目的:分析癲癇發(fā)作后24 h內(nèi)P2X7受體（P2X7R）和神經(jīng)連接蛋白（NLGN）的表達特點,并探討P2X7R抑制劑影響癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作程度的可能機制。方法:將健康雄性SD大鼠按隨機數(shù)字表法分為6組,分別為1 h、3 h、6 h、12 h、24h組及空白對照組（每組3只）;除對照組外,其余組均制備為氯化鋰-匹魯卡品癲癇模型,Racine評分量表評級達4或5級為造模成功。依次于癲癇發(fā)作后1 h、3 h、6 h、12 h及24 h將各組大鼠處死,空白對照組與1 h組一同處理,采用蛋白免疫印跡法檢測P2X7R、NLGN1及NLGN2在各組大鼠海馬和內(nèi)嗅皮質(zhì)中的表達情況。進一步按隨機數(shù)字表法將健康雄性SD大鼠分為干預組（造模前腹腔注射P2X7R抑制劑+載體）和對照組（造模前腹腔注射等劑量生理鹽水+載體）,每組3只。記錄兩組大鼠藥物誘發(fā)癲癇的潛伏時間,以判斷癲癇發(fā)作程度;之后采用蛋白免疫印跡法檢測兩組大鼠海馬和內(nèi)嗅皮質(zhì)中NLGN1、NLGN2的表達情況,以判斷P2X7R抑制劑對其表達的影響結(jié)果:按照Racine評分量表分別對1 h、3 h、6 h、12 h及24 h組大鼠進行評級,均達到4或5級... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：34 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白印跡法檢測P2X7R在癲癇發(fā)作

山西醫(yī)科大學碩士學位論文10（圖注圖2蛋白印跡法檢測NLGN在癲癇發(fā)作后不同時間點的表達情況A,B.NLGN1在海馬中的表達情況，統(tǒng)計結(jié)果顯示，1h、3h、6h組的表達量明顯高于對照組，并隨發(fā)作時間延長有降低的趨勢（P＜0.0001）；C,D.NLGN1在內(nèi)嗅皮質(zhì)中的表達情況，統(tǒng)計結(jié)果顯示，1h、3h組的表達量明顯高于對照組，12h和24h組的表達含量低于對照組（均P＜0.05），整體趨勢呈隨發(fā)作時間延長先上升后降低（P＜0.0001）；E,F.NLGN2在海馬中的表達情況，統(tǒng)計結(jié)果顯示，3h、6h組的表達量明顯高于對照組，并隨發(fā)作時間延長有降低的趨勢（P＜0.0001）；G,H.NLGN2在內(nèi)嗅皮質(zhì)中的表達情況，統(tǒng)計結(jié)果顯示，1h、3h組的表達量明顯高于對照組，（均P＜0.05），并隨發(fā)作時間延長有先上升后降低的趨勢（P＜0.0001）。（a與對照組比較，b與1h組比較，c與3h組比較，d與12h組比較，P＜0.05）。3.2給予A804598后，動物行為學的變化與NLGN家族分子的變化3.2.1行為學如圖3所示，SD大鼠經(jīng)過P2X7R抑制劑A804598處理后，癲癇發(fā)作等級達到Racine評分為4級的時間（給藥后到癲癇發(fā)作的時間，即潛伏期）明顯延長。未經(jīng)過A804598處理的SD大鼠達到4級癲癇持續(xù)狀態(tài)的平均時間為(20±3.055)分鐘，而經(jīng)過P2X7R抑制劑A804598處理的SD大鼠，達到癲癇持續(xù)狀態(tài)的平均時間為(34.5±2.6458)分鐘。圖3達到Racine評分4級的時間（圖注圖3顯示，從給予匹魯卡品開始計時，得出SD大鼠癲癇發(fā)作達到Racine評分達到4級的總時間。與對照組比較，干預組藥物誘發(fā)癲癇的潛伏時間明顯延長[分別為（34.5±2.6458）

山西醫(yī)科大學碩士學位論文10（圖注圖2蛋白印跡法檢測NLGN在癲癇發(fā)作后不同時間點的表達情況A,B.NLGN1在海馬中的表達情況，統(tǒng)計結(jié)果顯示，1h、3h、6h組的表達量明顯高于對照組，并隨發(fā)作時間延長有降低的趨勢（P＜0.0001）；C,D.NLGN1在內(nèi)嗅皮質(zhì)中的表達情況，統(tǒng)計結(jié)果顯示，1h、3h組的表達量明顯高于對照組，12h和24h組的表達含量低于對照組（均P＜0.05），整體趨勢呈隨發(fā)作時間延長先上升后降低（P＜0.0001）；E,F.NLGN2在海馬中的表達情況，統(tǒng)計結(jié)果顯示，3h、6h組的表達量明顯高于對照組，并隨發(fā)作時間延長有降低的趨勢（P＜0.0001）；G,H.NLGN2在內(nèi)嗅皮質(zhì)中的表達情況，統(tǒng)計結(jié)果顯示，1h、3h組的表達量明顯高于對照組，（均P＜0.05），并隨發(fā)作時間延長有先上升后降低的趨勢（P＜0.0001）。（a與對照組比較，b與1h組比較，c與3h組比較，d與12h組比較，P＜0.05）。3.2給予A804598后，動物行為學的變化與NLGN家族分子的變化3.2.1行為學如圖3所示，SD大鼠經(jīng)過P2X7R抑制劑A804598處理后，癲癇發(fā)作等級達到Racine評分為4級的時間（給藥后到癲癇發(fā)作的時間，即潛伏期）明顯延長。未經(jīng)過A804598處理的SD大鼠達到4級癲癇持續(xù)狀態(tài)的平均時間為(20±3.055)分鐘，而經(jīng)過P2X7R抑制劑A804598處理的SD大鼠，達到癲癇持續(xù)狀態(tài)的平均時間為(34.5±2.6458)分鐘。圖3達到Racine評分4級的時間（圖注圖3顯示，從給予匹魯卡品開始計時，得出SD大鼠癲癇發(fā)作達到Racine評分達到4級的總時間。與對照組比較，干預組藥物誘發(fā)癲癇的潛伏時間明顯延長[分別為（34.5±2.6458）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]免疫炎癥因素在癲癇中的作用機制[J]. 張伊佳,秦炯.  中國免疫學雜志. 2019(08)
[2]側(cè)腦室注射miRNA-22對癲癇大鼠海馬P2X7受體及炎性因子表達的影響[J]. 吳興饒,孫婷,李秋波,褚旭,孔慶霞.  中華行為醫(yī)學與腦科學雜志. 2019 (03)



本文編號：3436438