目的:研究泛素樣含PDH和環(huán)指域1（UHRF1）對(duì)甲狀腺乳頭狀癌雌激素受體ERα和ERβ表達(dá)及其發(fā)生發(fā)展的影響。方法:應(yīng)用免疫組化（IHC）、Real-time PCR檢測(cè)正常甲狀腺組織和甲狀腺乳頭狀癌組織中UHRF1、雌激素受體ERα和ERβ的蛋白及mRNA表達(dá)情況;Western blot、Real-time PCR檢測(cè)正常甲狀腺細(xì)胞Nthy-ori3-1、甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞BCPAP和K1中UHRF1、雌激素受體ERα和ERβ的蛋白及mRNA表達(dá)情況;Real-time PCR檢測(cè)UHRF1過(guò)表達(dá)或干擾對(duì)雌激素受體ERα和ERβ的mRNA表達(dá)影響;甲基化特異性PCR（MSP）檢測(cè)UHRF1過(guò)表達(dá)或干擾對(duì)雌激素受體ERα和ERβ基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化程度的影響;MTT、Transwell分別檢測(cè)UHRF1過(guò)表達(dá)或干擾對(duì)甲狀腺細(xì)胞增殖、侵襲和遷移影響。結(jié)果:與正常甲狀腺組織比較,甲狀腺乳頭狀癌組織中UHRF1和ERα的蛋白及mRNA表達(dá)顯著增高,而ERβ的蛋白及mRNA表達(dá)顯著降低;在甲狀腺組織中,UHRF1蛋白表達(dá)與ERα蛋白表達(dá)呈正相關(guān),而與ERβ蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān);高UHRF1、ER... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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UHRF1、ERα和ERβ蛋白在PTC和癌旁正常甲狀腺組織中的表達(dá)(×400)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文182.5在甲狀腺細(xì)胞中，UHRF1、ERα和ERβ的蛋白表達(dá)如圖2所示：與正常甲狀腺細(xì)胞Nthy-ori3-1比較，在甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞BCPAP和K1中，UHRF1和ERα的蛋白表達(dá)水平顯著增高（P<0.05），而ERβ蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）；在Nthy-ori3-1中，ERα蛋白表達(dá)水平顯著低于ERβ蛋白表達(dá)水平，ERα/ERβ蛋白比率為0.44，顯著小于1；而在BCPAP和K1中，ERα蛋白表達(dá)水平顯著高于ERβ蛋白表達(dá)水平，ERα/ERβ蛋白比率分別為2.37和2.85，顯著大于1。結(jié)果說(shuō)明，在甲狀腺細(xì)胞中，UHRF1蛋白表達(dá)水平與ERα/ERβ蛋白比率呈正相關(guān)；甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞UHRF1蛋白表達(dá)水平和ERα/ERβ蛋白比率顯著高于正常甲狀腺細(xì)胞。圖2甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞BCPAP和K1與正常甲狀腺細(xì)胞Nthy-ori3-1中UHRF1、ERα和ERβ蛋白表達(dá)水平以及ERα/ERβ蛋白比率的比較。*P<0.05，與Nthy-ori3-1細(xì)胞組比較。Figure2ComparisonofUHRF1,ERαandERβproteinexpressionlevelsandERα/ERβproteinratiosinthyroidpapillarycarcinomacellsBCPAPandK1andnormalthyroidcellsNthy-ori3-1.*P<0.05comparedwithNthy-ori3-1cellsgroup.2.6在甲狀腺細(xì)胞中，UHRF1、ERα和ERβ的mRNA表達(dá)如圖3所示：與正常甲狀腺細(xì)胞Nthy-ori3-1比較，在甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞BCPAP和K1中，UHRF1和ERα的mRNA表達(dá)水平顯著增高（P<0.05），而ERβ

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文19mRNA表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）。在Nthy-ori3-1中，ERαmRNA表達(dá)水平顯著低于ERβmRNA表達(dá)水平，ERαmRNA/ERβmRNA比率為0.35，顯著小于1，而在BCPAP和K1中，ERαmRNA表達(dá)水平顯著高于ERβmRNA表達(dá)水平，ERαmRNA/ERβmRNA比率分別為2和2.41，顯著大于1。結(jié)果說(shuō)明，在甲狀腺細(xì)胞中，UHRF1mRNA表達(dá)水平與ERαmRNA/ERβmRNA比率呈正相關(guān)，甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞UHRF1mRNA表達(dá)水平和ERαmRNA/ERβmRNA比率顯著高于正常甲狀腺細(xì)胞。3討論P(yáng)TC是一種與雌激素相關(guān)的腫瘤，經(jīng)甲狀腺乳頭狀癌動(dòng)物模型研究證實(shí)：雌激素可以促進(jìn)PTC發(fā)展[6]；體外研究也表明：雌激素對(duì)培養(yǎng)的PTC細(xì)胞有促增生作用[5]；這說(shuō)明雌激素在PTC的發(fā)展中起促進(jìn)作用。雌激素對(duì)靶細(xì)胞的作用主要是由雌激素受體ERα和ERβ介導(dǎo)，ERα和ERβ常共表達(dá)參與雌激素的生理和病理生理反應(yīng)[17]。ERα和ERβ由獨(dú)立不同的基因編碼，雖有相似的結(jié)構(gòu)，但在結(jié)構(gòu)圖3甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞BCPAP和K1與正常甲狀腺細(xì)胞Nthy-ori3-1中UHRF1、ERα和ERβ的mRNA表達(dá)水平以及ERαmRNA/ERβmRNA比率的比較。*P<0.05，與Nthy-ori3-1細(xì)胞組比較。Figure3ComparisonofUHRF1mRNA,ERαmRNAandERβmRNAexpressionlevelsandERαmRNA/ERβmRNAratiosinthyroidpapillarycarcinomacellsBCPAPandK1andnormalthyroidcellsNthy-ori3-1.*P<0.05comparedwithNthy-ori3-1cellsgroup.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]UHRF1通過(guò)miR-206調(diào)控ERα表達(dá)促進(jìn)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移[J]. 許琳婉,劉革力,茍茜,邱伊波,劉智敏.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2020(02)
[2]泛素樣含PHD和環(huán)指域蛋白1（UHRF1）的功能及其參與腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 魏飛龍,焦點(diǎn),鄭國(guó)旭,魏銘,王磊,楊安鋼,溫偉紅.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(06)
[3]三陰乳腺癌與雌激素受體β表達(dá)的研究進(jìn)展[J]. 于洋,周偉強(qiáng).  沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2016(02)
[4]UHRF1在表觀遺傳調(diào)控和腫瘤診治中的研究進(jìn)展[J]. 桂珍,嚴(yán)楓.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(02)



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