目的:研究泛素樣含PDH和環(huán)指域1（UHRF1）對甲狀腺乳頭狀癌雌激素受體ERα和ERβ表達及其發(fā)生發(fā)展的影響。方法:應(yīng)用免疫組化（IHC）、Real-time PCR檢測正常甲狀腺組織和甲狀腺乳頭狀癌組織中UHRF1、雌激素受體ERα和ERβ的蛋白及mRNA表達情況;Western blot、Real-time PCR檢測正常甲狀腺細胞Nthy-ori3-1、甲狀腺乳頭狀癌細胞BCPAP和K1中UHRF1、雌激素受體ERα和ERβ的蛋白及mRNA表達情況;Real-time PCR檢測UHRF1過表達或干擾對雌激素受體ERα和ERβ的mRNA表達影響;甲基化特異性PCR（MSP）檢測UHRF1過表達或干擾對雌激素受體ERα和ERβ基因啟動子區(qū)甲基化程度的影響;MTT、Transwell分別檢測UHRF1過表達或干擾對甲狀腺細胞增殖、侵襲和遷移影響。結(jié)果:與正常甲狀腺組織比較,甲狀腺乳頭狀癌組織中UHRF1和ERα的蛋白及mRNA表達顯著增高,而ERβ的蛋白及mRNA表達顯著降低;在甲狀腺組織中,UHRF1蛋白表達與ERα蛋白表達呈正相關(guān),而與ERβ蛋白表達呈負相關(guān);高UHRF1、ER... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

UHRF1、ERα和ERβ蛋白在PTC和癌旁正常甲狀腺組織中的表達(×400)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文182.5在甲狀腺細胞中，UHRF1、ERα和ERβ的蛋白表達如圖2所示：與正常甲狀腺細胞Nthy-ori3-1比較，在甲狀腺乳頭狀癌細胞BCPAP和K1中，UHRF1和ERα的蛋白表達水平顯著增高（P<0.05），而ERβ蛋白表達水平顯著降低（P<0.05）；在Nthy-ori3-1中，ERα蛋白表達水平顯著低于ERβ蛋白表達水平，ERα/ERβ蛋白比率為0.44，顯著小于1；而在BCPAP和K1中，ERα蛋白表達水平顯著高于ERβ蛋白表達水平，ERα/ERβ蛋白比率分別為2.37和2.85，顯著大于1。結(jié)果說明，在甲狀腺細胞中，UHRF1蛋白表達水平與ERα/ERβ蛋白比率呈正相關(guān)；甲狀腺乳頭狀癌細胞UHRF1蛋白表達水平和ERα/ERβ蛋白比率顯著高于正常甲狀腺細胞。圖2甲狀腺乳頭狀癌細胞BCPAP和K1與正常甲狀腺細胞Nthy-ori3-1中UHRF1、ERα和ERβ蛋白表達水平以及ERα/ERβ蛋白比率的比較。*P<0.05，與Nthy-ori3-1細胞組比較。Figure2ComparisonofUHRF1,ERαandERβproteinexpressionlevelsandERα/ERβproteinratiosinthyroidpapillarycarcinomacellsBCPAPandK1andnormalthyroidcellsNthy-ori3-1.*P<0.05comparedwithNthy-ori3-1cellsgroup.2.6在甲狀腺細胞中，UHRF1、ERα和ERβ的mRNA表達如圖3所示：與正常甲狀腺細胞Nthy-ori3-1比較，在甲狀腺乳頭狀癌細胞BCPAP和K1中，UHRF1和ERα的mRNA表達水平顯著增高（P<0.05），而ERβ

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文19mRNA表達水平顯著降低（P<0.05）。在Nthy-ori3-1中，ERαmRNA表達水平顯著低于ERβmRNA表達水平，ERαmRNA/ERβmRNA比率為0.35，顯著小于1，而在BCPAP和K1中，ERαmRNA表達水平顯著高于ERβmRNA表達水平，ERαmRNA/ERβmRNA比率分別為2和2.41，顯著大于1。結(jié)果說明，在甲狀腺細胞中，UHRF1mRNA表達水平與ERαmRNA/ERβmRNA比率呈正相關(guān)，甲狀腺乳頭狀癌細胞UHRF1mRNA表達水平和ERαmRNA/ERβmRNA比率顯著高于正常甲狀腺細胞。3討論PTC是一種與雌激素相關(guān)的腫瘤，經(jīng)甲狀腺乳頭狀癌動物模型研究證實：雌激素可以促進PTC發(fā)展[6]；體外研究也表明：雌激素對培養(yǎng)的PTC細胞有促增生作用[5]；這說明雌激素在PTC的發(fā)展中起促進作用。雌激素對靶細胞的作用主要是由雌激素受體ERα和ERβ介導(dǎo)，ERα和ERβ常共表達參與雌激素的生理和病理生理反應(yīng)[17]。ERα和ERβ由獨立不同的基因編碼，雖有相似的結(jié)構(gòu)，但在結(jié)構(gòu)圖3甲狀腺乳頭狀癌細胞BCPAP和K1與正常甲狀腺細胞Nthy-ori3-1中UHRF1、ERα和ERβ的mRNA表達水平以及ERαmRNA/ERβmRNA比率的比較。*P<0.05，與Nthy-ori3-1細胞組比較。Figure3ComparisonofUHRF1mRNA,ERαmRNAandERβmRNAexpressionlevelsandERαmRNA/ERβmRNAratiosinthyroidpapillarycarcinomacellsBCPAPandK1andnormalthyroidcellsNthy-ori3-1.*P<0.05comparedwithNthy-ori3-1cellsgroup.

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]泛素樣含PHD和環(huán)指域蛋白1（UHRF1）的功能及其參與腫瘤發(fā)生發(fā)展機制的研究進展[J]. 魏飛龍,焦點,鄭國旭,魏銘,王磊,楊安鋼,溫偉紅.  細胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(06)
[3]三陰乳腺癌與雌激素受體β表達的研究進展[J]. 于洋,周偉強.  沈陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2016(02)
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