity;(B)AproposedmodelofRADA16-Iself-assemblytoformnanofiberstructures盡管目前尚無臨床應(yīng)用的EM制劑，但鑒于EM具有廣泛的藥物活性，研究者們針對其傳遞系統(tǒng)開展了眾多研究。目前，已報(bào)道的EM藥物遞送系統(tǒng)有納米粒、脂質(zhì)體和聚合物膠束等。如沈麗萍[78]等采用薄膜分散-超聲法進(jìn)行制備三種關(guān)于EM的脂質(zhì)體，分別在動物體內(nèi)進(jìn)行了藥動學(xué)研究，結(jié)果顯示，三種EM脂

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文韋威朋18質(zhì)體在體內(nèi)的消除半衰期以及平均滯留時(shí)間均明顯得到延長，表明將其制備成脂質(zhì)體后可起到長循環(huán)效應(yīng)的效果。張洪[79]等利用乳化蒸發(fā)和低溫固化相結(jié)合的方法，制備EM固體脂質(zhì)納米粒，體內(nèi)藥動學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示EM固體脂質(zhì)納米�？删徔刂漆尫臙M，消除速率明顯低于單獨(dú)藥物EM，藥物EM的生物利用度得到明顯的改善。典靈輝[80]等利用薄膜分散法將EM包載于聚合物膠束中，體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示EM可被緩慢釋放。Wang[81]等選用泊洛沙姆188和吐溫-80作為表面活性劑，利用髙壓勻質(zhì)法制備了EM固體脂質(zhì)納米粒，體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，EM固體脂質(zhì)納米�？捎行б种迫橄侔┘�(xì)胞MCF-7、MDA-MB-231的增殖。Shi[82]等制備了EM納米乳劑，體內(nèi)藥動學(xué)及組織分布結(jié)果表明，EM納米乳的AUC0-∞，Cmax，t1/2和MRT0-∞明顯比EM混懸液的高，且納米乳中EM的清除率明顯低于單獨(dú)用藥。以上研究結(jié)果可見，藥物傳遞系統(tǒng)對于疏水性藥物的重要性。圖4大黃素水溶液（左）和RADA16-I-大黃素膠體混懸溶液（右）磁力攪拌48h后的狀態(tài)Fig.4PhotographsofEMaqueoussolutionasacontrol(left)andRADA16-I-EMcolloidalsuspensionsolution(right)aftermagneticstirringfor48h圖5大黃素和RADA16-I的相互作用示意圖[75]Fig.5SchematicrepresentationoftheinteractionbetweenEMandRADA16-I

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大黃素抗腫瘤作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 石娜娜,何若琳,陳旭義,龐西朋,張景童,劉洋.  環(huán)球中醫(yī)藥. 2019(04)
[2]新合成材料PLGA-STPGS制備的大黃素納米粒誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡[J]. 田燕,劉琦,張成鴻,高萌,金越,徐紅,李慶偉.  西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(05)
[3]離子互補(bǔ)型自組裝短肽在藥物傳遞系統(tǒng)中應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 孟翠,韋威朋,張坤琴,王玉和,唐富山.  遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2017(06)
[4]摻入不同形式PEG的大黃素脂質(zhì)體大鼠體內(nèi)藥動學(xué)過程[J]. 沈麗萍,顏冬雪,趙善科,尹美林,孫玉琦.  中國新藥雜志. 2017(06)
[5]大黃素新型制劑抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J]. 馬明星,黃嬛,李明娟,蔣小紅.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(27)
[6]聚合物藥物結(jié)合物膠束在抗腫瘤藥物遞送方面的研究進(jìn)展[J]. 尹曉蘭,張波,劉永軍,張娜.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2016(05)
[7]大黃素soluplus聚合物膠束的制備及質(zhì)量評價(jià)[J]. 典靈輝,于恩江,程紀(jì)倫,郭向華,黃紫榮,張振聲.  中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2014(16)
[8]大黃素固體脂質(zhì)納米粒在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)研究[J]. 張洪,張福明,閆士君.  中國藥師. 2011(02)

博士論文
[1]載阿霉素組氨酸修飾透明質(zhì)酸納米粒的制備及抗腫瘤研究[D]. 武敬亮.中國海洋大學(xué) 2013



本文編號：3436453