巖藻聚糖硫酸酯作為褐藻所固有的細(xì)胞間多糖,是一種水溶性的雜聚多糖,又被稱為褐藻糖膠。研究表明,巖藻聚糖硫酸酯通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、阻滯細(xì)胞周期和抑制細(xì)胞遷移等多條途徑抑制腫瘤細(xì)胞增殖,但是其作用靶點研究較少。因此,為解決上述抑制腫瘤的機制以及作用靶點的問題,本課題通過設(shè)計系列實驗首先從細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期和細(xì)胞遷移等方面對巖藻聚糖硫酸酯抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性的機制進(jìn)行了初步地探究,接著從蛋白水平和基因水平進(jìn)一步證明了巖藻聚糖硫酸酯抑制腫瘤的通路靶點以及信號通路。具體包括以下幾個方面:（1）巖藻聚糖硫酸酯抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性的研究通過MTT法探究多種來源的巖藻聚糖硫酸酯對不同細(xì)胞增殖活性的影響,研究結(jié)果表明800 μg/mL時實驗室提取的巖藻聚糖硫酸酯對HT-29細(xì)胞增殖活性的抑制作用最明顯,抑制率約為60%;探究巖藻聚糖硫酸酯對細(xì)胞遷移、周期以及凋亡等方面的影響時,結(jié)果表明800 μg/mL時,巖藻聚糖硫酸酯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的效果最為顯著,約有80%的細(xì)胞處于凋亡晚期:阻滯細(xì)胞G0/G1期次之,阻滯率約為50%;抑制細(xì)胞遷移的效果并不顯著,抑制率僅有30%,這表明巖藻聚糖硫酸酯主要通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２不同濃度巖藻聚糖硫酸酯對ＨＴ－２９細(xì)胞遷移活性的影響??（Ａ）不同濃度巖藻聚糖硫酸酯下ＨＴ－２９細(xì)胞遷移的結(jié)果圖（ｌ〇〇ｘ）?（Ｂ）小室下層??細(xì)胞數(shù)量統(tǒng)計結(jié)果圖

３．３巖藻聚糖硫酸酯阻滯ＨＴ－２９細(xì)胞周期結(jié)果??通過流式細(xì)胞術(shù)檢測巖藻聚糖硫酸酯對ＨＴ－２９細(xì)胞周期的影響，結(jié)果如圖??２－３所示，與對照組相比，實驗組加入巖藻聚糖硫酸酯后能夠阻滯細(xì)胞周期，隨??著巖藻聚糖硫酸酯的濃度增大，細(xì)胞Ｇ０／Ｇ１期受到明顯的阻滯，在８０〇ｎｇ／ｍＬ時??細(xì)胞阻滯率約為５０％。??（Ａ＞?＂Ｉ?ａ?－ｉ?＿??＾?５ｊ?ｓｉｒ??Ｏ?９０?ｌＯＯ?ＩＳＯ?２００?３＊０??Ｏ?Ｍｇ／ｍＬ?２００?ＭＱ／ｍＬ??ａ?ｒｇ??８?＂?Ｂ?〇￡？〇＾￣?Ｉ?ｎ？〇？??＾?＿?Ｈｉ?ＭＰ〇３?〇?■?０〇？丨??；：ｌ??——ｆ?■?ｉ?ｆｘ＇ｉ?＇ｙ?ｉ?＊＊?１??〇?ｓｏ?ｔｏｅ?ｉｍ＞?ａａｏ?？〇?ｓｏ?ｔｏｏ?？？〇?ｍｏ?２〇ｏ??４００?ｐｇ／ｍＬ?８〇ｆ）Ｍｇ／ｍ？＿??（Ｂ）??■■Ｉ?Ｃ０／Ｑ１??１＾?ｓ??ｉ〇〇－ｉ?ｗａｒｎ?Ｇ２／Ｍ??．：Ｉ｜Ｉ?Ｍ?ｉｌｌ?Ｌｉ??０?２００?４００?８００??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（｜ｊｇ／ｍＬ）??圖２－３不同濃度巖藻聚糖硫酸酯對ＨＴ－２９細(xì)胞周期的影響??２５??

（Ａ）不同濃度巖藻聚糖硫酸酯下ＨＴ－２９細(xì)胞的周期分布圖（Ｂ）各細(xì)胞周期細(xì)胞??數(shù)量統(tǒng)計結(jié)果圖Ｚｐ＜０．１ＶＳ對照組，ｐ＜０．０５ＶＳ對照組，…ｐ＜０．０１ＶＳ對照組。??３．４巖藻聚糖硫酸酯誘導(dǎo)ＨＴ－２９細(xì)胞調(diào)亡驗證??通過Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ雙染法檢測巖藻聚糖硫酸酯誘導(dǎo)ＨＴ－２９細(xì)胞凋亡，如??圖２－４所示，與對照組相比，實驗組在８００呢／ｍＬ時有８０％的細(xì)胞處于凋亡晚??期，且隨著巖藻聚糖硫酸酯濃度的增大，趨向于凋亡晚期的細(xì)胞明顯增多，由此??可以證明巖藻聚糖硫酸酯能夠顯著誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。??（Ａ＞??????．３．６９?０．０１００?：?Ｑ１?Ｑ？??５．０５?３４．Ｓ??：謝：—＾??ｊ＇?＿，時，?－？?＊?？＇?－?－?？．?？?？?？．？丨??…?．＊■?ａ．＊＊：．??°＾／ｍＬ?２００?Ｍｇ／ｍＬ??￣ｉ??—??？?Ｑ１?Ｑ２?ｉｎ＊�。�?—???ｉｒｆ＊?ｓａ１?ｉ＊－?｜?■?＊?—￣—?—■？？？■＿？雷?？—？￣?■■＿■■■???ｉ丨■?＿?＿?＿■！??ｆｔｌ－Ｈ?？？＊?Ｉ＊＊?ＩＱ＊?？＊＊??４００?ｐｇ／ｍＬ?８００?ｎｇ／ｍＬ??（Ｂ）?ｍｍ?ｑｉ?ｍｍ?Ｑ２??ｍｍ?Ｑ３?〇４??ｌＯＱｎｉ?一??？＊ｒ＊ｒ??ＢＯ－??＾?ｅ〇－?７?ｓｒ?＊＊＊??§＞４?ｉ?Ｉ?ｔ??■ｉ?１０Ｖ?ｍ?＊?ｍ??ＭＵＵＬ??０?２００?４００?８００??Ｃｏｎ?ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（｜ｉｇ／ｍＬ）??圖２－４不同濃度巖藻聚糖硫酸酯對ＨＴ－２９細(xì)胞凋亡的影響??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3410359